★ 熊躍 曾文雪 何雙鳳

(1.江西省南昌市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 南昌 330003；2. 江西中醫(yī)學(xué)院 南昌 330006；3.石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司 石家莊 050035)

HPLC法測(cè)定不同產(chǎn)地酸棗仁中酸棗仁皂苷A的含量

★ 熊躍1曾文雪2*何雙鳳3

(1.江西省南昌市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 南昌 330003；2. 江西中醫(yī)學(xué)院 南昌 330006；3.石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司 石家莊 050035)

目的：采用HPLC法測(cè)定不同產(chǎn)地酸棗仁中酸棗仁皂苷A的含量，并客觀比較不同產(chǎn)地藥材的質(zhì)量。方法：用高效液相色譜法，使用Kromasil C18色譜柱(4.6mm×150mm,5μm)；流動(dòng)相:乙腈-水(30∶70)，檢測(cè)波長(zhǎng)204nm，流速0.8mL/min，柱溫25℃。結(jié)果：6個(gè)產(chǎn)地酸棗仁中酸棗仁皂苷A含量為0.5372%-0.0731%，不同產(chǎn)地酸棗仁中酸棗仁皂苷A含量有差異。結(jié)論：6個(gè)不同產(chǎn)地酸棗仁中酸棗仁皂苷A含量均符合藥典標(biāo)準(zhǔn)，其中陜西延安產(chǎn)區(qū)的酸棗仁藥材質(zhì)量較其他產(chǎn)地相比較好。

酸棗仁;酸棗仁皂苷A；高效液相色譜法

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器

Waters 600高效液相色譜儀(美國(guó)waters公司)，Waters 600四元梯度泵，996二極管陣列檢測(cè)器，Em-power工作站；TG-328型光電分析天平(上海天平儀器廠)；ZFQ-85A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海醫(yī)械專機(jī)廠)；KQ-250高頻數(shù)控超聲波清洗儀(昆山市超聲儀器有限公司)；HHS112型電熱恒溫水浴鍋(江蘇省醫(yī)療器械廠)。

1.2 藥材與試劑

酸棗仁皂苷A對(duì)照品，中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)110734-200509；山東濟(jì)南、陜西延安等6個(gè)產(chǎn)地的酸棗仁藥材，經(jīng)鑒定均符合藥材標(biāo)準(zhǔn)；乙腈為色譜純，水為高純水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與檢測(cè)方法

使用Kromasil C18色譜柱(4.6mm×150mm，5μm)；流動(dòng)相:乙腈-水(30∶70)，檢測(cè)波長(zhǎng)204nm，流速0.8mL/min，進(jìn)樣量：10μL，柱溫25℃。理論塔板數(shù)按酸棗仁皂苷A計(jì)算,不低于5 600，酸棗仁皂苷A色譜峰的分離度均大于1.5。[1]

2.2 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備

精密稱取酸棗仁皂苷A標(biāo)準(zhǔn)品0.5mg，加乙醇溶解定容至10mL搖勻，作為對(duì)照品溶液。

2.3 供試品溶液制備

精密稱取6份不同產(chǎn)地酸棗仁樣品各5g，加入100mL甲醇，沙氏提取器回流提取12h，后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將提取液中甲醇揮干，殘?jiān)?0mL水溶解，定量轉(zhuǎn)移至100mL分液漏斗中，依次用石油醚、水飽和正丁醇、正丁醇飽和的氨水溶液萃取，每次3次，每次10mL，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將提取液中的醇揮干，甲醇溶解殘?jiān)芤憾哭D(zhuǎn)移至5mL容量瓶，定容，搖勻，作為供試品溶液。[2]

2.4 線性關(guān)系考察

精密吸取對(duì)照品溶液酸棗仁皂苷A 20μL，注入色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定，測(cè)得酸棗仁皂苷A峰面積。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：Y=1839466X-42935，r=0.9996。酸棗仁皂苷A在0.05-0.98μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.5 精密度試驗(yàn)

精密吸取對(duì)照品溶液10μL，按上述色譜條件重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積，計(jì)算酸棗仁皂苷A的RSD為0.95%，結(jié)果表明本法精密度良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一批樣品(陜西延安)約5g，按供試品溶液制備項(xiàng)下方法制備溶液,分別于制備后的0、2、4、8、10、16、24h按色譜條件下進(jìn)樣，每次進(jìn)樣10μL，測(cè)定酸棗仁皂苷A的RSD為1.22%，結(jié)果表明供試品溶液在24h內(nèi)基本穩(wěn)定。[3]

2.7 重復(fù)性試驗(yàn)

精密稱取同一批酸棗仁樣品(陜西延安)5g，共6份，制備供試品溶液，并以同樣色譜條件加以測(cè)定,結(jié)果酸棗仁皂苷A的含量RSD為1.5%，表明本方法重復(fù)性較好，方法可行。

2.8 加樣回收率試驗(yàn)

精密稱取同一批酸棗仁樣品(陜西延安)5g，共6份,分別加入酸棗仁皂苷A對(duì)照品，按供試品溶液制備方法制備供試品溶液，按色譜條件下進(jìn)樣分析，計(jì)算加樣回收率。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 酸棗仁皂苷A回收率

2.9 樣品測(cè)定

取6個(gè)不同產(chǎn)地的酸棗仁樣品進(jìn)樣測(cè)定，6個(gè)產(chǎn)地酸棗仁中酸棗仁皂苷A含量為0.5372%-0.0731%。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 酸棗仁樣品測(cè)定結(jié)果

3 小結(jié)

對(duì)6個(gè)產(chǎn)地酸棗仁藥材測(cè)定中發(fā)現(xiàn)，酸棗仁皂苷A含量在0.0537%-0.0731%范圍內(nèi)，陜西延安產(chǎn)的酸棗仁其皂苷A成分含量較高，其存在差異的原因有待進(jìn)一步探究。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典.(一部)[S].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:241-242．

[2]李玉娟,車(chē)鎮(zhèn)濤,畢開(kāi)順，等.反相高效液相法測(cè)定酸棗仁中酸棗仁皂苷A的含量[J].中國(guó)中藥雜志，2001,26(5):309-310.

[3]張延妮,岳宣峰,王喆之.反相高效液相色譜同時(shí)測(cè)定五味子中五味子醇甲、五味子酯甲和五味子乙素的含量[J].分析科學(xué)學(xué)報(bào).2007，23(1)：41-44.

征稿啟事

《江西中醫(yī)藥》所設(shè)的重點(diǎn)欄目有《明醫(yī)心鑒》、《滕王閣醫(yī)話》等?！睹麽t(yī)心鑒》以介紹名老中醫(yī)經(jīng)驗(yàn)和中醫(yī)臨證心得為主，重點(diǎn)刊載中醫(yī)關(guān)于疑難病的診療經(jīng)驗(yàn)，要求觀點(diǎn)、方法新，經(jīng)驗(yàn)獨(dú)到。《滕王閣醫(yī)話》主要反映中醫(yī)教學(xué)、科研、臨床的一得之見(jiàn)，要求以小見(jiàn)大，有感而文，語(yǔ)言生動(dòng)流暢，可讀性強(qiáng)，富于知識(shí)性、趣味性。

DeterminationofJujubasideAinDifferentOriginSemenbyHPLC

XIONGYue1,ZENGWen-xue2*,HEShuang-feng3

1.IntegrativeMedicineHospitalofNanchang,JiangxiNanchang330003;2.JiangxiUniversityofTCM,Nanchang330006；3.ShijiazhuangYilingPharmaceutialCo.Ltd,Shijiazhuang050035

Objective: To develop a new method for the determination of Jujubaside A in different origin Semen . Methods:A HPLC method was set up , using Kromasil C18column , Acetonitrile-water (30∶70) as the mobile phase with a flow rate 0.8 mL/min ,column temperature 25℃. Results：The range of content of Jujubaside A in 6 origin Semen was 0. 5372% -0. 0731% . The content was difference . Conclusion：Jujuboside A levels of Six different origin Semen were in line with pharmacopoeia standards .The Semen quality in Yan'an was better than others.

Semen; Jujubaside A; HPLC

*通訊作者：曾文雪(1983-)，男，講師，博士，執(zhí)業(yè)藥師，江西信豐人，長(zhǎng)期從事中藥制劑新技術(shù)研究，E-mail：zengwenxue@126.com。

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2013-08-28))