趙 強(qiáng)，聞丹憶，孫建和*

(1．上海交通大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物學(xué)院，上海201101;2．上海睿智化學(xué)研究有限公司，上海201203)

0 引言

食管癌(esophageal carcinoma)是人類常見的惡性腫瘤之一，近年來全球食管癌的發(fā)病率和死亡率呈上升趨勢(shì)［1-2］．根據(jù)國(guó)際癌癥研究署2008年世界癌癥發(fā)病與死亡報(bào)告(Globocan 2008)估計(jì)，全球食管癌發(fā)病48．16萬例，同期全球死亡40．65萬例．食管癌發(fā)病率和死亡率在全球惡性腫瘤中排第8位和第6位［3］．食管癌的發(fā)生有明顯的地域特點(diǎn)，我國(guó)一直是食管癌的高發(fā)地區(qū)，食管癌發(fā)病率和死亡率均居世界之首［4-6］．研究食管癌的病因、發(fā)展轉(zhuǎn)移機(jī)制及對(duì)藥物的反應(yīng)性，對(duì)食管癌的防治有著十分重要的現(xiàn)實(shí)意義．

腫瘤動(dòng)物模型為基礎(chǔ)與臨床腫瘤研究提供了很好的實(shí)驗(yàn)材料，在人類腫瘤的研究中起著重要作用［7-8］．利用腫瘤動(dòng)物模型可以縮短研究時(shí)間，并可在人為控制條件下進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)研究，為研究人類腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、生物學(xué)特性以及腫瘤治療藥物的研發(fā)提供了良好的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)［9-11］．食管癌動(dòng)物模型是研究食管癌的重要實(shí)驗(yàn)方法，目前尚沒有哪一種模型能夠滿足理想的食管癌動(dòng)物模型的所有標(biāo)準(zhǔn)，因此對(duì)于不同特征的食管癌需要選擇最合適的動(dòng)物模型．本文作者簡(jiǎn)要回顧了現(xiàn)今常用的各種食管癌動(dòng)物模型，并對(duì)食管癌動(dòng)物模型建立的研究進(jìn)展進(jìn)行了介紹．

1 食管癌動(dòng)物模型的建立及類型

食管癌動(dòng)物模型與其模擬的人類食管癌在分子、組織學(xué)以及生物學(xué)特性方面有許多共同性，故可用于食管癌的病因、發(fā)病機(jī)制、發(fā)展過程及治療藥物篩選等方面的研究．食管癌動(dòng)物模型主要有:自發(fā)性動(dòng)物模型、誘發(fā)性動(dòng)物模型、移植性動(dòng)物模型和基因工程動(dòng)物模型等．自20世紀(jì)中期首次獲得食管癌大鼠模型以來，隨著人們對(duì)食管癌動(dòng)物模型的研究不斷深入，用來建模的動(dòng)物也多種多樣，主要有小鼠、大鼠、兔、犬、豬等，其中以大鼠、小鼠最為常用［10］．目前食管癌動(dòng)物模型以誘發(fā)性和移植性的應(yīng)用最為廣泛，其中移植性食管癌動(dòng)物模型是當(dāng)今研究人類食管癌發(fā)生、發(fā)展、生物學(xué)特性以及抗食管癌藥物篩選的最佳動(dòng)物模型［12-13］．近年來基因工程食管癌動(dòng)物模型在國(guó)內(nèi)、外發(fā)展很快，成為食管癌動(dòng)物模型研究的熱點(diǎn)．

1．1 自發(fā)性食管癌動(dòng)物模型

自發(fā)性食管癌動(dòng)物模型是指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物未經(jīng)任何有意識(shí)的人工處置，在自然情況下所發(fā)生的食管癌動(dòng)物模型．該模型完全在自然條件下發(fā)生，排除了人為因素，食管癌的發(fā)生、發(fā)展過程與人類食管癌相似，主要是反映動(dòng)物的腫瘤易感性、環(huán)境致癌物質(zhì)和促癌物質(zhì)的積聚程度．從理論上講該模型是很理想的食管癌動(dòng)物模型，但其存在較大的局限性，如發(fā)生率低且不穩(wěn)定，發(fā)生時(shí)間較難預(yù)測(cè)且參差不齊，荷瘤動(dòng)物個(gè)體在品系、性別、年齡、腫瘤發(fā)生時(shí)間、大小等均有較大的差異．由于該模型存在較多的局限性，目前已極少使用，已被其他食管癌動(dòng)物模型所取代［14］．

1．2 誘發(fā)性食管癌動(dòng)物模型

誘發(fā)性食管癌動(dòng)物模型為致癌因素與受體動(dòng)物食管部位直接或間接接觸，使食管部位產(chǎn)生腫瘤的模型．誘發(fā)性食管癌動(dòng)物模型操作方法簡(jiǎn)單，靶器官和誘癌劑恒定，誘發(fā)成瘤率高，基本模擬了食管癌變發(fā)生的過程，接近人類食管癌的發(fā)生發(fā)展過程，使人們得以有計(jì)劃、有步驟地觀察食管癌變的整個(gè)過程，是進(jìn)行基礎(chǔ)和臨床食管癌研究的常用方法．目前誘發(fā)動(dòng)物食管癌的方法主要有:化學(xué)法、物理法、生物法及復(fù)合因素法．有學(xué)者對(duì)近年誘發(fā)食管癌所用動(dòng)物的種類進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)應(yīng)用最多的是大鼠，其中又以SD 和 F344大鼠為主［15］．

誘發(fā)食管癌動(dòng)物模型的誘發(fā)因素和條件可人為控制，模型發(fā)病過程與人類相似，且能得到相同背景下食管癌進(jìn)展過程中各個(gè)病理時(shí)期的樣本，有利于開展食管癌的動(dòng)態(tài)研究［16］．該模型被廣泛用于食管癌發(fā)病機(jī)制及化學(xué)預(yù)防等方面的研究．1962年，Schoental等［17］用亞硝胺成功誘發(fā)了大鼠的食管癌，甲基芐基亞硝胺(N-nitrosomethylbenzyl-amine，NMBA)是這類化合物中對(duì)大鼠食管最強(qiáng)的致癌物．對(duì)甲基戊基亞硝胺(Methyl-n-amyl nitrosamine，MNAN)是另一種常見的用于誘發(fā)大鼠食管癌模型的亞硝胺類化合物，與NMBA相類似．Xiang等［18］用N-亞硝基肌氨酸乙酯的前體鹽酸肌氨酸乙酯和亞硝酸鈉成功誘發(fā)大鼠食管鱗癌，其病理形態(tài)的改變與人食管鱗癌的發(fā)生相似，且可在較短時(shí)間內(nèi)誘導(dǎo)形成乳頭狀瘤和癌，被認(rèn)為是研究食管癌及癌前病變較好的模型．Barch等［19］應(yīng)用NMBA誘導(dǎo)SD大鼠食管癌，用于食管癌早期癌變機(jī)制的研究．Tang等首次報(bào)道了4-NQO小鼠食管鱗癌的誘導(dǎo)模型且致癌率非常高．近年來國(guó)內(nèi)外學(xué)者應(yīng)用亞硝銨類化合物誘發(fā)食管癌動(dòng)物模型的報(bào)道較為常見［15，20-21］．

1．3 移植性食管癌動(dòng)物模型

移植性食管癌動(dòng)物模型是將源于人或動(dòng)物的食管癌腫瘤組織或細(xì)胞系移植到動(dòng)物體內(nèi)形成食管癌的動(dòng)物模型．主要包括同種移植(動(dòng)物之間)和異種移植(人與動(dòng)物之間)兩種．由于同種移植食管癌動(dòng)物模型的研究結(jié)果并不能對(duì)臨床進(jìn)行有效預(yù)測(cè)，且能獲得的鼠食管癌細(xì)胞系也較少，故該模型已經(jīng)很少使用．異種移植食管癌動(dòng)物模型是目前應(yīng)用最多的食管癌動(dòng)物模型［22］，是將人食管癌細(xì)胞系或食管癌組織塊直接移植到免疫缺陷小鼠皮下而建立的模型．該模型建模方法簡(jiǎn)單，易觀察，成瘤率高，模型穩(wěn)定，并能較好地反應(yīng)腫瘤的侵襲性、生長(zhǎng)情況、藥物敏感性等，因而成為常用的食管癌動(dòng)物模型［12-13］．隨著對(duì)異種移植食管癌動(dòng)物模型研究的不斷深入，人們逐漸發(fā)現(xiàn)用食管癌細(xì)胞系建立的異種移植瘤模型在食管癌研究中存在一定的局限性．主要原因是建模用的細(xì)胞系經(jīng)過多次體外處理和傳代，其組織學(xué)特征和遺傳學(xué)特性已發(fā)生了較大的改變，不能充分代表食管癌患者的多樣性和個(gè)體化．直接將臨床食管癌患者腫瘤組織接種到免疫缺陷小鼠，所建立的人源性食管癌小鼠皮下移植瘤模型，能更準(zhǔn)確地反映食管癌患者的腫瘤特征，可以克服上述模型的缺陷和不足［22-25］．

1981年，Kitamura等［26］首次將來自食管癌患者的腫瘤組織移植到裸小鼠背部皮下，所建移植瘤模型獲得成功，且所建人源性食管癌動(dòng)物模型能連續(xù)傳代，研究發(fā)現(xiàn)移植瘤的組織表型與原發(fā)瘤相似，拉開了應(yīng)用裸鼠研究食管癌的帷幕．蔡海英和許錦階在90年代初期分別先后將臨床食管癌患者腫瘤組織接種于裸小鼠，建成了能連續(xù)傳代的食管癌移植瘤模型．2001年，Wu等［27］首次用SCID小鼠建成食管癌Eca-109細(xì)胞株模型．SCID(severe combined immuno deficient)小鼠是一種嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷的近交系小鼠，由于缺乏功能性B、T淋巴細(xì)胞，SCID小鼠較單純T淋巴細(xì)胞缺乏的裸小鼠更易建立人食管癌移植瘤模型［28］．國(guó)內(nèi)外已有較多的關(guān)于人源性食管癌免疫缺陷小鼠移植瘤模型的報(bào)道，可用于抗人食管癌藥物的篩選和指導(dǎo)臨床合理用藥［29-30］．建立人源性食管癌免疫缺陷小鼠皮下移植瘤的基本條件是:腫瘤標(biāo)本的取材應(yīng)在無菌條件下取新鮮、無壞死、無包膜的瘤組織，手術(shù)標(biāo)本應(yīng)用在1～4 h內(nèi)完成異種皮下移植，移植瘤受體動(dòng)物在6周齡左右，移植的最常用部位是背側(cè)皮下［7］．通過建立穩(wěn)定的與臨床食管癌特征相似的食管癌皮下移植瘤模型，可以為研究食管癌的發(fā)病、轉(zhuǎn)移機(jī)制和對(duì)藥物耐藥反應(yīng)等提供可靠的研究基礎(chǔ)．

1．4 基因工程食管癌動(dòng)物模型

誘發(fā)性和移植性食管癌動(dòng)物模型是研究食管癌外在因素的必要模型，而腫瘤的發(fā)生還是體內(nèi)多種基因改變、多因素積累的綜合過程．隨著人們對(duì)機(jī)體、細(xì)胞、分子生物學(xué)特性及遺傳工程研究的深入，以上食管癌動(dòng)物模型不能滿足全方位研究食管癌的需要，基因工程食管癌動(dòng)物模型應(yīng)運(yùn)而生［31-33］．基因工程食管癌動(dòng)物模型主要有轉(zhuǎn)基因食管癌動(dòng)物模型和基因敲除食管癌動(dòng)物模型2種．

Zhang等［34］應(yīng)用4-硝基喹啉-氧化物(4-nitroquinoline-1-oxide，4-NQO)誘導(dǎo)p53顯性負(fù)相突變轉(zhuǎn)基因鼠口腔-食管癌，發(fā)現(xiàn)食管癌的成功率有了很大的提高．已知鋅缺乏在食管癌的發(fā)生中起著重要的作用，補(bǔ)鋅可以逆轉(zhuǎn)異常的基因表達(dá)和過度增殖．在基因工程小鼠中，鋅缺乏結(jié)合抑癌基因p53缺陷［35］或COX-2的敲除［36-38］，在低劑量化學(xué)致癌原誘導(dǎo)下就可導(dǎo)致食管癌迅速發(fā)生，且進(jìn)展更快．目前基因工程食管癌動(dòng)物模型在國(guó)內(nèi)外的開展還比較少，且模型制作技術(shù)要求高，價(jià)格昂貴．因此所建立的基因工程食管癌動(dòng)物模型成功率相對(duì)較低［39］．但其為食管癌的基礎(chǔ)理論和臨床應(yīng)用研究開辟了更理想的研究途徑，具有廣闊的前景，是食管癌動(dòng)物模型未來發(fā)展的方向之一．

1．5 其他食管癌動(dòng)物模型

Barrett食管(Barrettp′s esophag us，BE)是指食管下段的復(fù)層鱗狀上皮被單層柱狀上皮替代的一種病理現(xiàn)象．大量的臨床研究顯示，BE先于食管腺癌(esophageal adenocarcinoma，EAC)發(fā)生，支持由BE到黏膜不典型增生、原位癌、最后發(fā)展為浸潤(rùn)性腺癌的病理過程［40］．Goldstein等對(duì)大鼠進(jìn)行食管十二指腸吻合術(shù)(esophagoduodenal anastonlcvsis，EDA)從而造成食管返流，發(fā)現(xiàn)手術(shù)后動(dòng)物可能由于鐵吸收減少而發(fā)生貧血，當(dāng)補(bǔ)給鐵劑;在30周后有73%的動(dòng)物發(fā)生EAC，其發(fā)病機(jī)制在許多方面同人類 EAC的發(fā)病機(jī)制相似．Chen等［41］利用此模型進(jìn)行補(bǔ)充抗氧化劑Vit-E和硒的研究，試驗(yàn)證明補(bǔ)硒組EAC的發(fā)生率和腫瘤體積增加，而補(bǔ)充Vit-E組抑制了癌變發(fā)生，因此認(rèn)為Vit-E可能通過其抗氧化特性而阻止腺癌的形成，而大劑量的無機(jī)硒可能通過增強(qiáng)氧化而促進(jìn)癌的形成．可見EDA對(duì)研究EAC的發(fā)生及預(yù)防是很好的動(dòng)物模型，還適合對(duì)EAC進(jìn)行廣泛的抗氧化性損傷及生物標(biāo)志的研究［42］．

食管癌的發(fā)生和發(fā)展是一個(gè)多因素、多階段累積的綜合動(dòng)態(tài)過程．為深入研究食管癌的生物學(xué)特征，提高抗食管癌藥物篩選的臨床針對(duì)性和臨床試驗(yàn)成功率，需要建立與食管癌患者病因、發(fā)病機(jī)制、發(fā)展過程及治療相似的動(dòng)物模型．以上5種類型的食管癌動(dòng)物模型在應(yīng)用方面各有千秋．現(xiàn)就5種食管癌動(dòng)物模型各自的特點(diǎn)總結(jié)(表1)．

2 食管癌動(dòng)物模型的監(jiān)測(cè)方法

2．1 一般性評(píng)價(jià)

食管癌動(dòng)物模型建立后需要監(jiān)測(cè)腫瘤的生長(zhǎng)情況，并對(duì)建立模型的方法進(jìn)行評(píng)價(jià)．首先對(duì)動(dòng)物的日?；顒?dòng)行為、攝食飲水、體重及腫瘤的生長(zhǎng)潛伏期等進(jìn)行常規(guī)調(diào)查;待腫瘤形成后，定期進(jìn)行腫瘤體積和動(dòng)物體重的調(diào)查，并觀察腫瘤形態(tài)及有無消退情況的發(fā)生等．同時(shí)需定期安樂死荷瘤鼠，分離出腫瘤組織，觀察腫瘤形狀、活動(dòng)度、質(zhì)地及有無壞死灶，并用中性福爾馬林溶液固定腫瘤組織，進(jìn)行病理組織學(xué)鑒定，還可運(yùn)用分子生物學(xué)研究對(duì)所建模型腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)等．尸體解剖后觀察荷瘤鼠主要臟器有無侵襲、轉(zhuǎn)移等情況．

表1 不同類型食管癌動(dòng)物模型比較

2．2 MRI顯像技術(shù)

核磁共振成像(MRI)技術(shù)在腫瘤診斷中十分重要，能動(dòng)態(tài)觀察活體動(dòng)物腫瘤生長(zhǎng)情況及腫瘤生長(zhǎng)過程中與周圍組織的相互作用，是一種無創(chuàng)傷的動(dòng)態(tài)觀測(cè)．MRI技術(shù)的組織分辨率高，成像清晰，可同時(shí)獲得檢測(cè)部位的解剖與生理信息，適合用于小動(dòng)物的成像檢查．國(guó)外進(jìn)行裸鼠腫瘤MRI研究多采用高場(chǎng)強(qiáng)(3．0～9．4 T不等，甚至更高)動(dòng)物MRI專用掃描儀和裸鼠專用動(dòng)物線圈，所獲圖像信噪比和對(duì)比度優(yōu)良［43］;馮仕庭等［44］人采用3．0 T的超高場(chǎng)MRI掃描儀對(duì)建立的動(dòng)物模型進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)裸鼠的MRI圖像顯示腫瘤組織、肝臟和肌肉具有很高的信噪比，表明MRI用于裸鼠檢測(cè)成像質(zhì)量較高，對(duì)觀察小鼠腫瘤具有良好的應(yīng)用價(jià)值．

2．3 活體熒光成像技術(shù)

活體生物熒光成像技術(shù)是近年來發(fā)展起來的一種分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)，用于分子、基因表達(dá)的分析檢測(cè)．運(yùn)用該檢測(cè)方法，研究人員能夠直接監(jiān)控活體動(dòng)物體內(nèi)腫瘤的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移生物學(xué)過程．此外，還可以動(dòng)態(tài)觀測(cè)腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)，甚至能夠觀察到小的轉(zhuǎn)移灶．目前，熒光標(biāo)記技術(shù)已經(jīng)被較廣泛地應(yīng)用到腫瘤的研究中，研究人員運(yùn)用該技術(shù)成功地觀察到腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移和血管再生過程［45-46］．近年來國(guó)內(nèi)外很多學(xué)者均成功應(yīng)用該技術(shù)，對(duì)各自所建的小鼠腫瘤模型進(jìn)行了動(dòng)態(tài)的全程監(jiān)測(cè)［47-48］．活體成像技術(shù)是目前發(fā)展較快的技術(shù)，是一種較理想的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)腫瘤生長(zhǎng)情況的方法，隨著腫瘤分子生物學(xué)研究的深入和腫瘤特異性蛋白的發(fā)現(xiàn)，其運(yùn)用將更廣泛［49-50］．

3 小結(jié)

理想的食管癌動(dòng)物模型應(yīng)該能較好地模擬食管癌形成的自然過程，并能體現(xiàn)出食管癌發(fā)生、發(fā)展的主要特點(diǎn)．鑒于腫瘤的發(fā)生是多種環(huán)境因素改變和多個(gè)靶細(xì)胞基因改變相互累積和作用的綜合過程，同時(shí)食管癌在遺傳特性、臨床表現(xiàn)及預(yù)后方面具有復(fù)雜的異質(zhì)性．因此，單一的食管癌動(dòng)物模型并不能完全反映腫瘤發(fā)生發(fā)展的復(fù)雜性．隨著研究的深入以及各種技術(shù)的完善，人們將逐漸發(fā)現(xiàn)腫瘤的發(fā)病機(jī)制、腫瘤與宿主的關(guān)系、腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移過程、藥物耐受性等，從而建立起與人食管癌更相近的動(dòng)物模型．將為抗食管癌藥物的篩選和臨床個(gè)體用藥方案提供理論基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)．

［1］鄭榮壽，張思維，吳良有，等．中國(guó)腫瘤登記地區(qū)2008年惡性腫瘤發(fā)病和死亡分析［J］．中國(guó)腫瘤，2012，21(1):1-12．

［2］SIEGEL R，NAISHADHAM D，JEMAL A．Cancer statistics，2012［J］．CA Cancer J Clin，2012，62(1):10-29．

［3］FERLAY J，SHIN H R，BRAY F，et al．Estimates of worldwide burden of cancer in 2008:GLOBOCAN 2008［J］．Int J Cancer，2010，127(121):2893-2917．

［4］張思維，張敏，李光琳，等．2003～2007年中國(guó)食管癌發(fā)病與死亡分析［J］．中國(guó)腫瘤，2012，21(4):241-247．

［5］鐘釧，譚家駒，徐致祥．食管癌流行病學(xué)病因?qū)W研究進(jìn)展［J］．河南預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2011，22(1):1-10．

［6］KAMANGAR F，DORESGM，ANDERSON W F．Patterns of cancer incidence，mortality，and prevalence across five continents:defining priorities to reduce cancer disparities in different geographic regions of the world［J］．Clin Oncol，2006，24(14):2137-2150．

［7］萬繼英，韓庶勇．腫瘤實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的建立及應(yīng)用研究進(jìn)展［J］．醫(yī)學(xué)綜述，2009，15(19):2959-2962．

［8］ZENDER L，ZUBER J，LOWE SW．Snapshot:genetic mouse models of cancer［J］．Cell，2007，129(4):838．

［9］DRANOFF G．Experimental mouse tumour models:what can be learnt about human cancer immunology?［J］．Nat Rev Immunol，2012，12(1):61-66．

［10］FRESE K K，TUVESON D A．Maximizing mouse cancer models［J］．Nat Rev Caneer，2007，7(9):645-658．

［11］MICHEL D P，TYLER J．Genetically engineered mouse models of cancer reveal new insights about the antitumor immune response［J］．Curr Opin Immunol，2013，25:1-8．

［12］RUBIO-VIQUEIRA B，HIDALGO M．Direct in vivo xenograft tumor model for predicting chemotherapeutic drug response in cancer patients［J］．Clin Pharmacol Ther，2009，85(2):217-221．

［13］JIN K，TENG L，SHEN Y，et al．Patient-derived human tumor tissue xenografts in immunodeficient mice:a systematic review［J］．Clin Transl Oncol，2010，12(7):473-480．

［14］黃寧，彭芳．抗腫瘤藥物動(dòng)物模型的評(píng)價(jià)［J］．大理學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，7(2):56-58．

［15］黃裔騰，殷秀凱，鐘雪云，等．食管鱗癌動(dòng)物模型的研究進(jìn)展［J］．世界華人消化雜志，2011，19(16):1704-1710．

［16］BADEN T，YAMAMICHI K，MICHIURA T，et al．Sequential endoscopic findings and histological changes of N-nitrosomethylbenzylamine-induced esophageal carcinogenesis in rats［J］．Onco Rep，2006，16(5):965-970．

［17］SCHOENTAL R，MAGEE P N．Induction of squamous carcinoma of the lung and of the stomach and oesophagus by diazomethane N methyl-N-nitroso-urethane，respectively［J］．Brit J Cancer，1962，16(1):92-100．

［18］XIANG Y Y，WANG D Y，TANAKA M，et al．Efficient and specific induction of esophageal tumors in rats by precursors of N-nitroso sarcosine ethyl ester［J］．Pathol Int，1995，45(6):415-421．

［19］BARCH D H，JACOBY R F，BRASITUSTA，et al．Incidence of harvey ras oncogene point mutations and their expression in methylbenzyl-nitro-samine-induced esophageal tumor genesis［J］．Carcinogenesis，1991，12(12):2373-2377．

［20］STONER G D，WANG L S，SEGUIN C，et al．Multiple berry types prevent N-nitrosomethylbenzylamine-induced esophageal cancer in rats［J］．Pharm Res，2010，27(6):1138-1145．

［21］WANG L，LU A，MENG F，et al．Inhibitory effects of lupeal acetate of cortex periplocae on N-nitrosomethylbenzylamineinduced rat esophageal tumorigenesis［J］．Oncol Lett，2012，4(2):231-236．

［22］SAUSVILLE E A，BURGER A M．Contributions of human tumor xenografts to anticancer drug development［J］．Cancer Res，2006，66(7):3351-3354．

［23］SHARMA SV，HABER D A，SETTLEMAN J．Cell line-based platforms to evaluate the therapeutic efficacy of candidate anticancer agents［J］．Nat Rev Cancer，2010，10(4):241-253．

［24］DECAUDIN D．Primary human tumor xenografted models(′tumorgrafts′)for good management of patients with cancer［J］．Anti-Cancer Drugs，2011，22(9):827-841．

［25］MUGURUMA Y，MATSUSHITA H，YAHATA T，et al．Establishment of a xenograft model of human myelodysplastic syndromes［J］．Haematologica，2011，96(4):543-551．

［26］KITAMURA M，SUDA M，NISHIHIRA T，et al．Heterotransplantation of human esophageal carcinoma to nude mice［J］．Tohoku JExp Med，1981，135(3):259-264．

［27］WU M Y，CHEN M H，LIANG Y R，et al．Experimental and clinic-pathologic study on the relationship between transcription factor Egr-1 and esophageal carcinoma［J］．World J Gastroenterol，2001，7(4):490-495．

［28］謝仰民，謝良喜，李德銳，等．食管癌SCID小鼠異位移植模型建立的初步探討［J］．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與比較醫(yī)學(xué)，2007，27(1):41-44．

［29］DODBIBA L，TEICHMAN J，F(xiàn)LEET A，et al．Primary esophageal and gastro-esophageal junction cancer xenograft models:clinicopathological features and engraftment［J］．Lab Invest，2013，93(4):397-407．

［30］ZHENG B，ZHENG W，ZHU Y，et al．Role of adjuvant chemoradiotherapy in treatment of resectable esophageal carcinoma:a meta-analysis［J］．Chin Med J(Engl)，2013，126(6):1178-1182．

［31］ZHAO L，HE L R，XI M，et al．Nimotuzumab promotes radiosensitivity of EGFR-overexpression esophageal squamous cell carcinoma cells by upregulating IGFBP-3［J］．J Transl Med，2012，10:249-257．

［32］WAN SG，TACCIOLI C，JIANG Y，et al．Zinc deficiency activates S100A8 inflammation in the absence of COX-2 and promotes murine oral-esophageal tumor progression［J］．Int JCancer，2011，129(2):331-45．

［33］WU C，HU Z，LIN D，et al．Genome-wide association study identifies three new susceptibility loci for esophageal squamous-cell carcinoma in chinese populations［J］．Nat Genet，2011，43(7):679-684．

［34］ZHANG Z，WANG Y，YAOR，et al．p53 Transgenic mice are highly susceptible to 4-nitroquinoline-1-oxide-induced oral cancer［J］．Mol Cancer Res，2006，4(6):401-410．

［35］FONG L Y，JIANG Y，F(xiàn)ARBER J L．Zinc deficiency potentiates induction and progression of lingual and esophageal tumors in p53-deficient mice［J］．Carcinogenesis，2006，27(7):1489-1496．

［36］WAN SG，TACCIOLI C，JIANG Y，et al．Zinc deficiency activates S100A8 inflammation in the absence of COX-2 and promotes murine oral esophageal tumor progression［J］．Int JCancer，2011，129(2):331-345．

［37］FONG L Y，ZHANG L，JIANG Y，et al．Dietary zinc modulation of COX-2 expression and lingual and esophageal carcinogenesis in rats［J］．JNCI J Natl Cancer Inst，2005，97(1):40-50．

［38］ZHANG L，WU Y D，LIP，et al．Effects of cyclooxygenase-2 on human esophageal squamous cell carcinoma［J］．World J Gastroenterol，2011，17(41):4572-4580．

［39］楊玉琪，趙遠(yuǎn)．人類疾病的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型研究概述［J］．中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志，2005，15(3):170-173．

［40］MICEV M，COSIC-MICEV M．Pathology and Pathobiology of the esophageal carcinoma［J］．Acta Chir Iugosl，2010，57(2):15-26．

［41］CHEN X，MIKHAIL SS，DINGY W，et al．Effects of vitamin-e and selenium supplementation on esophageal adeno carcinogenesis in a surgical model with rats［J］．Carcinogenesis，2000，21(8):1531-1536．

［42］KADRI SR，LAO-SIRIEIX P，O′DONOVAN M，et al．Acceptability and accuracy of a non-endoscopic screening test for barrett′s oesophagus in primary care:cohort study［J］．BMJ，2010，10:341-348．

［43］KHEMTONG C，KESSINGER C W，REN J，et al．In vivo off-resonance saturation magnetic resonance imaging of alphavbeta3-targeted superparamagnetic nanoparticles［J］．Cancer Res，2009，69(4):1651-1658．

［44］馮仕庭，孫燦輝，蔡華崧，等．建立荷人結(jié)腸癌裸鼠移植瘤模型及MRI成像檢查［J］．中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù)，2010，14(20):3696-3700．

［45］SCHAMBACH SJ，BAG S，GRODEN C，et al．Vascular imaging in small rodents using micro-CT［J］．Methods，2010，50(1):26-35．

［46］倪慶純，韓重，楊威，等．采用活體成像技術(shù)觀察腫瘤組織在裸鼠體內(nèi)生長(zhǎng)情況的研究［J］．中南藥學(xué)，2012，10(6):412-414．

［47］李珂，趙光，高春芳，等．小動(dòng)物活體成像技術(shù)的應(yīng)用進(jìn)展［J］．實(shí)用醫(yī)藥雜志，2012，29(1):81-82．

［48］SCHAMBACH SJ，BAG S，SCHILLING L，et al．Application of micro-CT in small animal imaging［J］．Methods，2010，50(1):2-13．

［49］WALTHER K A，PAPKE B，SINN M B，et al．Precise measurement of protein interacting fractions with fluorescence lifetime imaging microscopy［J］．Mol Biosyst，2011，7(2):322-336．

［50］汪茂榮，張馨，劉延慶．熒光蛋白活體成像系統(tǒng)在腫瘤研究中的應(yīng)用［J］．臨床腫瘤學(xué)雜志，2011，16(2):174-178．