杜公福， 周艷芳， 石延霞， 謝學(xué)文， 李寶聚

（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜與花卉研究所，北京 100081）

匍柄霉屬（StemphyliumWallroth）真菌是絲狀分生孢子一類常見真菌，可引起洋蔥、大蔥、大蒜、苜蓿、萵苣、番茄、胡蘿卜、甘藍、卷心菜、西葫蘆、蠶豆、扁豆、甜菜、辣椒、景天屬等蔬菜和其他多種植物病害［1］。到目前為止，世界上已報道匍柄霉屬病原菌大約150種，我國記載40種以上［2］。早在1997年，番茄匍柄霉葉斑病病原菌就被我國列為進境植物檢疫潛在危險性病原真菌，傳播途徑為種子，在世界范圍內(nèi)均可發(fā)生，但溫暖潮濕地區(qū)發(fā)生嚴重［3］。國內(nèi)最初報道匍柄霉葉斑病大面積暴發(fā)是在2002年山東魚臺縣種植的3萬個番茄大棚中，當(dāng)時發(fā)生匍柄霉葉斑病的病棚率為90%，造成減產(chǎn)20%左右，有的甚至減產(chǎn)80%，同時造成番茄果實質(zhì)量下降［4］。2005年貴州高山地區(qū)種植的進口番茄品種表現(xiàn)出對番茄匍柄霉葉斑病的高感性，由于該病害在以往種植的品種上極少發(fā)現(xiàn)，農(nóng)民缺乏防治經(jīng)驗，因而防治不力，給生產(chǎn)帶來毀滅性打擊［5］。隨著對匍柄霉葉斑病的重視及調(diào)查研究，發(fā)現(xiàn)該類病害同樣嚴重危害其他蔬菜，例如由匍柄霉引起的大蒜葉枯病造成大蒜損失達20%～30%，嚴重年份及部分地塊達50%以上［6］；同時也不斷發(fā)現(xiàn)該屬真菌侵染新的寄主和其他蔬菜上發(fā)現(xiàn)的該屬新種，例如在菠菜上發(fā)現(xiàn)該屬新種—菠菜匍柄霉（Stemphylium spinaciae）［7］。匍柄霉葉斑病已經(jīng)成為我國近年來新發(fā)生及流行的一種病害。

基于海南省是我國冬季無公害蔬菜生產(chǎn)的重要基地，也是北運蔬菜生產(chǎn)的主要基地之一。作者于2009－2011年開展了對海南北運蔬菜真菌病害的調(diào)查與病原鑒定，旨在為冬季蔬菜病害的防治提供理論依據(jù)。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，近年來在我國新發(fā)生及流行的一種病害—匍柄霉葉斑病也正在影響海南冬種蔬菜的正常生長與產(chǎn)量。該病害能侵染苦瓜、菜豆、番茄、辣椒、野茄子、蕹菜、蔥和萵苣等多種蔬菜，尤其在番茄上危害最為嚴重，通常會在葉片上形成近圓形或不規(guī)則形褐色病斑，隨病情發(fā)展，病葉率可達95%以上，導(dǎo)致整株植株干枯。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本采集

在北運蔬菜生長周期內(nèi)，分3批次到主要種植區(qū)，進行田間觀察，調(diào)查發(fā)病情況，照相記錄各種癥狀，采集病害標(biāo)本68份。

1.2 病原菌分離

從發(fā)病部位的病健交界處切取5mm×5mm的組織塊，經(jīng)75%乙醇消毒，在無菌水中漂洗3次后將組織塊移到PDA平板中，在25℃黑暗條件下培養(yǎng)。待長出菌落后，通過挑取菌落邊緣菌絲體或單孢分離的方法對病原菌進行純化和轉(zhuǎn)接培養(yǎng)［1］。

1.3 病原菌鑒定

切取典型病斑，放在載玻片上，滴上乳酚油，蓋上蓋玻片后，在酒精燈上加熱使葉片脫色；對純化培養(yǎng)的分離菌挑取菌絲體和分生孢子制作玻片，在顯微鏡下對其形態(tài)特征進行描述和測量，依據(jù)相關(guān)文獻和專著進行病原菌的種類鑒定。

2 結(jié)果與分析

2.1 匍柄霉菌的種類

在海南省冬種蔬菜主產(chǎn)區(qū)采集到68份蔬菜匍柄霉葉斑病的植株標(biāo)本，涉及的寄主有10個，即苦瓜、菜豆、番茄、辣椒、野茄子、蕹菜、蔥、萵苣、生菜、菠菜。共鑒定出匍柄霉菌7個種，即苦瓜匍柄霉（Stemphylium momordi）、菜豆匍柄霉（S.phaseolina）、番茄匍柄霉（S.lycopersici）、茄匍柄霉（S.solani）、囊狀匍柄霉（S.vesicarium）、萵苣匍柄霉（S.lactucae）和菠菜匍柄霉（S.spinaciae）。

2.2 匍柄霉葉斑病的描繪

2.2.1 苦瓜匍柄霉葉斑病

癥狀：危害葉片。病斑近圓形至不規(guī)則形，灰白色至灰褐色，邊緣褐色，有輪紋，直徑1～6mm（圖1a），后期可穿孔。當(dāng)數(shù)個病斑愈合呈大塊斑時，葉片受害較重。

病原菌：苦瓜匍柄霉（Stemphylium momordi X.G.Zhang ＆ T.Y.Zhang）［2］，分生孢子梗單生，圓柱狀，不分枝或偶有分枝，淡褐色至褐色，直立或微彎，具數(shù)個結(jié)節(jié)狀膨大部分，表面光滑，2～10個隔膜，（45.0～171.0）μm×（5.5～10.0）μm（圖1b）。分生孢子單生，卵形、長方形、圓柱形，淡褐色至褐色，表面光滑，直或微彎，1～5個橫隔膜，具數(shù)個縱、斜隔膜，橫隔膜處明顯縊縮，（20.5～60.5）μm×（10.0～22.0）μm，臍部色深，寬9.0～10.5 μm（圖1c）。

寄主：苦瓜（Momordica charantia Linn.）海南?？?KG10032501、KG10032502

圖1 苦瓜匍柄霉葉斑病Fig.1 Stemphyliumleaf spot on balsam pear

2.2.2 菜豆匍柄霉葉斑病

癥狀：病斑不規(guī)則形或近圓形，中央灰褐色，邊緣紫褐色，葉背面顏色較淺，病健交界不明顯（圖2a）。

病原菌：菜豆匍柄霉（Stemphylium phaseolina Yong Wang bis ＆ X.G.Zhang）［9］，分生孢子梗直立或略彎曲，單生或有分枝，圓柱狀，具有4～7個隔膜，（70～110）μm×（5～6）μm。具有1～3個結(jié)節(jié)狀膨大，膨大部顏色略深常具微疣突或粗糙，直徑6.5～7.5μm。分生孢子單生，頂生，橢圓形或?qū)捖褕A形至亞球形，淡黃褐色至中黃褐色，具2～4個橫隔膜，1～3個貫穿或近貫穿的縱隔膜，中間橫隔膜處明顯縊縮，分生孢子表面有致密的細小刻點或刺突，（26～42）μm×（13～22）μm（圖2b）。

菜豆（Phaseolus vulgaris Linn.）：海南?？冢珻D11041912；海南陵水，CD11012308。

圖2 菜豆匍柄霉葉斑病Fig.2 Stemphliumleaf spot on bean

2.2.3 番茄匍柄霉葉斑病

癥狀：主要危害葉片。病斑近圓形，中央淺褐色，邊緣深褐色，周圍有黃色暈圈，后期病斑能相互愈合導(dǎo)致葉枯，病斑具有同心輪紋，直徑1～10mm（圖3a）。

圖3 番茄匍柄霉葉斑病Fig.3 Stemphyliumleaf spot on tomato

病原菌：番茄匍柄霉［Stemphylium lycopersici（Enjoji）W.Yamam.］［2，10］，分生孢子梗葉兩面生，單生，圓柱狀，淡褐色，光滑，具有4～6個隔膜，膨大部深褐色，（55.0～175.0）μm×（4.5～6.0）μm，膨大部直徑6.0～8.0μm；分生孢子長方形至圓柱狀，淡褐色至灰褐色，直或略彎，具有1～5個橫隔膜，數(shù)個縱、斜隔膜，在隔膜處有縊縮，孢壁表面具有密集刺突，但有的孢子光滑，上部鈍圓或漸漸尖細，基部鈍圓至平，（28.0～61.0）μm×（15.0～27.5）μm，臍部深褐色，寬4.0～6.0μm （圖3b）。

寄主：番茄 （Lycopersicon esculentum Mill.），海南澄邁，F(xiàn)Q11040606；海南?？?，F(xiàn)Q10121105、FQ10122001。

2.2.4 茄匍柄霉葉斑病

癥狀：該病害可侵染葉片，病斑葉兩面生，近圓形或不規(guī)則形，黃褐色，邊緣深褐色，直徑1～10mm，微具輪紋，在葉背面顏色較淺，病健交接明顯。隨著病情發(fā)展，病斑后期可連接成片，導(dǎo)致葉片干枯。

茄匍柄霉（Stemphylium solani Weber）［2，11］分生孢子梗單生或數(shù)根簇生，偶有分枝，圓柱形，淺色至淺青黃褐色，直或彎曲，具數(shù)個結(jié)節(jié)狀膨大部分，光滑，產(chǎn)孢孔顏色深，2～12個隔膜，（20.0～197.5）μm×（4.0～6.0）μm，膨大部直徑7.0～8.0μm（圖4a）。分生孢子單生，頂生，倒棍棒形，褐色直或略彎，光滑或具有細疣，具有1～4個橫隔膜，數(shù)個縱、斜隔膜，多數(shù)在中間橫隔膜處有縊縮，頂端漸變細，基部鈍圓，（31.0～55.0）μm×（14.0～21.5）μm，臍部色深，寬5.0～8.0μm （圖4b）。

圖4 茄匍柄霉Fig.4 Stemphylium solani

寄主：番茄 （Lycopersicon esculentum Mill.），海南澄邁，F(xiàn)Q11030301；海南?？?，F(xiàn)Q10032505、FQ10032501；海南定安，F(xiàn)Q11032704。

辣椒（Capsicum annuum Linn.），海南?？?，LJ10012926、LJ09081501。

野茄子（Solanum coagulans Forsk.），海南澄邁，YQZ11020901、YQZ11040604。

蕹 菜 （Ipomoea reptans Poir.），海 南 澄 邁，KXC11033003、KXC11040602。

2.2.5 蔥匍柄霉葉斑病

癥狀：侵染葉片，發(fā)病初期病斑小，后逐漸變大，呈梭形或橢圓形，紫褐色，邊緣棕黃色5～60mm（圖5a）。后期病斑可愈合成長條形，其上密生黑色小點，并有同心輪紋，病部易折斷。病原菌：囊狀匍柄霉 ［Stemphyliu vesicarium （Wallr.） E.Simmons］［2，12］，分生孢子梗單生或叢生，圓柱狀，淡褐色，偶有分枝，直立，少數(shù)彎曲，膨大部黃褐色至深褐色，具1～6個隔膜，（32.5～67.5）μm×（5.0～7.5）μm，膨大部直徑6.5～9.5μm。分生孢子長方形或?qū)捖褕A形，淡褐色或深褐色，直或稍彎，表面具有細疣，具1～4個橫隔膜，1～2個連續(xù)的縱隔膜，通常在3個橫膈膜處明顯縊縮，（22.5～47.5）μm×（17.5～25.0）μm，臍部黑色，寬5.0～6.5μm（圖5b）。

寄主：蔥（Allium fistulosum Linn.），海南?？冢珻11041908。

圖5 蔥匍柄霉葉斑病Fig.5 Stemphyliumleaf spot of Allium fistulosum

2.2.6 萵苣匍柄霉葉斑病

癥狀：病斑葉兩面生，病斑近圓形，中央灰白色，邊緣暗褐色，后期中部灰褐色邊緣褐色，有同心輪紋（圖6a），病斑可連成片致葉片干枯，葉背面暗褐色，直徑1～8mm。

病原菌：萵苣匍柄霉（Stemphylium lactucae X.G.Zhang ＆ T.Y.Zhang）［2］，分生孢子梗單生，圓柱狀，淡褐色，直或稍彎曲，偶有分枝，光滑，具3～11個隔膜，（39.0～127.5）μm×（5.0～7.5）μm，膨大部直徑6.0～7.5μm。分生孢子單生，卵形，倒卵形，橢圓形或棍棒形，淡褐色，直或稍彎曲，表面光滑，具1～3個橫隔膜，0～2個縱或斜隔膜，橫隔膜處有明顯縊縮，（13.0～33.0）μm×（6.0～13.0）μm，臍部顏色深，7.0～9.0μm （圖6b）。

寄主：萵苣（Lactuca sativa Linn.），海南澄邁，SC11030803；海南屯昌，WJ11021803。

圖6 萵苣匍柄霉葉斑病Fig.6 Stemphyliumleaf spot on lettuce

2.2.7 菠菜匍柄霉葉斑病

癥狀：病斑葉兩面生，發(fā)病初期病斑近圓形，中央灰白色，邊緣黃褐綠色，具淺黃色暈圈，葉背褐色，直徑1～6mm（圖7a）。

病原菌：菠菜匍柄霉（Stemphylium spinaciae B.J.Li，Y.F.Zhou ＆ Y.L.Guo）［6］，分生孢子梗單生或2～5根簇生，淺青黃褐色至褐色，2～6個隔膜，多數(shù)1～3個，層出梗1～3個，偶分枝，（45.0～125.0）μm × （2.5～5.0）μm，膨大處深褐色，6～8μm。分生孢子單生，卵形、矩圓形，褐色至暗褐色，表面光滑，兩端鈍圓，具1～3個橫膈膜，1～3個縱、斜隔膜，在中間橫隔膜處明顯縊縮，（15.0～30.0）μm×（12.0～18.0）μm，臍部黑色，寬2.5～4.5μm（圖7b）。

寄主：菠菜（Spinacia oleracea Linn.），海南澄邁，BC11022202。

圖7 菠菜匍柄霉葉斑病Fig.7 Stemphliumleaf spot on spinach

3 討論

本次調(diào)查鑒定出匍柄霉菌7個種，即苦瓜匍柄霉、菜豆匍柄霉、番茄匍柄霉、茄匍柄霉、囊狀匍柄霉、萵苣匍柄霉和菠菜匍柄霉。其中茄匍柄霉寄主范圍廣，能侵染番茄、辣椒、野茄子、空心菜，而且在我們的鑒定過程中發(fā)現(xiàn)，引起番茄匍柄霉葉斑病的病原菌以茄匍柄霉為主，造成的危害也最為嚴重。

番茄匍柄霉葉斑病病菌的發(fā)病適溫是20～30℃，在相對濕度85%時，病害的潛育期為3～4d，發(fā)病后傳播極快，從發(fā)病到全株葉片感染只需2～3d［13］。該病害的癥狀與番茄早疫病的癥狀相似，加上種植戶對該病害的認識度不夠，往往錯過最佳的防治時期，易造成該病害的流行發(fā)生，例如澄邁永發(fā)一番茄種植戶誤將該病害認為是番茄早疫病，初期防治效果不佳，導(dǎo)致該病害在田間大發(fā)生。目前，正是海南冬季蔬菜生長關(guān)鍵季節(jié)，相關(guān)農(nóng)業(yè)部門應(yīng)開展對該病害的宣傳和防治培訓(xùn)等活動，讓更多的種植戶了解該病害的基本情況及嚴重性。

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