陳小勇，蒙小麗，彭其勝，吳淑梅

(1.重慶市涪陵中心醫(yī)院，重慶 408000; 2.重慶市涪陵區(qū)婦幼保健院，重慶 408000)

甘油乙醇洗手液為正在研制的手消毒制劑，用于臨床醫(yī)護(hù)人員手部，明顯節(jié)約時(shí)間，尤其在勞動(dòng)強(qiáng)度大、病情危重、病情變化快的重癥監(jiān)護(hù)室，將為患者贏得搶救、治療、護(hù)理時(shí)間[1]。為了有效控制制劑質(zhì)量，保障臨床消毒安全，筆者建立了同時(shí)測(cè)定甘油乙醇洗手液中甘油和乙醇含量的氣相色譜(GC)法?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

島津2010型氣相色譜儀;AOC－20i型自動(dòng)進(jìn)樣器;氫火焰離子化檢測(cè)器。甘油乙醇洗手液(醫(yī)院自制，規(guī)格為每袋100 mL，甘油和乙醇體積分?jǐn)?shù)分別為3%和75%，批號(hào)分別為20110517，20110607，20110628);其余試劑為分析純或色譜純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱:HP －Innowax毛細(xì)管柱(30 m ×0.53 mm，1.0 μm;柱溫:起始溫度為100℃，維持3 min，以100℃ /min的速率升溫至240℃，維持7 min;分流比:20∶1;進(jìn)樣口溫度:250℃;檢測(cè)器溫度:300 ℃;進(jìn)樣體積:1.0 μL;柱流速:6 mL/min;氫氣:30 mL/min;空氣:300 mL/min;尾吹:20 mL/min。

2.2 溶液制備

精密稱取正丙醇60 g，置100 mL容量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得內(nèi)標(biāo)溶液。取乙醇60 g和甘油3.8 g，精密稱定，置同一100 mL容量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品貯備液。精密量取樣品10.0 mL，置25 mL容量瓶中，精密量取內(nèi)標(biāo)溶液10.0 mL，加水稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。精密量取對(duì)照品貯備液10.0 mL，置25 mL容量瓶中，精密量取內(nèi)標(biāo)溶液10.0 mL，加水稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

系統(tǒng)適用性試驗(yàn):取2.2項(xiàng)下方法制備的乙醇對(duì)照品溶液、甘油對(duì)照品溶液、內(nèi)標(biāo)(正丙醇)溶液各1.0 μL，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，見(jiàn)圖1?？梢?jiàn)，甘油、內(nèi)標(biāo)與乙醇的分離度良好。

圖1 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)色譜圖

線性關(guān)系考察:精密量取2.2項(xiàng)下對(duì)照品貯備液5，8，10，12，15 mL，分別置25 mL容量瓶中，分別加內(nèi)標(biāo)溶液10 mL，加水稀釋至刻度，搖勻，即得系列對(duì)照品溶液。照擬訂色譜條件進(jìn)樣，記錄色譜峰面積，以各組分質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、各組分峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積之比(As/Ai)為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程，乙醇 為Y=24.068X－0.064 2(r=0.999 6，n=5)，甘 油 為Y=0.485 8X+0.000 2(r=0.9992，n=5)。結(jié)果表明，乙醇和甘油質(zhì)量濃度的線性范圍分別為0.12～0.36g/L和0.0076～0.0228g/L。

精密度試驗(yàn):分別精密量取供試品溶液和對(duì)照品溶液1 μL，注入氣相色譜儀，記錄色譜峰面積，按內(nèi)標(biāo)法計(jì)算樣品含量。結(jié)果乙醇和甘油平均含量分別為3.03%和75.24%，RSD分別為0.32%和0.21%(n=6)，表明方法精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一供試品溶液，分別于室溫放置0，1，2，4，8 h時(shí)精密量取1.0 μL進(jìn)樣，結(jié)果乙醇和甘油平均含量分別為3.03%和 75.23%，RSD分別為 0.28%和 0.14%(n=5)，表明供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

檢出限與定量限確定:用逐步稀釋法進(jìn)行測(cè)定，以信噪比約為3時(shí)計(jì)算檢出限，以信噪比約為10時(shí)計(jì)算定量限。結(jié)果乙醇、甘油的檢出限分別是 2.64 μg/mL 和 11.79 μg/mL，定量限分別是 8.71 μg/mL 和 38.91 μg/mL。

加樣回收試驗(yàn):精密量取已知含量的樣品溶液5 mL共9份，分別置25 mL容量瓶中，每3份中分別加入對(duì)照品貯備溶液4.0，5.0，6.0 mL，用水稀釋到刻度，搖勻。精確進(jìn)樣 1.0 μL，每份進(jìn)樣2次，測(cè)出其峰面積，計(jì)算平均回收率。結(jié)果見(jiàn)表1。

2.4 樣品含量測(cè)定

依法對(duì)3批樣品中乙醇和甘油含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=9)

3 討論

氣相色譜法具有高柱效、高靈敏度、用量少、分析速度快等優(yōu)點(diǎn)，尤其適合揮發(fā)性成分的測(cè)定[2]。鑒于乙醇與水、甘油能任意混溶，且乙醇具有揮發(fā)性，曾嘗試采用指示劑法測(cè)定甘油[3]和乙醇含量[4]，但由于乙醇和甘油的相互干擾，即使用空白試驗(yàn)校正，滴定結(jié)果仍然誤差較大。

文中建立了氣相色譜直接進(jìn)樣法測(cè)定甘油乙醇洗手液中乙醇和甘油的含量。由于乙醇和甘油的沸點(diǎn)相差很大，因此采用程序升溫，可以同時(shí)檢測(cè)乙醇和甘油;且采用正丙醇作為內(nèi)標(biāo)，進(jìn)行內(nèi)標(biāo)法測(cè)定，結(jié)果更準(zhǔn)確。經(jīng)驗(yàn)證，該方法的峰形、理論板數(shù)、分離度、檢出限、定量限、重復(fù)性、線性關(guān)系等均能滿足分析要求，測(cè)定結(jié)果與配制處方結(jié)果一致。

表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果(n=3)

[1]周靜怡，唐正利.酒精甘油消毒液用于重癥監(jiān)護(hù)室護(hù)士手消毒效果探討[J].護(hù)理研究，2004，18(10):1 759.

[2]李 成，張開(kāi)禮，巫小娟，等.氣相色譜法測(cè)定復(fù)方達(dá)克羅寧薄荷腦潤(rùn)膚止癢水中薄荷含量[J].中國(guó)藥業(yè)，2011，7(13):16.

[3]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(二部)[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:83－84.

[4]趙 崢，謝廷英.指示劑法測(cè)定酒中乙醇含量[J].微量元素與健康研究，2007，24(1):68.