遲曉星，陳容，張麗媛

（黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)食品學(xué)院，大慶163319）

金雀異黃素是存在于大豆及三葉草中大豆異黃酮的主要活性成分[1]，具有許多生物學(xué)活性，包括能夠與雌激素受體結(jié)合的弱的雌激素樣作用及在藥理作用下能夠抑制蛋白酪氨酸激酶的作用，被稱為“植物雌激素”[2-4]。金雀異黃素可以觸發(fā)排卵，促進黃體的產(chǎn)生，減少卵巢的血流量，升高卵巢組織內(nèi)膽固醇濃度。促卵泡激素（FSH）與黃體生成素（LH）統(tǒng)稱促性腺激素具有促進卵泡發(fā)育成熟作用，可促進雌激素分泌。當(dāng)雌激素升到一定值時，同時抑制FSH和LH的分泌（雙向調(diào)節(jié)作用）。雌二醇主要來源于女性卵巢的卵泡、黃體和胎盤，少量來自腎上腺[5]。

本研究主要通過動物實驗，采用ELISA法測定大鼠血清中E2、LH和FSH的水平，觀察金雀異黃素對青年雌性大鼠血清中性激素水平的影響。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

金雀異黃素：購自Sigma公司，純度＞99.9%

乙烯雌酚：合肥久聯(lián)制藥有限公司，每片0.5mg

E2、LH和FSH ELISA檢測試劑盒：由上海史瑞可科技有限公司提供

酶標儀：SUNRISE 5082型，澳大利亞生產(chǎn)

電熱恒溫培養(yǎng)箱：DRP-9082型，上海森信實驗儀器有限公司

1.2 動物與分組

選擇雌性Wistar大鼠50只，2月齡，體重110～130 g，由哈爾濱醫(yī)科大學(xué)實驗鼠類養(yǎng)殖中心提供（醫(yī)動字12-011，清潔級）。采取體重隨機分組方法分為5組，每組各10只，分別為對照組（基礎(chǔ)飼料，生理鹽水灌胃）；低劑量組（金雀異黃素5mg·kg-1灌胃）；中劑量組（金雀異黃素10 mg·kg-1灌胃）；高劑量組（金雀異黃素20 mg·kg-1灌胃）；雌激素對照組（乙烯雌酚0.5 mg·kg-1灌胃）。實驗周期8周。動物進食普通飼料，自由飲水。動物室溫度20℃±2℃，相對濕度為45%±10%，通風(fēng)良好。

1.3 觀察指標及檢測方法

大鼠經(jīng)乙醚麻醉，腹主動脈取血，處死后迅速摘除卵巢和子宮，分析天平稱重并計算臟體比值。ELISA法測定血清中LH、E2、FSH含量。

1.4 統(tǒng)計分析

所有結(jié)果均以xˉ±s表示，采用SPSS17.0軟件包，多組均數(shù)進行方差齊性檢驗和單因素方差分析。

2 實驗結(jié)果

2.1 各組大鼠子宮/體比及卵巢/體比

從表1可以看出，金雀異黃素的類雌激素樣作用對青年雌性大鼠的卵巢產(chǎn)生了影響，與對照組相比，高劑量組大鼠卵巢/體比明顯降低，差異有顯著性（p＜0.05）。金雀異黃素雖然能使青年雌性大鼠的子宮重量增加，但影響不顯著。

表1 各組大鼠子宮/體比及卵巢/體比情況（xTable1 Organ to body weight ratio for different groups

表1 各組大鼠子宮/體比及卵巢/體比情況（xTable1 Organ to body weight ratio for different groups

*與對照組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p＜0.05）

組別對照組低劑量組中劑量組高劑量組雌激素組子宮/體比0.034±0.008 0.035±0.007 0.034±0.005 0.036±0.007 0.037±0.007卵巢/體比0.041±0.005 0.039±0.014 0.042±0.010 0.034±0.008*0.023±0.004*

2.2 各組大鼠血清E2、LH和FSH水平

由表2可知，與對照組相比，各劑量組血清E2水平在試驗結(jié)束后呈降低趨勢。血清LH水平從低劑量組開始，有明顯的下降趨勢，雌激素組與對照組相比下降明顯（p＜0.05）。血清FSH水平變化在各劑量組表現(xiàn)不明顯。

表2 各組大鼠血清E2、LH和FSH含量（xTable2 Concentrations of E2、LH and FSH in serum for differentgroups

表2 各組大鼠血清E2、LH和FSH含量（xTable2 Concentrations of E2、LH and FSH in serum for differentgroups

*與對照組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p＜0.05）

組別對照組低劑量組中劑量組高劑量組雌激素組E2（pmol·L-1）11.60±1.87 5.38±4.74 5.24±0.15 8.53±4.77 7.87±1.50 LH（m IU·m l-1）1.46±0.22 1.36±0.33 1.23±0.23 1.13±0.38 0.89±0.51*FSH（IU·L-1）2.04±0.18 1.88±0.34 2.11±0.44 1.65±0.79 1.83±0.42

3 討論

E2是體內(nèi)主要由卵巢成熟濾泡分泌的一種天然雌激素，能促進和調(diào)節(jié)女性性器官及副性征的正常發(fā)育。其主要藥理作用為：促使子宮內(nèi)膜增生；增強子宮平滑肌的收縮；促使乳腺導(dǎo)管發(fā)育增生，但較大劑量能抑制垂體前葉催乳素的釋放，從而減少乳汁分泌，達到延緩衰老的作用[6]。LH的主要作用是促使排卵（在FSH協(xié)同作用下），形成黃體并分泌孕激素，可以預(yù)測排卵。當(dāng)卵泡成熟時，分泌大量雌激素，使垂體釋放大量促黃體生成素，形成促黃體生成素高峰，它能使成熟的卵泡破裂、排卵。破裂的卵泡在促黃體生成素及促卵泡生成激素作用下，形成黃體[7]。LH和FSH是卵巢功能重要的內(nèi)分泌調(diào)節(jié)激素，直接參與刺激卵泡發(fā)育、排卵、黃體生成及性激素的合成。

金雀異黃素對整體動物血液中性激素水平的影響目前尚無定論。不同研究者的結(jié)論不同，主要與受試物暴露時間、期限和劑量有關(guān)。本研究結(jié)果顯示金雀異黃素作用于青年雌性大鼠后，大鼠卵巢/體比降低，提示20mg·kg-1金雀異黃素對青年雌性大鼠的卵巢發(fā)育可能會產(chǎn)生影響。大鼠血清E2水平呈下降趨勢，提示大豆異黃酮對于青年雌性大鼠表現(xiàn)為抗雌激素作用，影響了其血清性激素水平。金雀異黃素對青年女性的生殖系統(tǒng)和體內(nèi)激素水平是否有確切影響還需要進一步進行人群試驗得以證實。

[1]Kogiso M，Sakai I，Mitsuya K，et al.Genistein suppresses antigen-specific competition with 17beta-estradiol receptors for estrogen in ovalbumin-immunized BALB/c mice.Nutrition，2006，22（7）：802-809.

[2]Wagner JD，Anthony M S，Cline JM.Soy phtoestrogens：research on benefits and risks[J].Clin Obstet Gynecol，2001，44：843-852.

[3]Geller S E，Studee L.Botanical and dietary supplements formenopausal symptoms：whatworks，what does not[J].J Women’s Health：Larchmt，2005，14：634-649.

[4]錢麗麗，左鋒，唐彥軍.大豆異黃酮提取方法的研究進展[J].黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報，2006，18（5）：64-67.

[5]戴雨，戴大江，牛建昭，等.大豆黃酮類對去卵巢大鼠性激素、血脂、腹部脂肪的影響[J].中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2003，13（2）：84-86.

[6]朱軼慶，吳潔.雌激素類藥物對去卵巢大鼠認知功能的影響[J].江蘇醫(yī)藥，2009，35（2）：4-17.

[7]林文琴，楊海燕，陳霞，等.卵泡刺激素/黃體生成素比值與體外受精-胚胎移植結(jié)局的關(guān)系[J].溫州醫(yī)學(xué)報，2009，39（2）：1-17.