， ，

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 北京畜牧獸醫(yī)研究所，動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100193；2.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué) 畜牧獸醫(yī)學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 110866)

機(jī)體受到高溫、缺氧及氧化等刺激會(huì)產(chǎn)生全身性應(yīng)答反應(yīng)，包括機(jī)體體溫及激素等變化，同時(shí)產(chǎn)生以基因表達(dá)為主的細(xì)胞應(yīng)答反應(yīng)。動(dòng)物處在不良的飼養(yǎng)、運(yùn)輸、屠宰等環(huán)境中，會(huì)產(chǎn)生熱應(yīng)激。熱應(yīng)激能夠影響動(dòng)物機(jī)體的生產(chǎn)性能、代謝機(jī)能以及免疫性能，同時(shí)會(huì)激活機(jī)體細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)途徑，改變機(jī)體內(nèi)基因表達(dá)。目前熱應(yīng)激的研究中，較多針對(duì)的是熱應(yīng)激引起機(jī)體表觀性能的變化，而熱應(yīng)激對(duì)細(xì)胞內(nèi)在應(yīng)答以及對(duì)信號(hào)途徑的調(diào)控仍不明確，因此本文就熱應(yīng)激引起機(jī)體內(nèi)信號(hào)途徑的變化作一綜述。

1 熱休克應(yīng)答與熱休克蛋白的產(chǎn)生

當(dāng)細(xì)胞受到熱應(yīng)激后，細(xì)胞膜的生理狀態(tài)紊亂，膜內(nèi)脂類(lèi)顯著下降并在短時(shí)間內(nèi)不能形成磷脂雙分子層結(jié)構(gòu)，此外，細(xì)胞膜脂類(lèi)-蛋白的相互作用也受到影響[1]。熱應(yīng)激增加膜的流動(dòng)性，抑制Ca2+轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)如鈣泵(Ca2+-ATP激酶)和Na+/Ca2+交換器中Ca2+的轉(zhuǎn)運(yùn)，誘發(fā)胞質(zhì)中Ca2+濃度增加[2]。熱應(yīng)激也導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)以及亞細(xì)胞器發(fā)生變化，如線粒體損傷，誘發(fā)活性氧(reactive oxygen species，ROS)的產(chǎn)生[3]。機(jī)體對(duì)熱應(yīng)激產(chǎn)生的反應(yīng)，稱為熱休克應(yīng)答(heat shock response，HSR)，HSR誘導(dǎo)分子伴侶、蛋白酶和維持細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)蛋白質(zhì)的基因編碼，用于抵抗應(yīng)激產(chǎn)生的損傷。HSR的最大特點(diǎn)是誘導(dǎo)熱休克因子(heat shock factor，HSF)磷酸化產(chǎn)生高度保守的熱休克蛋白(heat shock protein，HSP)[4]。

HSF1是大多數(shù)熱休克家族蛋白如HSP70和HSP90的啟動(dòng)子。在正常條件下，HSF1與調(diào)控蛋白如HSP70和HSP90在胞液中形成雜合物，使HSF1處于抑制狀態(tài)。當(dāng)機(jī)體受到熱應(yīng)激后，HSF1通過(guò)非激活單體向三聚體的轉(zhuǎn)變、向核的易位、與熱應(yīng)激原件結(jié)合等步驟完成激活，成為激活熱休克基因和靶基因上游的共識(shí)序列，從而激活HSP基因轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)生HSP[5-6]。

HSP是機(jī)體受到應(yīng)激時(shí)產(chǎn)生的特異性指標(biāo)，在正常情況下機(jī)體內(nèi)HSP含量較少，機(jī)體遭受應(yīng)激后HSP含量顯著升高[7]。HSP按分子量大小分為以下幾個(gè)家族：HSP100、HSP90、HSP70、HSP60、小分子HSP和泛素等，其中最重要的是HSP70家族[8]。HSP70是細(xì)胞的主要伴侶分子，指導(dǎo)蛋白質(zhì)折疊和易位。HSP也參與細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞凋亡以及抗氧化防御等過(guò)程。研究顯示，HSR引發(fā)HSF與HSP的改變，這一過(guò)程通過(guò)細(xì)胞內(nèi)ROS和Ca2+調(diào)控多條信號(hào)通路的變化來(lái)實(shí)現(xiàn)。

多位學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)熱應(yīng)激能夠產(chǎn)生ROS[9-10]，ROS是一類(lèi)有高度化學(xué)反應(yīng)活性的含氧基團(tuán)，是細(xì)胞氧化磷酸化過(guò)程中氧的代謝副產(chǎn)物，包括羥自由基、超氧陰離子、單線態(tài)氧、過(guò)氧化氫及脂質(zhì)過(guò)氧化自由基等[11]。正常的生理?xiàng)l件下，動(dòng)物機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生ROS，同時(shí)機(jī)體防御系統(tǒng)清除ROS，使體內(nèi)的ROS處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)。當(dāng)機(jī)體受到應(yīng)激后，細(xì)胞線粒體損傷產(chǎn)生過(guò)量的ROS，這些防御系統(tǒng)不足以清除ROS至平衡狀態(tài)，導(dǎo)致機(jī)體處于氧化應(yīng)激狀態(tài)[12]。ROS為應(yīng)激過(guò)程中的關(guān)鍵因子，主要調(diào)控絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)、磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K)、絲蘇氨酸蛋白激酶(serine threonine kinase，Akt)等來(lái)完成HSR。

Ca2+是細(xì)胞內(nèi)的關(guān)鍵離子，在正常生理狀態(tài)下，細(xì)胞有一套完善的體系來(lái)維持鈣的穩(wěn)態(tài)平衡，細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度極低(10-7mol/L)，細(xì)胞外Ca2+濃度較高(10-3mol/L)，當(dāng)受到熱應(yīng)激時(shí)，細(xì)胞膜流動(dòng)性增加[13]，熱應(yīng)激改變Na+/Ca2+交換器并激活機(jī)械敏感性離子通道以及瞬時(shí)感受器電位(TRP)通道，改變Ca2+的平衡，引起細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度增加。Ca2+可以直接激活鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶II(calmodulin-dependent protein kinase II，CaMKII)，參與HSF的轉(zhuǎn)錄，也可以通過(guò)調(diào)控二酰甘油(diacylglycerol，DAG)、磷脂酶C(phospholipase C，PLC)的活性及蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)的磷酸化誘導(dǎo)HSF磷酸化，引起HSR見(jiàn)圖1。

2 熱休克應(yīng)答相關(guān)信號(hào)途徑

2.1 Ras超家族

Ras超家族是一類(lèi)受細(xì)胞膜約束的GTP連接蛋白，具有高度保守的GTP結(jié)合結(jié)構(gòu)域，根據(jù)序列結(jié)構(gòu)和細(xì)胞功能被分為七個(gè)家族：Sar1、Arf、SRβ、Ran、Rab、Rho和Ras。Ras超家族在多種細(xì)胞生理功能上起重要作用，包括細(xì)胞周期、細(xì)胞分化、調(diào)控細(xì)胞的形態(tài)和運(yùn)動(dòng)以及細(xì)胞內(nèi)分子的轉(zhuǎn)運(yùn)等功能[14]。Ras超家族有“繼電器”的功能，調(diào)控其上游細(xì)胞質(zhì)的信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)以及下游細(xì)胞表面的受體酪氨酸激酶的活性。Ras超家族的生理功能受多種信號(hào)途徑調(diào)控，包括Raf-ERK1/2信號(hào)途徑，PI3K-Akt信號(hào)途徑以及Rho-Rac1-NADPH信號(hào)途徑[15]。

熱應(yīng)激(39 ℃-42 ℃，15 min)激活Ras超家族信號(hào)途徑的主要組分-Ras和Rac1，熱應(yīng)激誘導(dǎo)細(xì)胞膜的流動(dòng)也是依賴于Rac1信號(hào)途徑完成的。熱應(yīng)激可能通過(guò)影響膜的結(jié)構(gòu)和流動(dòng)性，激活多種生長(zhǎng)因子受體，這些生長(zhǎng)因子激活Ras信號(hào)途徑，另外，Ras信號(hào)途徑也可能直接被熱應(yīng)激激活[16]。熱應(yīng)激時(shí)，Rac1N17(Rac1基因的顯性負(fù)效突變體)過(guò)表達(dá)時(shí)會(huì)造成Rac1的顯性突變，能夠阻止HSF1的激活以及HSP的表達(dá)[17]，這種情況也發(fā)生在低氧應(yīng)激、重金屬應(yīng)激以及機(jī)械應(yīng)激中，這意味著Rac1蛋白在應(yīng)激誘導(dǎo)的HSF1的激活和HSP70的表達(dá)中起重要作用[18-19]。

圖1 熱應(yīng)激調(diào)控HSP基因表達(dá)相關(guān)信號(hào)途徑Fig.1 Heat stress regulates signaling pathways related to HSP gene expression

2.2 MAPK信號(hào)途徑

MAPK途徑包含大量的絲氨酸/蘇氨酸激酶，參與調(diào)節(jié)各種細(xì)胞過(guò)程，包括細(xì)胞增殖、分化、應(yīng)激適應(yīng)和細(xì)胞凋亡?；罨暗腗APK存在于胞漿內(nèi)，活化后即進(jìn)入核內(nèi)激活靶基因。MAPK通路的上游因子為MAPK級(jí)聯(lián)激酶(MAPKK，包括MEK1/2等)和MAPK級(jí)聯(lián)激酶磷酸化激酶(MAPKKK，包括Raf蛋白等)。MAPK通路信號(hào)途徑是通過(guò)MAPKKK、MAPKK和MAPK連續(xù)的磷酸化作用實(shí)現(xiàn)的[20]。熱應(yīng)激影響膜的穩(wěn)定性，激活表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶，從而激活Ras蛋白，Ras蛋白進(jìn)一步激活MAPKKK如Raf蛋白，完成一系列的磷酸化作用，最終激活MAPK[21]。

MAPK激酶基于結(jié)構(gòu)上的差異，分為三個(gè)亞家族：細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal-regulated kinase，ERK)，氨基末端激酶/應(yīng)激活化蛋白激酶(Jun N-Terminal Kinase/stress-activatived protein kinase，JNK/SAPK)和p38絲裂原活化蛋白激酶(p 38 mitogen activated protein kinase，p38MAPK)。Michael等[22]研究證實(shí)，ERK途徑與細(xì)胞增殖有關(guān)，JNK和p38MAPK與應(yīng)激有關(guān)。最近研究顯示在細(xì)胞應(yīng)對(duì)熱應(yīng)激時(shí)，ERK、JNK、p38MAPK都在HSR中起重要作用。

2.2.1 ERK信號(hào)途徑 Lin等[21]對(duì)NIH3T3成纖維細(xì)胞進(jìn)行瞬時(shí)(5 min)熱應(yīng)激(43 ℃)可以通過(guò)磷酸化ERK的Thr202/Tyr204位點(diǎn)激活ERK，這一效應(yīng)可以通過(guò)顯性失活的Raf突變抑制。有研究顯示，在氧化應(yīng)激、重金屬應(yīng)激等條件下，ERK信號(hào)途徑也能夠通過(guò)作用于HSF1的磷酸化誘導(dǎo)HSP70的表達(dá)，而抑制ERK信號(hào)途徑則減少HSP70的表達(dá)[23-24]。在熱應(yīng)激條件下，Jill等[25]對(duì)斑馬魚(yú)細(xì)胞進(jìn)行熱應(yīng)激(40 ℃)5 min～60 min，能增加ERK的磷酸化活性，并在熱應(yīng)激30 min時(shí)有顯著的上升(P<0.05)，同時(shí)誘導(dǎo)HSP70的表達(dá)，當(dāng)使用ERK的特異性抑制劑PD98059和U0126作用于熱應(yīng)激細(xì)胞時(shí)，會(huì)顯著降低HSP70的表達(dá)(P<0.05)，證明ERK信號(hào)途徑與HSR密切相關(guān)。然而，Sahin等[26]對(duì)鵪鶉進(jìn)行每天8 h的熱應(yīng)激(34 ℃)，持續(xù)12周發(fā)現(xiàn)，熱應(yīng)激能夠降低ERK活性。

2.2.2 JNK/SAPK信號(hào)途徑 在大鼠的肝臟細(xì)胞，熱應(yīng)激激活JNK/SAPK信號(hào)途徑、p38MAPK信號(hào)途徑以及上游激酶MKK3/6和PAK，但不能影響谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶的活性[27]。在MA-10細(xì)胞中，進(jìn)行10 min熱應(yīng)激(45 ℃)能夠快速激活ERK和JNK的活性[28]。對(duì)紫貽貝(一種貝類(lèi))進(jìn)行熱應(yīng)激后，能夠調(diào)控JNK和p38MAPK的磷酸化(P<0.01)，并誘導(dǎo)HSP70的上調(diào)[29]。

2.2.3 p38MAPK信號(hào)途徑 Banerjee等[30]證實(shí)，在肺部成纖維細(xì)胞中，熱應(yīng)激產(chǎn)生ROS，ROS進(jìn)一步調(diào)控激活p38MAPK，p38MAPK激活A(yù)kt信號(hào)途徑從而導(dǎo)致HSP70的產(chǎn)生。添加乙酰半胱氨酸(抗氧化劑)阻止p38MAPK磷酸化和HSP70的增加。添加SB203580(p38MAPK的特異性抑制劑)顯著抑制p38MAPK磷酸化(減少了80%磷酸化)，抑制HSF1的轉(zhuǎn)錄活性和核易位，并且減少了HSP70的表達(dá)(減少了近70%表達(dá)量)。Han等[31]發(fā)現(xiàn)熱應(yīng)激誘導(dǎo)p38MAPK在Thr180位點(diǎn)和Tyr182位點(diǎn)磷酸化。此外，p38MAPK在有絲分裂間期可受低劑量的氧化應(yīng)激激活[32]。

2.3 PI3K-Akt信號(hào)途徑

PI3K參與細(xì)胞的生長(zhǎng)、凋亡、細(xì)胞骨架的重組、代謝控制等過(guò)程，是細(xì)胞內(nèi)重要的調(diào)控蛋白之一，PI3K是特異性催化磷脂酰肌醇(PI)的激酶，是細(xì)胞內(nèi)重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子，PI3K活化產(chǎn)生PIP2和PIP3，這兩種類(lèi)脂產(chǎn)物可作為第二信使發(fā)揮信號(hào)級(jí)聯(lián)作用。PI3K根據(jù)催化亞基和作用底物分為Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型PI3K[33]。受體酪氨酸激酶、Gβγ二聚體以及Ras超家族均能激活PI3K，PI3K具有雙重酶活性即脂類(lèi)激酶和蛋白激酶的活性[34-35]。PI3K通常與Akt(也稱為蛋白激酶B，protein kinase B)聯(lián)合發(fā)揮作用，Akt是PI3K的主要下游靶蛋白，包括Akt1，Akt2，Akt3三種亞型。PI3K通過(guò)催化PIP2向PIP3的轉(zhuǎn)化、PIP3與Akt結(jié)合、磷酸肌醇依賴蛋白激酶1(Phosphoinositide dependent protein kinase 1，PDK1)與Akt的相互作用三個(gè)步驟完成對(duì)Akt的激活[36]。

熱應(yīng)激磷酸化Akt的Ser9位點(diǎn)，從而激活其下游途徑GSK3β。LY294002為PI3K的抑制劑，能特異性阻止Akt的磷酸化，由此可見(jiàn)熱應(yīng)激是通過(guò)PI3K激活A(yù)kt信號(hào)途徑的。熱應(yīng)激誘導(dǎo)的PI3K-Akt激活可能與凋亡抑制相關(guān)[28]。對(duì)大鼠進(jìn)行熱應(yīng)激(41 ℃)30 min后能夠提高Akt與mTOR的磷酸化水平(P<0.05)，從而增加蛋白質(zhì)合成[37]。對(duì)心肌細(xì)胞進(jìn)行熱應(yīng)激(42 ℃)20 min后能夠顯著增加Akt的磷酸化水平(P<0.05)[38]。用水浴的方法對(duì)大鼠進(jìn)行熱應(yīng)激(42 ℃)后能夠顯著激活A(yù)kt的活性(P<0.05)，顯著提高HSP70的表達(dá)量(P<0.05)[39]。

2.4 PKC信號(hào)途徑

PKC是一類(lèi)依賴于DAG以及Ca2+的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，是重要的信息傳導(dǎo)蛋白，介導(dǎo)生物信號(hào)從細(xì)胞膜向細(xì)胞核的傳遞，構(gòu)成細(xì)胞內(nèi)重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，對(duì)細(xì)胞分化、增殖和凋亡起重要調(diào)節(jié)作用[40]。

PKC通常以無(wú)活性的形式存在于細(xì)胞中，當(dāng)細(xì)胞受到熱應(yīng)激后，胞內(nèi)PIP2和PIP水平下降，激活PLC，使膜磷脂分解，產(chǎn)生三磷酸肌醇(IP3)和DAG，IP3是Ca2+動(dòng)員信使，促使Ca2+池中的Ca2+釋放，胞漿中Ca2+升高，從而激活PKC，而DAG可直接激活PKC，PKC被激活后，由胞漿轉(zhuǎn)向胞膜[41]。此外，PKC與MAPK之間存在相互聯(lián)系，PKC可激活MAPK上游激酶，引起MAPK的級(jí)聯(lián)磷酸化反應(yīng)。

多種研究顯示PKC參與應(yīng)激應(yīng)答，并產(chǎn)生HSP。緊張應(yīng)激能夠誘導(dǎo)PKC磷酸化，增加HSP70的表達(dá)，使用PKC抑制劑會(huì)抑制HSP70表達(dá)。對(duì)小鼠成纖維細(xì)胞進(jìn)行熱應(yīng)激(41 ℃～45 ℃)30 min后，PKC活性增強(qiáng)，使用PKC抑制劑chelerthrine chloride能顯著降低PCK活性，并抑制HSP70的表達(dá)(P<0.01)，使用PKC激動(dòng)劑PMA能提高PKC活性并促進(jìn)HSP的表達(dá)(P<0.01)。

3 小 結(jié)

綜上所述，熱應(yīng)激能夠引起機(jī)體細(xì)胞內(nèi)ROS和Ca2+的產(chǎn)生，通過(guò)激活Ras超家族、MAPK、PI3K/Akt、PKC信號(hào)途徑完成HSR，產(chǎn)生HSP。關(guān)于熱應(yīng)激引起的ROS和Ca2+的改變，其二者是否存在內(nèi)在的聯(lián)系還需要進(jìn)一步驗(yàn)證，ROS對(duì)于各個(gè)信號(hào)途徑的作用靶點(diǎn)也需要進(jìn)一步證實(shí)，熱應(yīng)激對(duì)于信號(hào)途徑的激活或抑制還存在一定爭(zhēng)論，這可能是由于不同機(jī)體對(duì)于熱應(yīng)激敏感程度不同導(dǎo)致的。熱應(yīng)激對(duì)于動(dòng)物生產(chǎn)性能以及動(dòng)物生理心理狀態(tài)都產(chǎn)生不利的影響，深入研究熱應(yīng)激對(duì)動(dòng)物機(jī)體的調(diào)控作用，并找出緩解動(dòng)物的熱應(yīng)激的方法，對(duì)動(dòng)物生產(chǎn)、動(dòng)物福利具有重要的意義。

參考文獻(xiàn)：

[1] Epand R M. Lipid polymorphism and protein-lipid interaction[J]. Biochim Biophys Acta, 1998,1376:353-368.

[2] Bromberg Z,Goloubinoff P, Saidi Y, et al. The membrane-associated transient receptor potential vanilloid channel is the central heat shock receptor controlling the cellular heat shock response in epithelial cells[J].PLoS One, 2013,8(2):e57149.

[3] Waring P. Redox active calcium ion channels and cell death[J]. Arch Biochem Biophys, 2005,434:33-42.

[4] Welch W J, Kang H S, Beckmann R P, et al. Response of mammalian cells to metabolic stress: changes in cell physiology and structure function of stress proteins[J].Curr Top Microbiol Immunol, 1991,167:31-55.

[5] Morimoto R I. Regulation of the heat shock transcriptional response: cross talk between a family of heat shock factors molecular chaperones and negative regulators[J]. Genes Dev, 1998,12:3 788-3 796.

[6] Pirkkala L, Nykanen P, Sistonen L. Roles of the heat shock transcription factors in regulation of the heat shock response and beyond[J]. FASEB J, 2001,15:1 118-1 131.

[7] 任寶波,王玉艷,王純凈,等.HSP70家族的分類(lèi)及基因結(jié)構(gòu)與功能[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2005,26(1):98-101.

[8] 鄔堂春,賀涵貞,張國(guó)高.熱休克蛋白研究的進(jìn)展與前景[J].中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2000,30(2):65-66.

[9] Khar A, Kumari A L, Pardhasaradhi B W, et al. Heat stress induced apoptosis in BC-8 cells derived from AK-5 tumor involves downregulation of Bcl-2 and generation of reactive oxygen species[J]. Indian J Exp Biol, 2006,44(10):802-808.

[10] Del Vesco A P,Gasparino E. Production of reactive oxygen species gene expression, and enzymatic activity in quail subjected to acute heat stress[J]. J Anim Sci, 2013,91(2):582-587.

[11] 王丙云,趙海全,馮 軍,等.不同毒力鴨肝炎病毒對(duì)雛鴨肝臟抗氧化功能的影晌[J].中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào),2002,22(5):450-452.

[12] Finkel T, Holbrook N J. Oxidants oxidative stress and the biology of aging[J]. Nature, 2000,408:239-247.

[13] Kültz D. Molecular and evolutionary basis of the cellular stress response[J]. Annu Rev Physiol, 2005,67:225-257.

[14] 張 巖,黃文秀,吳春福.Ras依賴型的MAPK細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路[J].醫(yī)學(xué)綜述,2007,13(3):189-191.

[15] Bar-Sagi D,Hall A. Ras and Rho GTPases: a family reunion[J]. Cell, 2000,103:227-238.

[16] Rudolph M G,Linnemann T, Grunewald P, et al. Thermodynamics of Ras effector and Cdc42 effector interactions probed by iso-thermal titration calorimetry[J]. J Biol Chem, 2001,276:23 914-23 921.

[17] Han S I, Oh S Y, Woo S H, et al. Implication of a small GTPase Rac1 in the activation of c-jun N-terminal kinase and heat shock factor in response of heat shock[J]. J Biol Chem,2001,276:1 889-1 895.

[18] Ozaki M, Deshpande S S,Angkeow P, et al. Rac1 regulates stress-induced, redox-dependent heat shock factor activation[J]. J Biol Chem, 2000,275:35 377-35 383.

[19] Xu Q, Schett G, Li C, et al. Mechanical stress-induced heat shock protein 70 expression in vascular smooth muscle cells is regulated by Rac and Ras small G proteins but not mitogen-activated protein kinases[J]. Circulation Res, 2000,86:1 122-1 128.

[20] YOSHIOKA K. Scaffold Proteins in Mammalian MAP Kinase Cascades[J]. J Nutr Biochem, 2004,135(6):657-661.

[21] Lin R Z, Hu Z W, Chin J H, et al. Heat shock activates c-Src tyrosine kinases and phosphatidylinositol3-kinase in NIH-3T3 fibroblasts[J]. Biol Chem, 1997,272:31 196-31 202.

[22] Michael C L, Arif J, Shao C, et al. The roles of MAPKs in disease[J]. Cell Res, 2008,18(4):436-442.

[23] Chen Y C, Tsai S H, Shen S C, et al. Alternative activation of extracellular signal-regulated protein kinases in curcumin and arsenite-induced HSP70 gene expression in human colorectal carcinoma cells[J]. Eur J Cell Biol, 2001,80,213-221.

[24] Taylor A R, Robinson M B, Gifondorwa D J, et al. Regulation of heat shock protein 70 release in astrocytes: role of signaling kinases[J]. Dev Neurobiol, 2007,67:1 815-1 829.

[25] Jill M K, June F E, Evan T K. Heat stress-induced heat shock protein 70 expression is dependent on ERK activation in zebra fish( Danio rerio) cells[J]. Comp Biochem Phys, 2008,150(3):307-314.

[26] Sahin K, Orhan C, Akemir F, et al. Tomato powder supplementation activates Nrf-2 via ERK/Akt signaling pathway and attenuates heat stress-related responses in quails[J]. Anim Feed Sci Tech, 2011,165(3-4):230-237.

[27] Maroni P, Bendinelli P, Zuccorononno C, et al. Cellular signaling after in vivo heat shock in the liver[J]. Cell Biol Int, 2000,24:145-152.

[28] Gorostizaga A, Brion L, Maloberti P, et al. Heat shock triggers MAPK activation and MK8P-1 induction in Leydig testicular cells[J]. Biochem Bioph Res Co, 2005,327:23-28.

[29] Gourgou E, Aggelii K, Beis I, et al. Hyperthermia induced Hsp70 and MT20 transcriptional upregulation are mediated by p38-MAPK and JNKs in Mytilus galloprovincialis(Lamarck); a prosurvival response[J]. J Exp Biol, 2010,213:347-357.

[30] Banerjee M S, Chakraborty P K, Dey R S, et al. Heat stress upregulates chaperone heat shock protein 70 and antioxidant manganese superoxide dismutase through reactive oxygen species (ROS) p38MAPK and Akt[J]. Cell Stress Chaperone, 2009,14:(6)579-589.

[31] Han S I, Oh S Y, Jeon W J, et al. Mild heat shock induces cycin D1 synthesis through multiple Ras signal pathways[J]. FEBS Lett, 2002,515:141-145.

[32] Kurata S. Selective activation of p38 MAPK cascade and mitotic arrest caused by low level oxidative stress[J]. Biol Chem, 2000,275:23 413-23 416.

[33] Scheeff D E, Bourne P E. Structural evolution of the protein kinase-like superfamily[J]. PloS Comput Biol Nlm, 2005,1(5):49.

[34] Kennedy S G, Wagner A, Conzen S D, et al. The PI3-kinase/Akt signaling pathway delivers an anti-apoptotic signal[J]. Genes Dev, 1997,11:701-713.

[35] Brazil D P, Hemmings B A. Ten years of protein kinase B signaling: a hard Akt to follow[J]. Trends Biochem Sci, 2001,26:657-664.

[36] 劉吉茹,朱宇旌,邵彩梅,等.磷脂酰肌醇3-激酶/絲蘇氨酸蛋白激酶信號(hào)途徑及其在肌肉生長(zhǎng)發(fā)育中的調(diào)控機(jī)制[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2013,25(4):692-698.

[37] Yoshihara T, Naito H, Kakigi R, et al. Heat stress activates the Akt/mTOR signaling pathway in rat skeletal muscle[J].Acta Physiol (Oxf), 2013,207(2):416-426.

[38] Wei H, Richard S, Vander H. Heat stress activates Akt via focal adhesion kinase-mediated pathway in neonatal rat ventricular myocytes[J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol, 2008,295:561-568.

[39] Li P C, Yang C C, Hsu S P, et al. Repetitive progressive thermal preconditioning hinders thrombosis by reinforcing phosphatidylinositol 3-kinase/Akt-dependent heat-shock protein/endothelial nitric oxide synthase signaling[J]. J Vasc Surg, 2012,56(1):159-170.

[40] 孫桂麗,王大鵬.蛋白激酶C在細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞凋亡中的作用[J].中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù),2009,13(7):1 360-1 363.

[41] Boellmann F, Thomas R S. The Identification of Protein Kinase C Iota as a Regulator of the Mammalian Heat Shock Response Using Functional Genomic Screens[J]. PLos one,2010,5(7):1-7.