許瑞

（駐馬店市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南駐馬店 463000）

豬圓環(huán)病毒2型引起急性肺水腫新癥狀

許瑞

（駐馬店市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南駐馬店 463000）

豬圓環(huán)病毒（PCV）是迄今發(fā)現(xiàn)的最小動(dòng)物病毒之一，現(xiàn)已知PCV有兩個(gè)血清型，即PCV-1和PCV-2。PCV-1為非致病性的病毒，PCV-2為致病性的病毒。PCV-2是斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）的主要病原，PMWS最早發(fā)現(xiàn)于加拿大。最近在美國(guó)有學(xué)者報(bào)道，豬圓環(huán)病毒出現(xiàn)一種新的表現(xiàn)癥狀，稱(chēng)為急性肺水腫型(APE），它主要影響剛出生和剛斷奶的小豬，死亡率可達(dá)20%，臨床癥狀包括急性呼吸困難隨后導(dǎo)致迅速死亡，有的豬通常死亡前未見(jiàn)任何臨床癥狀。下面筆者就在美國(guó)發(fā)生的急性肺水腫型圓環(huán)病毒病做一下介紹，供大家參考。

一、APE豬的主要臨床癥狀和病理學(xué)變化

2009年，有學(xué)者報(bào)道，在美國(guó)中西部，免疫過(guò)圓環(huán)2型疫苗的豬出現(xiàn)了急性肺炎癥狀，主要發(fā)病豬為剛出生和剛斷奶的小豬。臨床癥狀包括急性呼吸困難、喘氣，隨后導(dǎo)致迅速死亡，皮膚也沒(méi)有變化，有的豬通常死亡前未見(jiàn)臨床癥狀。我們知道，一般情況下豬圓環(huán)病毒2型（PCV-2）與豬群中發(fā)生的許多疾病密切相關(guān)，主要引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）、豬皮炎與腎病綜合征（PDNS）、斷奶豬和育肥豬的呼吸道病綜合征（PRDC）、幼齡仔豬的先天性震顫等疾病，統(tǒng)稱(chēng)為圓環(huán)病毒相關(guān)疾?。≒CVAD），同時(shí)可造成免疫抑制。而這種急性肺炎導(dǎo)致迅速死亡的現(xiàn)象很容易與其他呼吸道病相混淆，進(jìn)而造成誤診。

解剖APE豬，其病理變化主要為肺部病變，顯示胸腔充滿(mǎn)清亮的積液，肺部潮濕和厚重， 呈現(xiàn)中度或重度的小葉性肺炎，大部分呈現(xiàn)大葉性肺炎，有的肺有片狀出血(圖1A）。肺的顯微鏡檢查顯示小葉內(nèi)膈葉彌漫性水腫膨脹，從而導(dǎo)致肺水腫的出現(xiàn)，肺間質(zhì)中有大量巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，血管壁壞死破裂(圖1B），周?chē)g隙是導(dǎo)致肺水腫的原因(圖1C）。多數(shù)感染豬淋巴系統(tǒng)衰竭，個(gè)別有鼻炎癥狀。

二、為什么說(shuō)APE癥狀是由PCV-2病毒引起

Cino-Ozuna等調(diào)查了堪薩斯和內(nèi)布拉斯加州相隔不少于200米的8個(gè)農(nóng)場(chǎng)，發(fā)現(xiàn)在其中四個(gè)農(nóng)場(chǎng)7周齡和14周齡的豬均出現(xiàn)了APE癥狀，其中7周齡的保育豬臨床癥狀非常明顯。用PCR和免疫組織化學(xué)診斷方法來(lái)確診圓環(huán)病毒2型感染。結(jié)果顯示在同一農(nóng)場(chǎng)的同一群豬中呈現(xiàn)急性肺炎的豬和無(wú)臨床癥狀豬的數(shù)量幾乎相等。所有急性肺炎豬群血清和組織中PCV-2呈陽(yáng)性。不同的PCR檢測(cè)包括oligo核酸探針針對(duì)PCV2a和PCV2b的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)PCV2b是優(yōu)勢(shì)基因型，而且肺、淋巴結(jié)和脾等各組織勻漿的PCR循環(huán)低至7個(gè)循環(huán)，說(shuō)明PCV-2還在豬群中大量存在。相反，無(wú)臨床癥狀的豬群的13份血清樣本中僅2份PCV-2陽(yáng)性，PCV-2病毒在急性肺炎和無(wú)臨床癥狀豬群之間有明顯的不同。PCV-2病毒大量存在于急性肺炎豬群，且在肺和淋巴結(jié)免疫組織化學(xué)反應(yīng)陽(yáng)性得到進(jìn)一步確診。另外在肺血管內(nèi)壁單核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中可以觀(guān)察到PCV-2抗原，且在血管內(nèi)皮細(xì)胞中也可以觀(guān)察到PCV-2抗原(圖1D）。病毒蛋白在內(nèi)皮細(xì)胞核的定位表明其可能是病毒復(fù)制的活性部位。

有人利用免疫熒光法對(duì)PCV-2特異性抗體進(jìn)行檢測(cè)(IFA），其中所有的豬均注射圓環(huán)病毒2型疫苗，免疫熒光法不能區(qū)分注射疫苗產(chǎn)生的抗體和野毒感染產(chǎn)生的抗體，但是，急性肺炎豬的抗體有很重要的特征，例如，9份急性肺炎豬中有5份檢測(cè)不到抗體，提示我們，急性肺炎豬任何PCV-2型抗體不管來(lái)自母源抗體或者疫苗源抗體都缺失。

圖1 APE豬的解剖學(xué)和顯微鏡組織學(xué)特征。A：急性死亡豬的胸腔內(nèi)含有大量的積液，肺部明顯水腫，淤血，出血。B：肺薄膜用蘇木精-曙紅染色。表示肺間質(zhì)有巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞浸潤(rùn)和動(dòng)脈管壁平滑肌纖維素樣壞死。C：肺水腫的肺薄片的組織蘇木精-伊紅染色。呈現(xiàn)明顯的周?chē)鷦?dòng)脈擴(kuò)張（箭頭）。D：肺的PCV-2抗原免疫組織化學(xué)染色。動(dòng)脈管腔內(nèi)許多細(xì)胞（單核細(xì)胞）的細(xì)胞質(zhì)染色和動(dòng)脈壁內(nèi)皮細(xì)胞核染色（箭頭）。

除了圓環(huán)病毒之外，作為輔助因子，Cino-Ozuna等還調(diào)查了其他幾種病毒（豬藍(lán)耳病病毒PRRSV、豬巨細(xì)胞病毒PCMV、豬輸血傳播病毒TTV、豬流感病毒SI等）。豬藍(lán)耳病病毒是一個(gè)常見(jiàn)的與正在感染和嚴(yán)重感染PCVAD的病例相關(guān)的病毒，盡管在Cino-Ozuna調(diào)查的其中一農(nóng)場(chǎng)曾經(jīng)有過(guò)藍(lán)耳病史，但藍(lán)耳病毒PCR診斷和血清學(xué)檢測(cè)顯示所有急性肺炎豬群藍(lán)耳病毒陰性，另外，四個(gè)感染APE的農(nóng)場(chǎng)有兩個(gè)場(chǎng)整體藍(lán)耳病毒陰性。豬鼻炎的存在暗示PCMV的可能性，Hamel等報(bào)道，血清和組織樣本的PCMV的PCR檢測(cè)顯示PCMV（豬巨細(xì)胞病毒）在APE豬和無(wú)臨床癥狀的豬群之間的流行情況無(wú)明顯的差別。近年來(lái)，豬輸血傳播病毒TTV病毒被認(rèn)為與圓環(huán)病毒相關(guān)疾病具有協(xié)同作用。Segale，s等PCR檢測(cè)TTV-1和TTV-2顯示TTV陽(yáng)性率在APE豬和無(wú)臨床癥狀的豬群中基本相同。豬流感的臨床癥狀的缺失與APE感染豬鼻腔試紙的陰性結(jié)果可以排除豬流感的可能性。其他普通病毒的結(jié)果相似，顯示與APE沒(méi)有明顯關(guān)系。

三、APE發(fā)生原因的探討

1.PCV-2基因突變。為什么免疫過(guò)圓環(huán)病毒2型的豬還會(huì)發(fā)生急性肺炎？一個(gè)可能原因是PCV-2衣殼蛋白基因突變從而逃離了抗體的保護(hù)。從同一農(nóng)場(chǎng)的4個(gè)急性肺炎豬的PCV-2的ORF2的肽鏈序列是從組織病料進(jìn)行PCR擴(kuò)增而得，這4個(gè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序序列基本相同，僅有一條序列第30位氨基酸由V變成了L，其中一條急性肺炎病例的PCV-2的ORF2的肽鏈序列D71923，與在美國(guó)中西部2005-2006年暴發(fā)PCVAD時(shí)分離的11條具有代表性的堪薩斯序列相比很相似，并且與其中四條237-A，237-C，237-D，和D-28-1序列完全相同。因此，與APE相關(guān)的圓環(huán)病毒2型是在該區(qū)域一段時(shí)期內(nèi)流行的代表性病毒，也很容易啟發(fā)我們想到可能PCV-2其中某個(gè)蛋白基因的突變就有可能脫離保護(hù)或者引起新的癥狀。

2.豬圓環(huán)病毒2型疫苗的廣泛使用。PCV-2是一種在環(huán)境中普遍存在的病毒，各生長(zhǎng)階段的豬都易感，后備母豬在6～8周齡后進(jìn)行最后一次PCV-2疫苗免疫，抗體水平逐漸消退，分娩時(shí)，初乳中母源抗體的低水平就不能充分地保護(hù)新生仔豬 PCV-2感染。在PCV-2疫苗發(fā)揮作用之前，新生仔豬可以被在母豬繁殖之前一定程度的自然感染產(chǎn)生的母源抗體保護(hù)。因此，APE可能是一個(gè)意想不到的由于PCV-2疫苗的廣泛使用而導(dǎo)致的后果。

四、如何預(yù)防APE的發(fā)生

PCVAD被描述為育肥豬的慢性漸進(jìn)性最終衰竭死亡的傳染性動(dòng)物疾病，肺水腫是由圓環(huán)病毒2型導(dǎo)致的免疫抑制或者功能障礙從而引起典型的細(xì)菌繼發(fā)感染或者病毒感染的結(jié)果。相反，APE豬死亡率的傳播很快速，容易感染健康豬， APE更容易感染年幼豬，不與其他的傳染性疾病相關(guān)，其發(fā)病機(jī)理起初是年幼豬肺內(nèi)單核細(xì)胞和血管壁內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)有大量病毒增殖，導(dǎo)致機(jī)體更易感染并且有助于更高水平的病毒復(fù)制，感染常發(fā)生于接種疫苗之前的仔豬，在缺乏母源抗體保護(hù)水平的情況下，APE易感豬體內(nèi)缺乏相應(yīng)的抗體保護(hù)水平，而在免疫之前感染。所以，一種使幼豬避免APE的方法是早期免疫。另一種方法是做好繁殖動(dòng)物的抗體跟蹤監(jiān)測(cè)，當(dāng)PCV-2特異性抗體水平低的時(shí)候進(jìn)行及時(shí)補(bǔ)免和補(bǔ)防來(lái)提高和改善。

另外就是適合本場(chǎng)科學(xué)合理的免疫程序，不要千篇一律，照搬照抄，否則會(huì)適得其反，達(dá)不到相應(yīng)的預(yù)防疾病的效果，浪費(fèi)人力、物力和財(cái)力；還有至關(guān)重要的一點(diǎn)就是做好日常飼養(yǎng)管理工作，這也是一種預(yù)防的方法，不能忽視，把工作做在平時(shí)，對(duì)防制工作很重要。以下是防制中的幾個(gè)具體建議。

1.加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。降低飼養(yǎng)密度，實(shí)行嚴(yán)格的全進(jìn)全出制和混群制度，減少環(huán)境應(yīng)激因素，控制并發(fā)感染，保證豬群具有穩(wěn)定的免疫狀態(tài)，加強(qiáng)豬場(chǎng)內(nèi)部、外部的生物安全措施，購(gòu)豬時(shí)保證豬只來(lái)自清潔的豬場(chǎng)是預(yù)防控制本病、降低經(jīng)濟(jì)損失的有效措施。

2.做好豬主要傳染病的預(yù)防免疫和免疫效果監(jiān)測(cè)。雖然APE與其他傳染病無(wú)明顯的聯(lián)系，但PCV-2與其相關(guān)豬病的發(fā)生還需要另外的條件或共同因素才能誘發(fā)臨床癥狀，且常見(jiàn)于與其他病毒病或細(xì)菌病混合感染時(shí)。所以目前世界各國(guó)控制本病的經(jīng)驗(yàn)是做好適當(dāng)?shù)闹鲃?dòng)免疫和被動(dòng)免疫，做好豬場(chǎng)豬瘟、豬偽狂犬病、豬細(xì)小病毒病、氣喘病和藍(lán)耳病等疫苗的免疫接種，確保胎兒和吮乳期仔豬的安全是重中之重。一般規(guī)模豬場(chǎng)各方面免疫做的還都比較好，有些大型豬場(chǎng)和種豬場(chǎng)免疫效果的跟蹤監(jiān)測(cè)做的也很好，主要還是一些散養(yǎng)戶(hù)和小規(guī)模的豬場(chǎng)做的不夠，也很容易發(fā)生疾病，這方面要引起注意。

3.人工被動(dòng)免疫和自家疫苗的使用?？刹扇⊙瀵煼ā呢i場(chǎng)的育肥豬采血(健康的淘汰種豬血最好），分離血清，給斷乳期的仔豬腹腔注射，最好是本場(chǎng)內(nèi)的豬，這種方法見(jiàn)效快，立竿見(jiàn)影。豬場(chǎng)一旦發(fā)生本病，可把發(fā)病豬的內(nèi)臟加工成自家疫苗，據(jù)臨床實(shí)踐，效果不錯(cuò)。但要注意滅活要徹底，保證其安全性，以免散毒。

4.“感染”物質(zhì)的主動(dòng)免疫?！案腥尽蔽镔|(zhì)指本豬場(chǎng)感染豬的糞便、死產(chǎn)胎豬、木乃伊胎等，用來(lái)喂飼母豬，尤其是初產(chǎn)母豬在配種前喂給，能起到較好的效果。如有一定抗體的母豬在懷孕80 d以后再作補(bǔ)充喂飼，則可產(chǎn)生較高免疫水平，并通過(guò)初乳傳遞給仔豬。這種方法，不僅對(duì)防制本病、保護(hù)胎豬和吮乳仔豬的健康有效，而且對(duì)其他腸道病毒引起的繁殖障礙也有良好的效果。但使用本法要十分慎重，如果場(chǎng)內(nèi)有小豬會(huì)造成人工感染。

5.藥物預(yù)防。預(yù)防性投藥和治療，對(duì)控制細(xì)菌源性的混合感染或繼發(fā)感染，是非?？扇〉模⒁庖m當(dāng)投藥，不能濫用藥以免造成細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生。

備注：本文編譯自《Character ization of a New Disease Syndrome As sociated with Porcine Circovirus Type 2 in Previously Vaccinated Herds》A da G. Cino-y， Richard Hesse. C linical Veterinary Microbiol.[J] ，May 2011; 49: 2012 - 2016.