劉延鑫，李婉濤，劉學芳，張鐘允，張振強，劉文第

（1.河南中醫(yī)學院，河南 鄭州450008；2.河南牧業(yè)經(jīng)濟學院，河南 鄭州450012）

奶牛隱性乳房炎是困擾乳業(yè)生產(chǎn)最嚴重的常見病、多發(fā)病，是造成奶牛生產(chǎn)經(jīng)濟損失的重要原因之一。奶牛乳房炎主要由多種非特定的病原微生物引起，主要有球菌、桿菌、支原體和病毒等，共達150多種，其中以鏈球菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌等為主，占到奶牛乳房炎致病菌的90%以上［1－3］。目前，奶牛隱性乳房炎的防治主要依靠抗生素與激素類藥物，但由于不同地區(qū)導致奶牛隱性乳房炎的菌株存在差異且耐藥菌株不斷出現(xiàn)，導致抗生素治療效果越來越下降，此外抗生素、激素濫用和殘留也存在人類健康問題和公共衛(wèi)生隱患。

中藥作為天然藥物，是尋找抗生素替代藥物的寶庫。許多中藥材成分具有抗菌抑菌作用和抗炎作用。因此，從中草藥中尋找有效的抑菌抗炎藥物成為防治奶牛乳房炎有前景的研究領(lǐng)域。紅巖草為虎耳草科虎耳草屬的多年生常綠草本植物，具有清熱解毒、涼血止血的功效。我們的前期研究表明，紅巖草中的氫醌對奶牛乳房炎5種主要致病菌－金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大腸桿菌、無乳鏈球菌和停乳鏈球菌有較好的體外抑菌作用［4］，臨床預(yù)試驗也表明，紅巖草提取物對奶牛急性乳房炎具有一定的抗炎效果。本試驗旨在研究紅巖草提取物對患有隱性乳房炎奶牛生產(chǎn)性能、乳汁體細胞數(shù)和血液生化指標的影響，為奶牛隱性乳房炎的中草藥防治提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 紅巖草水提物，藥物濃度為1g／mL。

1.2 試驗動物選擇及分組 根據(jù)河南省鄭州市某大型奶牛場DHI報告，按照產(chǎn)奶水平﹑泌乳階段﹑胎次、平均體重相同或相近原則，選擇體細胞數(shù)在50～150萬個／mL，乳房外觀無紅、腫、熱、痛，確診為隱性乳房炎的荷斯坦奶牛36頭，隨機分為對照組和試驗組，每組18頭，試驗預(yù)試期3d，正試期14d。

1.3 試驗處理 試驗?zāi)膛５幕A(chǔ)日糧相同。試驗組每天每頭牛灌服200mL紅巖草水提物，對照組以同樣方式對奶牛灌服200mL生理鹽水。

1.4 飼養(yǎng)管理 試驗牛舍為半開放棚式舍，所有試驗牛只均采用全自動轉(zhuǎn)盤式擠奶機擠奶，實行日擠奶2次、飼喂3次的工作制度。

1.5 指標的測定及方法

1.5.1 生產(chǎn)性能指標和體細胞數(shù)的測定 預(yù)試期開始及試驗期間每天均記錄日產(chǎn)奶量。在試驗開始、試驗第7天和第14天分別采集試驗牛只早、晚混合乳樣共50mL，測定乳脂率、乳蛋白率、非脂乳固體和體細胞數(shù)指標，所用儀器為FOSS FT120型全乳成分分析儀。

1.5.2 血液指標的測定 在試驗開始和試驗第7天和第14天，分別對試驗牛只頸靜脈采血10mL，采集完之后，現(xiàn)場分離血清，冰盒帶回實驗室測定白細胞（WBC）、紅細胞（RBC）、血紅蛋白（Hb）、血小板（PLT）和嗜堿性粒細胞比例（BAS%），所用儀器為日本東亞醫(yī)用電子株式會社生產(chǎn)的SF－3000全自動血細胞分析儀。

1.6 數(shù)據(jù)分析 數(shù)據(jù)采用SPSS16.0軟件進行處理，結(jié)果以平均值±標準差（Mean±SD）表示；采用t檢驗或單因素方差分析方法進行顯著性檢驗，顯著標準為P＜0.05，極顯著標準為P＜0.01。

2 結(jié)果與分析

2.1 紅巖草提取物對奶牛生產(chǎn)性能的影響 由表1可知，在試驗前，對照組和試驗組的奶牛樣本產(chǎn)奶量相近，乳脂率、乳蛋白、乳密度和非脂乳固體指標差異均不顯著（P＞0.05）；試驗期間，對照組產(chǎn)奶量呈下降趨勢，試驗組的產(chǎn)奶量呈上升趨勢。具體說來，在試驗第7天，試驗組的產(chǎn)奶量高于對照組4.33kg，但差異不顯著，試驗組和對照組的乳成分指標差異不顯著；試驗第14天，試驗組的產(chǎn)奶量高于對照組7.4kg，差異顯著（P＜0.05），試驗組乳脂率、乳蛋白和非脂乳固體指標均高于對照組，但差異不顯著（P＞0.05）。

表1 紅巖草提取物對奶牛生產(chǎn)性能的影響

2.2 紅巖草提取物對牛乳體細胞數(shù)的影響 由表2結(jié)果可以看出，紅巖草提取物對奶牛隱性乳房炎的治療具有積極作用。試驗前，試驗組和對照組的乳汁體細胞數(shù)均高于100萬個／mL，但在試驗第7天，試驗組的體細胞數(shù)為63.54萬個／mL，與試驗前比較體細胞數(shù)下降了40.89%，顯著低于對照組（P＜0.05），并且有10頭試驗牛只體細胞數(shù)低于50萬個／mL，治愈率為55.56%；在試驗第14天，試驗組的牛奶中體細胞數(shù)降至44.02萬個／mL，與試驗前比較體細胞數(shù)下降了59.05%，極顯著低于對照組（P＜0.01），有15頭奶牛體細胞數(shù)低于50萬個／mL，治愈率為83.33%。此外，在試驗前、試驗第7天和第14天，對照組奶牛的體細胞數(shù)差異不顯著（P＞0.05），但在試驗第14天，對照組有1頭奶牛測定的體細胞數(shù)低于50萬／mL，屬于自愈；試驗組第7天和第14天的牛乳體細胞數(shù)與試驗前比較均有顯著下降（P＜0.05）。

表2 紅巖草提取物對奶牛的牛乳體細胞數(shù)的影響

2.3 對奶牛的血液生化指標的影響 由表3可知，試驗前，試驗組和對照組奶牛血液中的的 WBC、RBC、Hb、PLT和BAS%比例無顯著差異；在試驗第7天，試驗組奶牛血液中的BAS%顯著高于對照組（P＜0.05），試驗組 WBC指標低于對照組，但和其他3項指標一樣，差異不顯著（P＞0.05）；試驗第14天，試驗組奶牛血液中的BAS%顯著高于對照組（P＜0.05），其他指標無顯著差異（P＞0.05）。此外，對照組的各項血液生化指標在試驗前、試驗第7天和第14天無顯著差異；試驗組第7天和第14天的BAS%均顯著高于試驗前（P＜0.05）。

表3 紅巖草提取物對奶牛血液指標的影響

3 討論

3.1 紅巖草提取物對奶牛生產(chǎn)性能的影響 我國奶牛的隱性乳房炎發(fā)病率目前仍然較高，高桂生等［5］2012年對我國冀東地區(qū)的奶牛隱性乳房炎發(fā)病率進行了流行病學調(diào)查，發(fā)現(xiàn)隱性乳房炎發(fā)病率高達60.63%（619／1021）。奶牛乳房炎不僅影響奶牛產(chǎn)奶量和降低牛奶的品質(zhì)，甚至使病牛失去生產(chǎn)性能，造成嚴重的經(jīng)濟損失［6－7］。據(jù)報道，奶牛隱性乳房炎可以使患病乳區(qū)泌乳量降低10%～15%［8］，而且也會造成牛乳中乳脂率和乳蛋白的下降［9］。本試驗中試驗?zāi)膛＞鶠轶w細胞數(shù)大于50萬個／mL，乳區(qū)未發(fā)現(xiàn)紅、腫、熱、痛的判定為隱性乳房炎的奶牛，在試驗期間，對照組的產(chǎn)奶量明顯出現(xiàn)下降，而經(jīng)過紅巖草提取物藥物治療后，試驗組的奶牛產(chǎn)奶量有上升的趨勢，在第14天顯著高于對照組（P＜0.05），隨著治療時間的延長，乳脂率和乳蛋白也有上升的趨勢。結(jié)果表明，紅巖草提取物有提高隱性乳房炎奶牛產(chǎn)奶量，改善乳品質(zhì)的作用。

3.2 紅巖草提取物對奶牛的牛乳體細胞數(shù)的影響奶牛乳腺感染細菌后，會導致乳汁中體細胞數(shù)量增多，牛奶中的體細胞主要來自血液的白細胞，小部分為乳腺組織的脫落上皮細胞，后者約占總細胞數(shù)的0%～7%［10］。因此，根據(jù)乳汁中體細胞數(shù)的多少來判斷奶牛是否患有乳房炎，特別是隱性乳房炎是一種較為簡便、可靠的方法［11］。國外學者認為隱性乳房炎是引起體細胞數(shù)上升的最重要的原因，二者之間存在較大正相關(guān)［12］。目前，國內(nèi)乳業(yè)巨頭在收奶時將體細胞數(shù)作為牛奶是否合格的一個重要指標，以50萬個／mL以上的體細胞數(shù)定為乳房炎的基準，這與國際標準吻合。本試驗結(jié)果表明，紅巖草提取物具有顯著降低奶牛的牛乳體細胞數(shù)的作用，試驗組服藥7d和14d后的體細胞數(shù)與對照組比，顯著下降，到14d治療期結(jié)束，試驗組的平均牛乳體細胞數(shù)低于50萬個／mL，已經(jīng)符合了國際原料奶的標準，且15頭患牛奶牛乳中體細胞數(shù)降低到了50萬個／mL，治愈率較高。

3.3 紅巖草提取物對奶牛血液指標的影響 本研究表明，紅巖草提取物具有一定的促進炎癥恢復的作用，試驗第7天和第14天的血液生化指標結(jié)果表明，試驗組的隱性乳房炎患牛血液中的 WBC的數(shù)量呈明顯下降趨勢，BAS%在試驗第7天和第14天顯著高于對照組（P＜0.05），BAS%指標升高表明血液中嗜堿性粒細胞的比例升高，據(jù)報道，嗜堿性粒細胞和肥大細胞在變態(tài)反應(yīng)中起著初級效應(yīng)細胞的作用，其被激活后可釋放組胺及細胞因子等多種炎癥介質(zhì)參與變態(tài)反應(yīng)的發(fā)生和發(fā)展［13］。我們之前的研究已經(jīng)表明，紅巖草中的成分氫醌在體外對奶牛隱性乳房炎的5種常見致病菌有較好的抗菌活性，所以，紅巖草提取物對奶牛的隱性乳房炎具有一定的抗菌消炎作用在意料之中，但是需要說明的是，并不是體外沒有抗菌活性的物質(zhì)就不能治療奶牛隱性乳房炎，如劉大程等［14］曾報道酵母提取物能改善奶牛乳品質(zhì)，提高乳蛋白和乳脂含量；顯著地降低乳中體細胞數(shù)，增強奶牛機體免疫力，對保護乳腺健康有良好的作用。本研究表明，紅巖草提取物除了可能通過抗菌作用治療奶牛隱性乳房炎外，尚具有一定的調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)的作用，具體的作用機制尚需進一步探討。

4 小結(jié)

綜上，紅巖草提取物可用于治療奶牛的隱性乳房炎，能夠提高其產(chǎn)奶量，具有一定的改善奶牛乳品質(zhì)作用，顯著降低乳汁體細胞數(shù)。但值得一提的是，奶牛隱性乳房炎病因復雜，必須采取綜合防制措施，加強奶牛的飼養(yǎng)管理，保持牛舍環(huán)境衛(wèi)生，執(zhí)行正確的擠奶、干奶程序，才能增強穩(wěn)固藥物治療的效果。

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