賴添娣，李佰靈

（韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院，廣東 韶關(guān) 512026）

隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)水平的不斷提高，血細(xì)胞分析儀具備了快速、重復(fù)性好、工作效率高的優(yōu)點(diǎn)，已在臨床上廣泛應(yīng)用，成為血小板計(jì)數(shù)的主要儀器，能及時給臨床提供有診斷價(jià)值的參考資料。但現(xiàn)階段大部分儀器采用電阻抗法進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)，受限于其計(jì)數(shù)原理的局限性、干擾因素和血小板本身具有易黏附、聚集的特性，導(dǎo)致結(jié)果可能出現(xiàn)異常，需結(jié)合顯微鏡計(jì)數(shù)才能得到更準(zhǔn)確的結(jié)果。本文通過KX-21電阻抗型血細(xì)胞分析儀與顯微鏡兩種方法對不同水平血小板結(jié)果進(jìn)行對比分析，討論各自的優(yōu)劣，以提高血小板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源

隨機(jī)選取我院附屬醫(yī)院門診和住院患者靜脈血標(biāo)本300例，其中男175例，女125例，年齡8～58歲，平均33歲。

1.2 儀器與試劑

KX-21血細(xì)胞分析儀和原廠配套試劑、質(zhì)控物、乙二胺四乙酸二鉀（EDTA—K2）真空抗凝管、尼康顯微鏡、按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版配制的草酸銨稀釋液。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 血細(xì)胞分析儀法 在血細(xì)胞分析儀使用前，用原廠提供的質(zhì)控品做好室內(nèi)質(zhì)控（高、中、低值），嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)程規(guī)范操作，于1小時內(nèi)對患者的靜脈血標(biāo)本進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)。

1.3.2 顯微鏡法 嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版進(jìn)行操作，計(jì)數(shù)兩次取其平均值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 14.5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用（±s）表示，采用配對t檢驗(yàn)對兩組間差異進(jìn)行比較，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

當(dāng)血小板介于 （50～100）×109/L、（100～300）×109/L、（300～350）×109/L時，兩種方法結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；當(dāng)血小板<50×109/L和>350×109/L時，兩種方法結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），結(jié)果見表1。

表1 兩種檢測方法血小板計(jì)數(shù)結(jié)果的比較（±s，×109/L）

表1 兩種檢測方法血小板計(jì)數(shù)結(jié)果的比較（±s，×109/L）

注：與同組KX-21計(jì)數(shù)的結(jié)果比較，*P<0.05

檢測方法 <50（n=60） 50～100（n=60） 100～300（n=60） 300～350（n=60） >350（n=60）40.60±9.3543.38±9.48*KX-21顯微鏡法78.25±14.2277.43±14.10174.38±36.72328.48±41.32413.52±63.25172.19±37.10326.76±42.20408.34±65.32*

3 討論

血小板計(jì)數(shù)在臨床應(yīng)用上意義重大，特別是對于血栓性疾病、血小板減少性疾病、出血性疾病的診斷和治療尤其重要。但由于血小板體積相對較小，而且容易發(fā)生黏附、聚集和變性破壞，且血小板計(jì)數(shù)時的干擾因素較多，常常影響到血小板檢測的準(zhǔn)確性[1]。

血小板來源于骨髓中巨核細(xì)胞，平均容積為7.2fl，從表1數(shù)據(jù)中可以看出，對于血小板計(jì)數(shù)在正常參考范圍或接近參考范圍的標(biāo)本，電阻抗法和顯微鏡法測定結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。在面對臨床日益增多的標(biāo)本，血細(xì)胞分析儀快速、重復(fù)性好、工作效率高的特點(diǎn)明顯優(yōu)于顯微鏡計(jì)數(shù)法，而且還避免了不同操作者之間的系統(tǒng)誤差和主觀因素，因此，日常工作中，優(yōu)先選擇血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)，測定結(jié)果在正常參考范圍或接近正常參考范圍，且血小板直方圖無異常的情況下不再進(jìn)行顯微鏡復(fù)核。

電阻抗型血細(xì)胞分析儀是利用血小板非導(dǎo)電的性質(zhì)，在通過儀器內(nèi)小孔時會引起瞬間電阻變化產(chǎn)生相應(yīng)脈沖信號進(jìn)行計(jì)數(shù)，一般將體積在2～30f l范圍內(nèi)的血細(xì)胞顆粒計(jì)數(shù)為血小板。但對于血小板明顯減少和形態(tài)異常者，所得結(jié)果誤差甚大，有時難以計(jì)數(shù)[2]。當(dāng)血小板<50×109／L時，電阻抗法結(jié)果低于顯微鏡法測定結(jié)果，兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。這可能是有些血液系統(tǒng)疾病常伴隨血小板形態(tài)的改變，體積大的血小板增多或增加血小板的凝集速度，使得這些體積偏大的血小板被誤認(rèn)為體積小的紅細(xì)胞而不是血小板，使血小板計(jì)數(shù)結(jié)果降低[3]。個別患者的EDTA抗凝血在室溫條件下可發(fā)生血小板EDTA依賴性凝集；某些患者存在藥物性血小板抗體，造成血小板相互凝集或與其他細(xì)胞結(jié)合，導(dǎo)致血小板假性減少。當(dāng)血小板＞350×109／L時，電阻抗法結(jié)果高于顯微鏡法測定結(jié)果，兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。特別是血細(xì)胞分析儀測定MCV降低的標(biāo)本，兩種方法測定的血小板結(jié)果差異更大。這可能是電阻抗法進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)時，將部分患者體積小的紅細(xì)胞歸入血小板引起結(jié)果假性增高，也可能是將疾病產(chǎn)生的類似于血小板的顆粒物質(zhì)和細(xì)胞碎片歸為血小板引起結(jié)果假性增高。因此，在自動化分析儀飛速發(fā)展的今天，血細(xì)胞分析儀雖然具有快速簡便、精密度高、重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn)，但它只是一種過篩手段，并不能完全取代手工法[4]。顯微鏡法在血小板計(jì)數(shù)結(jié)果異常的情況下是電阻抗法的有益補(bǔ)充。對血小板明顯減少、明顯增多和直方圖異常的標(biāo)本，需用顯微鏡法進(jìn)行復(fù)核，從而得出更準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果。

總而言之，電阻抗法和顯微鏡法都具有各自的優(yōu)缺點(diǎn)，在常規(guī)檢查中應(yīng)優(yōu)先選擇電阻抗法進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)，使其能快速、高效地為臨床診斷和治療服務(wù)。在電阻抗法測定結(jié)果異常的情況下，應(yīng)結(jié)合血小板直方圖和MCV等指標(biāo)，結(jié)合顯微鏡法對血小板計(jì)數(shù)進(jìn)行復(fù)核，做出綜合判斷，為臨床提供準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果。

[1]許麗霞，葉彩麗，劉集鴻.XE-2100血液分析儀與顯微鏡血小板計(jì)數(shù)的比較[J].廣州醫(yī)藥，2012，43（4）：53-55.

[2]朱忠勇.準(zhǔn)確計(jì)數(shù)血小板方法學(xué)研究進(jìn)展[J].國外醫(yī)學(xué)臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊，2002，23（3）：131-132.

[3]陳小劍，舒曠怡.光學(xué)法糾正血小板計(jì)數(shù)假性減少1例[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2004，19（4）：284-287.

[4]秦海秋，郭輝.分析儀法測定血小板的影響因素分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2007，22（8）：123-124.■