潘 靖,洪靜芳,季清娥,陳家驊
(福建農(nóng)林大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院,福建福州350002)
南亞實(shí)蠅Bactrocera tau(Walker)亦稱(chēng)南亞寡鬃實(shí)蠅,屬雙翅目Diptera,實(shí)蠅科Tephritidae,果實(shí)蠅屬Bactrocera Macquart,是絲瓜、南瓜、黃瓜、苦瓜、西葫蘆等13種瓜類(lèi)蔬菜的重要害蟲(chóng),也是柑橘類(lèi)、芒果、番茄、木瓜、番石榴等70多種水果的重要害蟲(chóng)。目前在我國(guó)14個(gè)大陸省區(qū)以及臺(tái)灣都有分布,我國(guó)華南、西南、華中地區(qū)的危害日趨嚴(yán)重(周鎖奎等,1993;黃可輝等,2005)。其中人工飼料的研究是南亞實(shí)蠅生物學(xué)、生態(tài)學(xué)、生理學(xué)、遺傳學(xué)等研究的基礎(chǔ)。為數(shù)不多的研究表明(張清源等,1991;周波等,2005),目前南亞實(shí)蠅仍然無(wú)法進(jìn)行人工大量飼養(yǎng),缺乏人工飼料的研究。本研究以一些廉價(jià)且易購(gòu)買(mǎi)的材料為主要成分,參考本研究所已有的橘小實(shí)蠅人工飼料配方和人工飼料技術(shù)(季清娥等,2009;季清娥等,2009;任真真等,2007),研究南亞實(shí)蠅幼蟲(chóng)人工飼料對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育的影響,為南亞實(shí)蠅的人工飼養(yǎng)打下基礎(chǔ)。
供試南亞實(shí)蠅采自福建漳州平和絲瓜園地內(nèi)帶蟲(chóng)落瓜,已在本研究所繁育6代以上。
在室溫(25±1)℃、RH(65±10)%、周期為14L:10D的條件下飼養(yǎng),成蟲(chóng)使用材質(zhì)為鋁合金骨架外罩100目尼龍紗網(wǎng)的飼養(yǎng)籠(規(guī)格30 cm×30 cm×30 cm)飼養(yǎng)。
1.3.1 配方 麥麩:800 g,蔗糖:300 g,啤酒廢酵母:150 g,飼料添加劑:6.5 g,水:1.5 L。
1.3.2 制備 按照配方將稱(chēng)好的飼料倒入較大的塑料盆或桶內(nèi),攪拌均勻后,倒入幼蟲(chóng)飼養(yǎng)盤(pán)(塑料材質(zhì),49 cm×32 cm×5 cm),每盤(pán)倒入1份人工飼料,約3 kg,手工弄平整,并在中間位置鋪上一層衛(wèi)生紙,噴濕(無(wú)鼓起氣泡),備用。
1.4.1 采卵 南亞實(shí)蠅成蟲(chóng)發(fā)育至性成熟時(shí)(成蟲(chóng)羽化后約20 d性成熟)即進(jìn)行交配、產(chǎn)卵。
(1)采卵瓶采卵:用絲瓜皮涂抹采卵瓶?jī)?nèi)壁,然后將采卵瓶放入人工飼養(yǎng)籠內(nèi),約5-6 h后取出采卵瓶,用水將卵從采卵瓶中沖出,用量筒測(cè)收集到的卵量,每盤(pán)飼料鋪約6 ml卵,將卵平鋪在衛(wèi)生紙上,用噴壺灑水使卵大致分散。
(2)絲瓜采卵:取整條新鮮絲瓜,洗凈削皮,放入人工飼養(yǎng)籠內(nèi)采卵,2-3h后取出絲瓜置于空飼料盤(pán)內(nèi)。
1.4.2 化蛹 分別將(1)、(2)的飼養(yǎng)盤(pán)放在跳蟲(chóng)架上,跳蟲(chóng)架下方放有沙盤(pán),在室溫(25±1)℃、RH(65±10)%、周期為14L:10D的條件下飼養(yǎng),約1周后,老熟幼蟲(chóng)會(huì)從飼養(yǎng)盤(pán)內(nèi)跳出落在沙盤(pán)內(nèi)化蛹,約4d后將蛹從沙中篩出。
1.4.3 質(zhì)量監(jiān)測(cè) 蛹重:隨機(jī)選取8 d蛹齡的蛹100粒,用賽多利斯Sartorius BS 124S電子天平(精確值±0.0001 g)稱(chēng)重,記錄其重量W。幼蟲(chóng)化蛹率:隨機(jī)抽取各世代及CK剛孵化幼蟲(chóng)100頭,分別置于底部鋪有細(xì)沙的人工飼料和絲瓜內(nèi),在室溫(25±1)℃、RH(65±10)%、周期為14L:10D的條件下飼養(yǎng),待幼蟲(chóng)老熟跳入沙中并全部化蛹,篩沙、清點(diǎn)活蛹數(shù)量P,計(jì)算幼蟲(chóng)化蛹率S%。
羽化率、飛出率:在1.2 m×0.6 m×1.2 m 養(yǎng)蟲(chóng)籠(鋁合金框架、尼龍網(wǎng)紗)內(nèi)放置5只直徑10 cm、高20 cm、內(nèi)壁涂有滑石粉的黑色塑料圓筒,每個(gè)筒內(nèi)放入100粒蛹,在室溫(25±1)℃、RH(65±10)%、周期為14L:10D的養(yǎng)蟲(chóng)室內(nèi)羽化。4 d后打開(kāi)養(yǎng)蟲(chóng)籠,計(jì)算塑料圓筒內(nèi)死蛹數(shù)量A、半羽化蛹數(shù)量B、畸形實(shí)蠅數(shù)量C和正常但沒(méi)能飛出圓筒的實(shí)蠅數(shù)量D,分別計(jì)算羽化率E%和飛出率F%。連續(xù)飼養(yǎng)3代,每代質(zhì)量監(jiān)測(cè)重復(fù)3次,取平均值。
卵孵化率:隨機(jī)抽取各世代及CK后代卵100粒,置于培養(yǎng)皿中濕潤(rùn)的濾紙上,在室溫(25±1)℃、RH(65±10)%、周期為14L:10D的條件下,48 h后清點(diǎn)孵化的卵數(shù)L,計(jì)算卵孵化率H%。
1.4.4 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2010和IBM SPSS Statistics 19.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行分析處理,試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用單因素方差分析,方差檢驗(yàn)為T(mén)urkey's法。
從表1可以看出,使用幼蟲(chóng)人工飼料飼養(yǎng)的南亞實(shí)蠅,隨著世代的增加,蛹重有降低趨勢(shì);與對(duì)照組相比,連續(xù)3代的蛹重(分別為14.056 g/100粒、13.030 g/100粒、13.263 g/100粒)都大于對(duì)照(12.666 g/100粒),可見(jiàn)南亞實(shí)蠅幼蟲(chóng)在自制的幼蟲(chóng)人工飼料中可以獲得相同或者更多的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
顯著水平方面,F(xiàn)1 代與對(duì)照差異極顯著(F=8.982,P=0.006 <0.01),F(xiàn)2、F3 代則與對(duì)照組無(wú)明顯差異,說(shuō)明隨著世代增加,南亞實(shí)蠅幼蟲(chóng)越來(lái)越適應(yīng)幼蟲(chóng)人工飼料的飼養(yǎng)環(huán)境,和自然條件下瓜養(yǎng)的相差無(wú)幾。
表1 人工飼料對(duì)蛹重的影響Table 1 Influence of artificial diet on the weight of pupae
從表2可以看出,3個(gè)連續(xù)世代幼蟲(chóng)存活率分別為81.67%、83.00%、82.67%,與瓜養(yǎng)對(duì)照組(84.33%)相比,幼蟲(chóng)存活率略低,但沒(méi)有顯著性差異(F=0.582,P=0.643 >0.05)。說(shuō)明使用人工飼料飼養(yǎng)的南亞實(shí)蠅幼蟲(chóng)可以正常存活化蛹。
表2 人工飼料對(duì)幼蟲(chóng)存活率的影響Table 2 Influence of artificial diet on the survival rate of larvae
從表3可以看出,使用幼蟲(chóng)人工飼料飼養(yǎng)的南亞實(shí)蠅和瓜養(yǎng)南亞實(shí)蠅的羽化率沒(méi)有顯著性差異。隨著世代增加,羽化率略有所降低,F(xiàn)1羽化率為92.33%,F(xiàn)2為89.33%,F(xiàn)3為89.67%,總體上仍能保持在90%左右,與瓜養(yǎng)南亞實(shí)蠅羽化率(92.00%)無(wú)顯著性差異(F=2.063,P=0.184 >0.05),對(duì)大量飼養(yǎng)影響不大。
表3 人工飼料對(duì)羽化率的影響Table 3 Influence of artificial diet on the emergence rate of adults
由表4可知,隨著世代增加,使用幼蟲(chóng)人工飼料飼養(yǎng)的南亞實(shí)蠅飛出率有所下降(分別為89.67%、86.33%、87.33%),相比對(duì)照瓜養(yǎng)(89.33%)略低,但未見(jiàn)顯著性差異(F=0.821,P=0.518>0.05)。說(shuō)明幼蟲(chóng)人工飼料飼養(yǎng)對(duì)南亞實(shí)蠅的飛出率無(wú)顯著性影響,在馴化過(guò)程中南亞實(shí)蠅的飛出率略有下降,但總體影響不大。
表4 人工飼料對(duì)飛出率的影響Table 4 Influence of artificial diet on the fly ability of adults
從表5可以看出,各個(gè)世代的后代卵孵化率分別為94.00%、93.33%、92.00%,與瓜養(yǎng)后代卵孵化率(94.67%)相比沒(méi)有顯著性差異(F=1.138,P=0.390 >0.05)。說(shuō)明使用幼蟲(chóng)人工飼料進(jìn)行飼養(yǎng)對(duì)南亞實(shí)蠅的后代繁殖沒(méi)有顯著的影響。
表5 人工飼料對(duì)卵孵化率的影響Table 5 Influence of artificial diet on the hatching rate of eggs
南亞實(shí)蠅幼蟲(chóng)的人工飼養(yǎng)目前仍主要采用其天然寄主植物的果實(shí)如絲瓜、黃瓜、南瓜、苦瓜等進(jìn)行飼養(yǎng)(李小珍等,2007),但受到寄主、季節(jié)的限制,成本高,用天然飼料飼養(yǎng)南亞實(shí)蠅已經(jīng)不能滿(mǎn)足各項(xiàng)研究的需要(王延年,1990;方杰等,2003);另一方面,由于農(nóng)藥的大量施用,每批次的天然寄主植物果實(shí)的質(zhì)量難以控制,因而無(wú)法供應(yīng)大量生理標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)一的、健康的實(shí)驗(yàn)用蟲(chóng)(梁光紅等,2003;袁盛勇等,2003)。本試驗(yàn)提供的南亞實(shí)蠅幼蟲(chóng)人工飼料配方,原料來(lái)源廣、成本低,能充分滿(mǎn)足南亞實(shí)蠅幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)發(fā)育的需要,可為生理學(xué)、遺傳學(xué)、毒理學(xué)等方面的研究及防治工作提供大量健康、發(fā)育整齊的供試蟲(chóng)源。
本幼蟲(chóng)人工飼料飼養(yǎng)的南亞實(shí)蠅與瓜養(yǎng)的對(duì)照相比,在蛹重、羽化率、飛行能力、幼蟲(chóng)存活率、后代卵孵化率等指標(biāo)上沒(méi)有顯著性差異,但研究中發(fā)現(xiàn)隨著世代的不斷增加,即隨南亞實(shí)蠅馴化時(shí)間的增加,其幼蟲(chóng)期、蛹期、性成熟期均相應(yīng)縮短,因此,對(duì)南亞實(shí)蠅幼蟲(chóng)人工飼料的進(jìn)一步改進(jìn)還需要從其配方中麥麩、蔗糖、粉狀啤酒廢酵母和防腐劑的正交組合入手,深入研究隨著世代增加的最適組合(Jayanthi and Verghese,2002;Singh and Moore,1985)。同時(shí),在飼養(yǎng)條件、飼養(yǎng)器具等許多方面需進(jìn)一步研究和改進(jìn)。
方杰,朱麟,楊振德.2003.昆蟲(chóng)人工飼料配方研究概況及問(wèn)題探討.四川林業(yè)科技,24(4):18-25.
黃可輝,郭瓊霞,虞赟,黃振.2005.南亞寡鬃實(shí)蠅的風(fēng)險(xiǎn)分析.武夷科學(xué),21:77-80.
季清娥,任真真,黃居昌,陳家驊.2009.橘小實(shí)蠅幼蟲(chóng)液體人工飼料正交設(shè)計(jì)優(yōu)化.福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào),38(6):567-572.
季清娥,任真真,黃居昌,陳家驊.2009.幼蟲(chóng)液體人工飼料中主成分對(duì)橘小實(shí)蠅的影響.福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào),29(1):37-40.
梁光紅,陳家驊,楊建全,黃居昌,季清娥.2003.桔小實(shí)蠅國(guó)內(nèi)研究概況.華東昆蟲(chóng)學(xué)報(bào),12(2):90-98.
李小珍,劉映紅,賀智勇.2007.南亞實(shí)蠅對(duì)六種果實(shí)的趨性和產(chǎn)卵選擇性.昆蟲(chóng)知識(shí),44(1):82-85.
任真真,季清娥,陳家驊.2008.橘小實(shí)蠅幼蟲(chóng)液體人工飼料中pH值對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育的影響.福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào),17(1):17-21.
王延年.1990.昆蟲(chóng)人工飼料的發(fā)展、應(yīng)用和前途.昆蟲(chóng)知識(shí),27(5):310-312.
袁盛勇,肖春,孔瓊,陳斌,李正躍.2003.桔小實(shí)蠅實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)技術(shù)研究.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),25(4):577-580.
張清源,林振基,劉金耀,林向陽(yáng).1991.南亞寡鬃實(shí)蠅生物學(xué)特性.植物檢疫,5(3):164-167.
周波,劉映紅,劉麗紅.2005.不同食料對(duì)南亞實(shí)蠅生長(zhǎng)發(fā)育及繁殖的影響.西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),27(3):301-304.
周鎖奎,李廣學(xué),邱仲華,李掌,李續(xù)榮.1993.南亞寡鬃實(shí)蠅生物學(xué)特性觀察及防治研究.植物保護(hù),019(005):11-12.
Jayanthi PDK,Verghese A.2002.A simple and cost-effective mass rearing technique for the tephritidae fruit fly,Bactrocera dorsalis(Hendel).Current Science,82(3):266-268.
Singh P,Moore RF.1985.Handbook of Insect Rearing.Elsevier,Amsterdam,Oxford,NewYork,Tokyo.Vol.1:287-293.