黃 冕， 劉 淼， 許浩然， 彭曉姣， 周奮進(jìn)， 白雪梅， 李?yuàn)檻洠?黃 靜

(四川大學(xué) 華西藥學(xué)院，四川 成都 610041)

桂花(OsmanthusfragransLour.)系木犀科木犀屬植物。桂花的花、果實(shí)、枝干、根或根皮均具有藥用價(jià)值，其中桂花根載于《綱目拾遺》，具有治療胃痛、牙痛、風(fēng)濕麻木、筋骨疼痛等作用[1]。

日香桂是新發(fā)現(xiàn)的屬于銀桂品系的穩(wěn)定品種。為了深入了解桂花植物的藥用物質(zhì)基礎(chǔ)，本課題組曾對(duì)日香桂干花的非揮發(fā)性成分進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究[2,3]，并且首次開(kāi)展了對(duì)日香桂根的化學(xué)成分研究[4]。

本文在前期研究的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步報(bào)道對(duì)日香桂根化學(xué)成分的研究結(jié)果。利用柱層析(硅膠，RP-C18和Sephadex LH-20凝膠)法和重結(jié)晶法從日香桂根的70%乙醇提取物中分離出8個(gè)單體化合物[甘露醇(1)，香草醛(2)，對(duì)羥基苯乙醇(3)，松柏醛(4)， (-)-橄欖樹(shù)脂素(5)， (+)-表松脂素(6)，白樺脂酸(7)和2α-羥基

Chart1

白樺脂酸(8)](Chart 1)，其結(jié)構(gòu)經(jīng)1H NMR和13C NMR確證。1～8為首次在該植物中發(fā)現(xiàn)；1，2，4～8為首次在該屬植物中發(fā)現(xiàn)；4為首次在該科植物中發(fā)現(xiàn)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1．1 儀器與試劑

ACE 200型和Varian INO-VA400/54型核磁共振儀(DMSO-d6為溶劑，TMS為內(nèi)標(biāo))；RP-C18反相柱；Sephadex LH-20凝膠柱。

日香桂根，2012年9月采自成都市溫江區(qū)，由黃靜教授鑒定其為日香桂Osmanthusfragrans‘Rixianggui’的根；硅膠G，青島海洋化工有限公司；其余所用試劑為分析純。

1.2 提取與分離

桂花根粗粉8 kg用70%乙醇浸泡后回流提取兩次(每次1.5 h)。過(guò)濾，合并提取液，減壓濃縮得流浸膏。用95%乙醇熱溶解后，過(guò)濾，濾液減壓濃縮得浸膏753 g。浸膏經(jīng)硅膠柱層析[梯度洗脫劑：V(二氯甲烷) ∶V(甲醇)=1 ∶0～0 ∶1]分離得7個(gè)流份(Ⅰ～Ⅶ)。其中Ⅱ～Ⅳ再分別經(jīng)硅膠柱層析[梯度洗脫劑：V(石油醚) ∶V(乙酸乙酯)=1 ∶0～1 ∶1]分離，再經(jīng)C-18反相柱層析和Sephadex LH-20凝膠柱層析以及重結(jié)晶等方法純化得1525 mg，220 mg，318 mg，460 mg，5406 mg， 6 80 mg，720 mg和88 mg。

2 結(jié)構(gòu)鑒定

1(乙醇)： 白色羽狀結(jié)晶；1H NMRδ： 4.42(d，J=5.6 Hz， 2H， 2，5-OH)， 4．36(t，J=5.6 Hz， 2H， 1，6-OH)， 4.12(d，J=7.2 Hz， 2H， 3，4-OH)， 3.60(m， 2H， 1b,6b-H)， 3.53(t，J=7.6 Hz， 2H， 3，4-H)， 3.45(m， 2H， 2,5-H)， 3.36(m， 2H， 1a,6a-H)；13C NMRδ： 71.5(C2，5)， 69.9(C3，4)， 64.1(C1，6)。 NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5]值基本一致。進(jìn)一步將1與甘露醇對(duì)照品共薄層，兩者的Rf值和顯色行為完全一致，故鑒定1為甘露醇。

2(丙酮)： 白色固體；1H NMR(CDCl3)δ： 9.83(s， 1H， CHO)， 7.44(d，J=8.0 Hz， 1H， 5-H)， 7.42(br s， 1H， 2-H)， 7.06(d，J=8.0 Hz， 1H， 6-H)， 6.31(s， 1H， OH)， 3.97(s， 3H， OCH3)；13C NMR(CDCl3)δ： 191.0(CHO)， 151.8(C3)， 147.2(C4)， 129.7(C1)， 127.5(C2)， 114.4(C5)， 108.8(C6)， 56.0(OCH3)。NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]值基本一致，故鑒定2為香草醛。

3(丙酮)： 無(wú)色固體；1H NMRδ： 7.00(d，J=8.0 Hz， 2H， 2，6-H)， 6.65(d，J=8.0 Hz， 2H， 3，5-H)， 3.52(t，J=7.2 Hz， 2H， 8-H)， 2.60(t，J=7.2 Hz， 2H， 7-H)；13C NMRδ： 155.9(C4)， 130.1(C2，6)， 130.0(C1)， 115.4(C3，5)， 63.1(C8)， 38.7(C7)。NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]值基本一致，故鑒定3為對(duì)羥基苯乙醇。

4(二氯甲烷)： 淡黃色膠狀固體； UV(254 nm)下呈藍(lán)色暗斑，10%H2SO4乙醇溶液顯色呈藍(lán)色；1H NMR(CDCl3)δ： 9.65(d，J=7.6 Hz， 1H， CHO)， 7.40(d，J=16.0 Hz， 1H， 7-H)， 7.12(dd，J=8.0 Hz， 1.6 Hz， 1H, 5-H)， 7.07(d，J=1.6 Hz， 1H， 3-H)， 6.96(d，J=8.0 Hz， 1H， 6-H)， 6.60(dd，J=16.0 Hz， 7.6 Hz， 1-H)， 6.05(s， 1H， 4-OH)， 3.95(s， 3H， 3-OCH3)。 NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]值基本一致，故鑒定4為松柏醛。

5(丙酮): 淡黃色粒狀結(jié)晶；1H NMR(CDCl3)δ： 7.00(d，J=1.2 Hz， 1H， 2-H)， 6.87(d，J=8.0 Hz， 1H， 5′-H)， 6.86(d，J=7.6 Hz， 1H， 5-H)， 6.85(dd，J=7.6 Hz， 1.2 Hz， 1H， 6-H)， 6.81(d，J=2.0 Hz， 1H， 2′-H)， 6.77(dd，J=8.0 Hz， 2.0 Hz， 1H, 6′-1)， 5.61(s， 1H， 4-OH)， 5.57(s， 1H， 4′-OH)， 4.69(d，J=8.0 Hz， 1H， 7-H)， 3.95(ddd，J=11.0 Hz， 5.2 Hz， 4.4 Hz， 9-H)， 3.91(d，J=9.2 Hz， 1H， 9′-H)， 3.89(s， 3H， 3′-OCH3)， 3.88(s， 3H， 3-OCH3)， 3.82(ddd，J=11.0 Hz， 5.2 Hz， 4.4 Hz， 9-H)， 3.67(d，J=9.2 Hz， 1H， 9′-H)， 3.05(d，J=13.6 Hz， 1H， 7′-H)， 2.94(d，J=13.6 Hz， 1H， 7′-H)， 2.48(dd，J=8.0 Hz， 5.2 Hz， 1H， 8-H)， 2.22(s， 1H， 8′-OH)， 1.64(br t，J=4.4 Hz， 1H， 9-OH)；13C NMR(CDCl3)δ： 146.8(C3)， 146.6(C3′)， 145.4(C4)， 144.7(C4′)， 133.8(C1)， 122.9(C6′)， 128.2(C1′)， 119.3(C6)， 114.5(C5′)，114.1(C5)， 112.8(C2′)， 108.7(C2)， 83.2(C7)， 81.3(C8′)， 77.0(C9′)， 60.7(C9)， 59.0(C8)， 56.0(3′-OCH3)， 55.9(3-OCH3)， 39.2(C10)。 NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]值基本一致，故鑒定5為(-)-橄欖樹(shù)脂素。

6(甲醇)： 淡黃色油狀物；1H NMR(CDCl3)δ： 6.90～6.81(m, 6H， 2，5，6，2′，5′，6′-H)， 4.74(d，J=2.4 Hz， 1H，7-H)， 3.90(s， 6H， 3，3′-OCH3)， 4.25(d，J=9.6 Hz， 1H， 7′-H)， 3.87(m， 4H， 9，9′-H)， 3.11(m， 2H， 8，8′-H)；13C NMR(CDCl3)δ： 146.7(C3，3′)， 145.2(C4，4′)， 132.8(C1，1′)， 118.9(C6，6′)， 114.3(C5，5′)， 108.6(C2，2′)， 85.8(C7，7′)， 71. 6(C9，9′)， 55.9(OCH3)， 54.1(C8，8′)。 NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]值基本一致，故鑒定6為(+)-表松脂素。

7(甲醇)： 白色固體；1H NMR(CDCl3)顯示6個(gè)羽扇豆烷型三萜化合物的特征角甲基[δ： 0.97(s, 3H, 27-CH3)， 0.96(s, 3H, 26-CH3)， 0.93(s, 3H, 25-CH3)， 0.82(s, 3H, 24-CH3)， 0.75(s， 3H， 23-CH3)， 1.69(s， 3H， 30-CH3)]， 2個(gè)烯氫信號(hào)[δ： 4.60(s， 1H， 29-H)， 4.74(s, 1H, 29-H)]和1組含氧取代氫信號(hào)[δ： 3.18(dd，J=10.8 Hz， 4.8 Hz, 1H, 3-H)；13C NMR(CDCl3)δ： 178.3(C28)， 150.7(C20)， 109.2(C29)， 78.2(C3)， 55.9(C17)， 55.2(C5)， 50.4(C9)， 49.0(C19)， 46.8(C18)， 42.3(C14)， 40.6(C8)， 38.7(C4)， 38.6(C1)， 38.0(C13)， 36.9(C22)， 37.0(C10)， 34.2(C7)， 32.2(C16)， 30.5(C15)， 29.6(C21)， 28.0(C23)， 27.3(C2)， 25.4(C12)， 20.8(C11)， 19.2(C30)， 18.2(C6)， 16.0(C26)， 15.4(C24)， 15.9(C25)， 14.6(C27)。 NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]值基本一致，故鑒定7為白樺脂酸。

8(甲醇)： 白色結(jié)晶；1H NMR(C5D5N)顯示6個(gè)羽扇豆烷型三萜化合物的特征角甲基信號(hào)[δ： 1.78(s， 3H， 30-CH3)， 1.21(s， 3H， 27-CH3)， 1.05(s， 3H， 26-CH3)， 1.04(s， 3H， 25-CH3)， 1.00(s， 3H， 24-CH3)， 0.80(s， 3H， 23-CH3)]， 2個(gè)烯氫信號(hào)[δ： 4.93(s， 1H， 29-H)， 4.76(s, 1H, 29-H)]， 1組含氧取代氫信號(hào)[δ： 3.44(m， 1H， 3-H)]以及1組含氧取代氫信號(hào)[δ： 4.09(dd，J=10.4 Hz， 3.5 Hz， 1H， 2-H)。證實(shí)8也同為羽扇豆烷型三萜化合物，但較7多一個(gè)羥基取代。NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]值基本一致，故鑒定8為2α-羥基白樺脂酸。

[1] 江蘇新醫(yī)學(xué)院. 中藥大辭典[M].上海:科學(xué)技術(shù)出版社，1986.

[2] 唐敏，譚小燕，鐘雪梅，等. 日香桂花的化學(xué)成分研究[J].華西藥學(xué)雜志，2009，24(1):10-13.

[3] 席貞，唐敏，王文靜，等. 日香桂花的化學(xué)成分研究(Ⅱ)[J].華西藥學(xué)雜志，2011，26(3):216-220.

[4] 劉淼，楊曉燕，彭曉姣，等. 日香桂根的化學(xué)成分研究[J].合成化學(xué)，2013，21(3):306-308.

[5] 鄭公銘，徐良雄，謝海輝，等. 龍眼果肉化學(xué)成分的研究[J].熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào)，2010，18(1):82-86.

[6] 苑艷光，王錄全，吳立軍，等. 刺五加莖的化學(xué)成分[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，19(5):325-327.

[7] 徐文，周光雄，戴光雄，等. 木荷莖的化學(xué)成分研究[J].中草藥，2010，41(6):863-866.

[8] Liu L H， Pu J X， Zhao J F,etal. A new lignan from Boschniakia himalaica[J].Chin Chem Lett，2004，15(1):43-45.

[9] Nishibe S， Tsukamoto H， Hisada S. Effect ofO-methylation andO-glucosylation on carbon-13 nuclearmagnetic resonance chemical shift of matairesionl，(+)-pinoresinol and (+)-epipinoresinol[J].Chem Pharm Bull，1984，32(11):4653-4657.

[10] 高慧媛，吳立軍，黑柳正典. 光皮木瓜的化學(xué)成分[J].中國(guó)天然藥物，2003，1(2):82-84.