張亦弛 張高麗 鄭文君 趙連升

全血、去白細(xì)胞全血和去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞儲存期末溶血率的比較

張亦弛 張高麗 鄭文君 趙連升

目的比較全血、去白全血和去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞儲存期末溶血率。方法選擇60袋400 ml全血，隨機(jī)分為A、B﹑C三組，每組各20袋，A組為全血，B組為去白全血，C組為去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞。輕輕混勻通過無菌結(jié)合機(jī)，分別取樣本﹙4±2﹚℃保存至儲存期末，檢測存期末的總血紅蛋白濃度，血細(xì)胞比容和上清游離血紅蛋白的濃度，計(jì)算儲存期末溶血率。結(jié)果儲存期末溶血率，C組高于A﹑B兩組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；A、B兩組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論血液在制備過程中，過濾和離心使紅細(xì)胞的脆性增加和去除血漿后內(nèi)環(huán)境的改變，在一定程度上都會影響紅細(xì)胞儲存期末溶血率。

全血；去白細(xì)胞全血；去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞；儲存期末溶血率

1 材料與方法

1.1材料 采血用由山東威高集團(tuán)醫(yī)用高分子有限公司提供的采血袋與白細(xì)胞過濾器一體的四聯(lián)袋(血液保存液為CPD-A；紅細(xì)胞保存液為MAP,含腺嘌呤、甘露醇﹑氯化鈉﹑枸櫞酸﹑枸櫞酸鈉、葡萄糖和磷酸二氫鈉),大容量低溫離心機(jī)(德國賀力士),低溫操作臺,分漿夾,熱合機(jī),無菌結(jié)合機(jī)，冰箱(4℃±2℃,日本SANYO公司)。

1.2方法 2012年8～12月取60袋400 ml全血，隨機(jī)分為A、B、C三組，每組各20袋，A組為全血組；B組為去白全血組；C組為去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞組。分別采集三組樣本(A組全血濾除白細(xì)胞前采集；B組全血，濾除白細(xì)胞后采集；C組全血濾除白細(xì)胞后，經(jīng)離心后分離制備成去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞后采集)，并儲存在(4±2) ℃冰箱內(nèi)至儲存期末，并測定三組去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞總血紅蛋白的濃度，血細(xì)胞比容和上清游離血紅蛋白濃度，計(jì)算儲存末期溶血率。溶血率計(jì)算公式如下：

溶血率(%) =﹛[﹙1-血細(xì)胞比容﹚×上清游離血紅蛋白濃度] ÷ 總血紅蛋白濃度﹜×100%

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用t檢驗(yàn)，P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

三組不同血液制品儲存期末溶血率比較C組與A、B兩組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而A、B兩組比較差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具體見表1。

表1 三組不同血液制品儲存期末溶血率的比較

注：三組不同血液制品儲存期末溶血率C組與A、B兩組比較P<0.05，A、B兩組比較P>0.05

3 討論

由表Ⅰ可以看出，三種不同血液制品儲存期末溶血率均低于0.8%，符合《全血及成分血質(zhì)量要求(GB18469-2012)》，但也發(fā)現(xiàn)儲存期末溶血率C組與A﹑B兩組比較差異都具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，分析其原因可能為：①在濾除白細(xì)胞過程中，過濾前混勻時(shí)對血袋的搖晃或震蕩會導(dǎo)致部分紅細(xì)胞的脆性增加以及衰老紅細(xì)胞的溶解[2]。②血液通過白細(xì)胞過濾器時(shí)，一些變形能力較差，剛能通過濾器，但其表面的膜成分會受到損傷，主要是膜骨架蛋白的減少，使紅細(xì)胞的穩(wěn)定性和變形性降低，使保存期的紅細(xì)胞壽命縮短[3]。③去除白細(xì)胞﹑離心后的紅細(xì)胞脆性明顯增大，且離心對紅細(xì)胞的影響明顯大于過濾白細(xì)胞,因?yàn)樵谳^高離心力作用下會使紅細(xì)胞過度壓縮、變形，脆性明顯增大[4]。④血漿是紅細(xì)胞行使功能的基質(zhì)，血漿中不僅含有維持紅細(xì)胞滲透壓的血漿蛋白，還有各種營養(yǎng)分子、電解質(zhì)、血?dú)?、調(diào)節(jié)物質(zhì)以及代謝底物[5]，去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞在制備過程中去除了血漿，加入紅細(xì)胞保存液，而全血和去白全血保留了血漿。因此紅細(xì)胞變形能力下降、細(xì)胞膜的缺陷以及保存基質(zhì)的改變都可能增加紅細(xì)胞保存期末溶血率。

本結(jié)果也顯示，三種不同血液制品儲存期末溶血率A、B兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示雖然過濾前混勻及過濾使部分紅細(xì)胞的穩(wěn)定性和變形能力降低，增加了儲存期末溶血的風(fēng)險(xiǎn)，但在一定程度上彌補(bǔ)了白細(xì)胞在保存期間破損導(dǎo)致的紅細(xì)胞溶血，因?yàn)槲催^濾血液中存在的白細(xì)胞可能導(dǎo)致增加保存期間的溶血，由于在保存期間，白細(xì)胞破損并釋放出一些化學(xué)物質(zhì)和酶如過氧化氫和蛋白酶等，已有報(bào)道指出，保存期白細(xì)胞釋放的蛋白酶可造成紅細(xì)胞溶血，破壞紅細(xì)胞的代謝和活性。

本研究對三種不同血液制品儲存期末溶血率進(jìn)行分析，其檢測樣本均符合《全血及成分血質(zhì)量要求(GB18469-2012)》，但由于樣本數(shù)量有限，不能以偏概全，因?yàn)檠弘x體后雖然有保養(yǎng)液保存，但血液在制備和保存過程中發(fā)生了物理和生物化學(xué)的變化，細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)發(fā)生一系列變化，紅細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)及其變形性是影響紅細(xì)胞變形性能及血液流動，特別是通過微循環(huán)的重要因素之一[6]。因此為了提高輸血安全，保證血液質(zhì)量，血液在采集、制備和保存過程中必須注意以下幾個問題：①全血必須完全抗凝，避免采血量不足或過多，未經(jīng)充分抗凝的血袋中有可見凝塊，切勿使用。②嚴(yán)格按按廠家說明使用白細(xì)胞濾器，成分制備人員必須經(jīng)過必要的培訓(xùn)，并定期檢測以保證設(shè)備使用按廠家說明進(jìn)行。③保存超過1 d的全血，在制備過程中必須特別小心，避免將裝有血液的血袋反復(fù)振搖﹑擠壓，白細(xì)胞過濾前可以用2次顛倒血袋方法來進(jìn)行血液混勻，濾器的初始化應(yīng)采用自然重力，避免將血液強(qiáng)行通過濾器，過濾過程中避免氣泡進(jìn)入過濾系統(tǒng)。④全血制備去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞過程中應(yīng)避免高速離心，防止紅細(xì)胞過度壓縮，紅細(xì)胞用保養(yǎng)液懸浮時(shí)要小心，避免紅細(xì)胞被破壞。⑤全血或去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞必須在合適的容器中運(yùn)輸，此容器必須保持血液制品在規(guī)定的溫度內(nèi)，不要將血液儲存在冷庫的通風(fēng)口，此處溫度有可能低于規(guī)定的2～6℃。

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[6] 田兆嵩.臨床輸血學(xué).人民衛(wèi)生出版社，2002：21-22.

466000 河南省周口市中心血站

溶血是紅細(xì)胞膜的完整性受到破損或裂解釋放血紅蛋白引起血漿顏色改變，儲存期末紅細(xì)胞制品的溶血程度是評價(jià)保存紅細(xì)胞質(zhì)量的重要參數(shù)，常用溶血率來表示。雖然已有多種措施能提高紅細(xì)胞在血液制備、保存和運(yùn)輸過程中的穩(wěn)定性，但紅細(xì)胞離體后仍將增加溶血的危險(xiǎn)，其溶血率并隨保存期的延長而明顯升高。紅細(xì)胞制品中游離血紅蛋白含量過高，對于接受輸血治療的患者具有潛在的安全隱患[1]?！度俺煞盅|(zhì)量要求(GB18469-2012)》中增加了紅細(xì)胞儲存期末溶血率標(biāo)準(zhǔn)，作者于2012年8～12月對全血﹑去白全血和去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞儲存期末溶血率進(jìn)行比較?，F(xiàn)報(bào)告如下。