張 成，王剛林

(1.陜西省醫(yī)療器械檢測中心，陜西 西安 710075; 2.重慶醫(yī)療器械質(zhì)量檢驗(yàn)中心，重慶 401147)

作為臨床上廣泛使用的醫(yī)療器械，一次性使用無菌導(dǎo)尿管生產(chǎn)的原料主要有天然乳膠、硅橡膠和聚氯乙烯(PVC)等，很適合使用環(huán)氧乙烷滅菌。環(huán)氧乙烷是一種可刺激身體表面并引起強(qiáng)烈反應(yīng)的易燃和易爆有毒氣體，沸點(diǎn)為10.8℃，室溫條件下很容易揮發(fā)成氣體，進(jìn)入人體可致突變，對胎兒產(chǎn)生毒性致畸，對睪丸功能也有不良影響，并能損傷體內(nèi)器官。因此，對環(huán)氧乙烷的殘留量必須嚴(yán)加控制。本試驗(yàn)中建立了一次性使用無菌導(dǎo)尿管中環(huán)氧乙烷殘留量的測定方法[1]，旨在確保產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性。

1 儀器與材料

Agilent 6890 N型氣相色譜儀及工作站，Agilent G 1888型全自動頂空進(jìn)樣器，F(xiàn)ID檢測器(美國安捷倫科技有限公司);SPB－3型全自動空氣源(北京中惠普分析技術(shù)研究所);SIMS 50000個人型純水器(美國Millipore公司);氮?dú)?純度為99.999%)、氫氣(純度為99.999%)均購自四川梅塞爾氣體產(chǎn)品有限公司西安分公司;BP 211D型分析天平(德國Sartorius公司);20 mL頂空瓶(美國安捷倫科技有限公司)。環(huán)氧乙烷對照品(規(guī)格為5 mL/支，含量為99.4%，批號為350001－201002，購自中國食品藥品檢定研究院;一次性使用無菌導(dǎo)尿管(批號分別為20100612，201010F3，200912H3，湛江市事豐實(shí)業(yè)有限公司)，規(guī)格分別為雙腔氣囊標(biāo)準(zhǔn)型12 Fr(5～10 mL)、雙腔氣囊標(biāo)準(zhǔn)型14 Fr(5～10 mL)、雙腔氣囊標(biāo)準(zhǔn)型16 Fr(30 mL)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱:P/N Agilent 19091 J－413 HP－5毛細(xì)管柱(30.0 m ×320 μm，0.25 μm)[1];柱溫:80 ℃;進(jìn)樣口溫度:150 ℃;載氣:氮?dú)?99.999%);流速:1.2 mL/min;分流比:5 ∶1;氫氣流速:40 mL/min;空氣流速:450 mL/min;尾吹氣流速:40 mL/min。自動頂空進(jìn)樣器參數(shù):平衡溫度80℃;定量環(huán)溫度90℃;傳輸線溫度100℃;氣相循環(huán)時間5 min;平衡時間8 min;加壓時間0.05 min，進(jìn)樣時間1 min。在此條件下，理論塔板數(shù)按環(huán)氧乙烷峰計(jì)算為145 000，色譜圖見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.2 溶液制備

取一外部干燥的50 mL容量瓶，加超純水約30 mL，精密稱重。精密移取環(huán)氧乙烷對照品0.6 mL，迅速加入瓶中，搖勻，精密稱重(兩次稱重之差即為溶液中所含環(huán)氧乙烷的質(zhì)量)，用超純水稀釋至刻度，搖勻，即得對照品貯備溶液(質(zhì)量濃度為87.23 g/L)。精密移取對照品貯備溶液2 mL，稀釋至100 mL，得質(zhì)量濃度為1 744.6 μg/mL 稀釋溶液，精密移取該溶液 5 mL，稀釋至 50 mL，得質(zhì)量濃度為174.46 μg/mL稀釋溶液，再精密移取該稀釋溶液0.3，0.6，1.2，2.4，4.8，9.6 mL，分別置 100 mL 容量瓶中，稀釋至刻度，作為系列對照品溶液(質(zhì)量濃度分別為 0.523 9，1.046 8，2.093 5，4.187 0，8.374 1，16.748 2 μg/mL)。取一次性使用無菌導(dǎo)尿管1 g，精密稱定，剪碎，放入20 mL頂空瓶中，精密加入超純水5 mL，作為供試品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察:取系列對照品溶液，頂空瓶加樣5 mL，按擬訂的色譜條件測定環(huán)氧乙烷峰面積，以對照品峰面積為縱坐標(biāo)(Y)，對照品溶液質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)(X)、繪制工作曲線，回歸方程為Y=0.462 8X－0.048 39，r=0.999 97(n=6)。結(jié)果表明，環(huán)氧乙烷質(zhì)量濃度在 0.523 4 ～16.748 2 μg/mL 范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

精密度試驗(yàn):取質(zhì)量濃度為4.187 0 μg/mL的同一對照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，測定環(huán)氧乙烷峰面積。結(jié)果的RSD=2.0%(n=6)，表明儀器的精密度良好。

重復(fù)性試驗(yàn):取樣品適量，依法制備供試品溶液，平行6份，測定環(huán)氧乙烷殘留量。結(jié)果殘留量為 3.126 5 μg/g，RSD=2.3%(n=6)，表明方法的重復(fù)性良好。

加樣回收試驗(yàn):取已測知含量的樣品約0.5 g，精密稱定，放入20 mL頂空瓶中，平行6份，分別加入質(zhì)量濃度為1.0468 μg/mL環(huán)氧乙烷對照品溶液2 mL，加入超純水補(bǔ)足5 mL。按擬訂的色譜條件測定，計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。

表1 環(huán)氧乙烷加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

2.4 樣品含量測定

取3批樣品，依法制備供試品溶液，按擬訂的色譜條件分別測定。結(jié)果批號為20100612，201010F3，200912H3的3批樣品中環(huán)氧乙烷殘留量分別為 3.13，3.10，2.85 μg/g(n=3)。

3 討論

3.1 環(huán)氧乙烷殘留量測定的國家標(biāo)準(zhǔn)

現(xiàn)行有效的國家標(biāo)準(zhǔn)GB 15980－1995《一次性使用醫(yī)療用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》[2]、GB 15979－2002《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》[3]中對于環(huán)氧乙烷殘留量的測定方法是采用填充柱和液體直接進(jìn)樣的方式。而 GB/T 16886.7－2001《醫(yī)療器械生物學(xué)評價(jià)第 7部分:環(huán)氧乙烷滅菌殘留量》[4]及 GB/T 14233.1－2008《醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法第1部分:化學(xué)分析方法》[5]作為醫(yī)療器械行業(yè)目前廣泛引用的兩個標(biāo)準(zhǔn)，其中對于環(huán)氧乙烷殘留量的測定方法僅規(guī)定了一個指導(dǎo)性方法。為此，參照上述國家標(biāo)準(zhǔn)對一次性使用無菌導(dǎo)尿管的環(huán)氧乙烷殘留量檢測方法進(jìn)行了較詳細(xì)的考察。采用頂空進(jìn)樣毛細(xì)管氣相色譜法測定，3批樣品的檢測結(jié)果均符合現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定(環(huán)氧乙烷殘留量應(yīng)不超過10 μg/g)。此方法快速簡便、結(jié)果準(zhǔn)確、可靠、重現(xiàn)性好，可作為一次性使用無菌導(dǎo)尿管環(huán)氧乙烷殘留量的檢測方法。

3.2 氣相色譜及頂空條件

本試驗(yàn)中所采用的方法是頂空毛細(xì)管氣相色譜法，對60，70，80，90℃等毛細(xì)管柱溫溫度進(jìn)行了考察，結(jié)果當(dāng)柱溫為80℃時，環(huán)氧乙烷的峰形較好、靈敏度高;對頂空條件也進(jìn)行了考察，在同樣的測定條件下比較了60，70，80，90℃等頂空平衡溫度，結(jié)果80℃和90℃時環(huán)氧乙烷峰面積積分值較大且相當(dāng)，說明80℃時環(huán)氧乙烷逸出較完全，故選擇頂空平衡溫度為80℃;對5，8，10 min頂空平衡時間進(jìn)行比較，結(jié)果平衡時間選擇8 min時，環(huán)氧乙烷的靈敏度較高，可以滿足實(shí)際要求。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2010:附錄ⅤD.

[2]GB 15980－1995，一次性使用醫(yī)療用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)[S].

[3]GB 15979－2002，一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)[S].

[4]GB/T 16886.7－2001，醫(yī)療器械生物學(xué)評價(jià) 第7部分:環(huán)氧乙烷滅菌殘留量[S].

[5]GB/T 14233.1－2008，醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法 第1部分:化學(xué)分析方法[S].