丁利勝,徐瑞軍,管靈奶,方麗娟,趙洪燦,童向民

(1.杭州市蕭山區(qū)第四人民醫(yī)院;2.杭州市第一人民醫(yī)院;3.浙江大學醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院,浙江 杭州 310000)

網(wǎng)織紅細胞(reticulocyte,Ret)是計數(shù)是觀察人體骨髓紅系細胞造血功能重要指標也是臨床貧血及有關疾病治療療效的重要觀察指標[1]。人工顯微鏡鏡檢法受到技術人員形態(tài)學水平、責任性等多種因素影響,所以穩(wěn)定性和重復性差[2]。近年來,隨著全自動血液分析儀檢測技術的不斷發(fā)展,為RET檢測提供了科學的方法,COULTER LH750全自動血液分析儀利用激光和核酸染色技術同時對上萬個紅細胞進行分析自動得出RET結果,但其結果與性能究竟如何?需要進一步分析與評價

一、材料和方法

1.病例來源。隨機抽取門診、病房EDTA-K2抗凝的血常規(guī)標本80份,每份標本均進行手工網(wǎng)織紅細胞計數(shù)和LH750儀器RET檢測。

2.實驗方法。取溶血性貧血患者標本(RET>5.0%)、健康體檢者標本、再生障礙性貧血患者標本(RET<0.5%)各一份EDTA-K2抗凝血備用。用于儀器高、中、低值RET檢測精密度及線性范圍評價。批內精密度:取患者高、中、低值RET標本各一份,每份儀器連續(xù)測定10次,計算±s及變異系數(shù)(CV);批間精密度:每天同一時間用配套原裝質控品檢測RET,連續(xù)測定22天,計算±s及CV。儀器穩(wěn)定性檢測:用1 份抗凝血樣本,分別于即時,1、2、4、8、24、48、72h 測定 RET,要求每個時間段測三次求均值。攜帶污染率檢測:選取高值樣本(6.51%)連續(xù)測定3次,再檢測低值樣本(0.52%)連續(xù)測定3次,按照公式計算攜帶污染率(%)=[(L1-L3)/(H3-L3)×100%]。線性范圍檢測:用生理鹽水將RET高值樣本分別作100%、80%、60%、50%、40%、20%、10%、5%稀釋,每個稀釋度平行測3次結果,取均值。每一稀釋度測得的RET絕對值與理論值比較,以理論值為X軸,實測值為Y軸,得出線性回歸方程。

1.精密度。(1)批內精密度。LH750測定高、中、低 Ret值抗凝血樣本,每份標本連續(xù)測定10次,其批內精密度結果見表1。(2)批間精密度。用原裝高值質控品檢測RET,連續(xù)測定22天,計算±s及CV。其批間精密度結果見表2。(3)

二、結 果

表1 三分標本測定10次結果及CV值

表2 批間精密度測定結果(CV%)

儀器結果穩(wěn)定性和攜帶污染率。在2-8℃條件下,48h內Ret測定值無明顯變化,CV<1%,72h略有降低。攜帶污染率:選取高值樣本(6.51%)連續(xù)測定3次,再檢測低值樣本(0.52%)連續(xù)測定3次,攜帶污染率為0.33%。(4)線性范圍。以理論值為X軸,以實測值為Y軸,得出回歸方程為Y=0.993X+7.26。(5)與手工結果比較及相關性。LH750測定Ret的結果與人工顯微鏡計數(shù)法的結果比較(t=1.739,P>0.05),結果無統(tǒng)計學差異,兩種結果的相關性良好(r=0.98,P<0.01)。

三、討 論

全自動COULTERLH750血細胞分析儀是采用單個流式通道進行細胞及網(wǎng)織紅細胞檢測,將網(wǎng)織紅細胞內殘存的RNA著色,并結合儀器VCS(容量、電導、激光散射)等技術,自動分析30000個紅細胞,大大提高了網(wǎng)織紅細胞分析結果的準確性。有報道提示,全自動法及顯微鏡法(均抗凝標本)Ret檢測間差異有統(tǒng)計學意義[3],但也有相反報道[4]。從我們的實驗結果表明,LH750自動檢測與人工顯微鏡法計數(shù)Ret比較,相關性良好。批間重復性實驗顯示準確可靠,其變異系數(shù)和攜帶污染率小。

人工顯微鏡法不適合大標本量開展,LH750全自動分析儀是在封閉的系統(tǒng)中進行,受外來因素影響少且分析的細胞數(shù)量多,其結果精密度、準確度較高,更能滿足現(xiàn)代醫(yī)院的批量檢測。不僅如此,LH750血液分析儀還提供了不成熟網(wǎng)織紅細胞分數(shù),平均網(wǎng)織紅細胞體積,高、中、低熒光網(wǎng)織紅細胞百分比等多項新型參數(shù),為臨床骨髓造血恢復、貧血治療療效等提供有效指標。

綜上所述,對COULTERLH750全自動血液分析儀與傳統(tǒng)人工顯微鏡法相比優(yōu)越性明顯,能取代人工顯微鏡檢查。

[1]羅春麗.臨床檢驗基礎[M].第二版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2007.32.

[2]張采芬,李鑒峰.網(wǎng)織紅細胞計數(shù)、絕對值、網(wǎng)織紅細胞指數(shù)的臨床意義[J].中國實用內科雜志,2002,22(1):31-33.

[3]趙燕田.儀器法與目測法網(wǎng)織紅細胞計數(shù)的比較[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學雜志,2005,20(5):38.

[4]王沈馨,鄭勝香.兩種網(wǎng)織紅細胞計數(shù)方法的比較[J].寧夏醫(yī)學雜志,2006,28(1):71-72.