雷貝 曹杰 沈杰 趙蘭香 梁勝 孟慶剛 謝文暉 楊順芳

肺癌已連續(xù)多年是全世界癌癥死亡的主要原因[1]，近年來也已成為我國發(fā)病率和死亡率第一位的惡性腫瘤[2]。臨床上，腫瘤的轉(zhuǎn)移很少僅限于某個(gè)單臟器轉(zhuǎn)移，尤其肺癌的轉(zhuǎn)移：骨（35%-80%）、腎上腺（53.7%）、肝（22%）、腦（10%）[3-6]。雖說腦轉(zhuǎn)移所占比例不大，但是危害性極大，一旦患者出現(xiàn)腦轉(zhuǎn)移預(yù)后極差。肺癌腦轉(zhuǎn)移是肺癌患者終末期表現(xiàn)之一，生存期很短，未經(jīng)治療中位生存期僅1-3個(gè)月[7]。從肺癌組織脫落的腫瘤細(xì)胞不受肺毛細(xì)血管床的阻滯，可以直接進(jìn)入體循環(huán)，流向腦部，因?yàn)橛醒X屏障（blood-brain barrier, BBB）存在，能保護(hù)中樞神經(jīng)系統(tǒng)免受癌細(xì)胞侵襲，即使部分癌細(xì)胞進(jìn)入內(nèi)皮細(xì)胞層，BBB也能積極參與阻止轉(zhuǎn)移性細(xì)胞在大腦中溢出和擴(kuò)散[8]。但是仍無法完全阻止部分癌細(xì)胞向腦組織侵襲，導(dǎo)致肺癌腦轉(zhuǎn)移的發(fā)生。有20%-30%的肺癌患者在診斷時(shí)即已經(jīng)發(fā)生了腦轉(zhuǎn)移，40%-50%的肺癌患者在整個(gè)病程中會出現(xiàn)腦轉(zhuǎn)移[9,10]。但其具體轉(zhuǎn)移機(jī)制仍然未知，研究方法也較少，使得臨床治療療效很差，迫切需要進(jìn)一步的研究。肺癌腦轉(zhuǎn)移細(xì)胞及其實(shí)驗(yàn)動物模型的建立是研究肺癌腦轉(zhuǎn)移的重要基礎(chǔ)，但由于腦部的功能及結(jié)構(gòu)的特殊性、腦轉(zhuǎn)移檢測方法的有限性，使肺癌腦轉(zhuǎn)移模型的建立非常困難。CPAYang1是偶然發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生骨轉(zhuǎn)移同時(shí)伴發(fā)腦轉(zhuǎn)移的人肺腺癌細(xì)胞株，一次接種約有22%的裸小鼠產(chǎn)生腦轉(zhuǎn)移。借鑒以往應(yīng)用裸小鼠體內(nèi)反復(fù)接種可以篩選到某一器官特異性轉(zhuǎn)移亞株的方法[11-15]，本研究應(yīng)用慢病毒介導(dǎo)綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)染CPA-Yang1（green fluorescence protein, GFP）細(xì)胞，經(jīng)裸小鼠左心室接種，MRI顯像和腦組織解剖，檢出并取出腦轉(zhuǎn)移灶行細(xì)胞原代培養(yǎng)及病理檢測，體內(nèi)外反復(fù)篩選獲得較高潛能產(chǎn)生腦轉(zhuǎn)移的細(xì)胞亞株CPA-Yang1-BR，一次接種可有1/2的裸小鼠產(chǎn)生腦轉(zhuǎn)移。本研究改善了以往研究方法特異性差、成功率低、操作復(fù)雜等缺點(diǎn)，構(gòu)建了人肺腺癌腦轉(zhuǎn)移細(xì)胞及其動物模型，建立了檢出腦轉(zhuǎn)移灶的方法以及深入研究的實(shí)驗(yàn)平臺。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物 8周-10周齡、體重18 g-20 g的雄性BALB/c裸小鼠，由上海市西普爾-必凱實(shí)驗(yàn)動物有限公司提供，在SPF環(huán)境下飼養(yǎng)［實(shí)驗(yàn)動物使用許可證號：SYXK（滬）2008-0043］。

1.2 腫瘤細(xì)胞 本課題組自建可傳代中國人肺腺癌細(xì)胞株CPA-Yang1[11]（國家發(fā)明專利號：No.200810200983.8），取自首診伴發(fā)顳骨溶骨轉(zhuǎn)移人肺腺癌患者的心包積液培養(yǎng)而成。細(xì)胞培養(yǎng)用10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基，置于37oC、CO2體積分?jǐn)?shù)為5%的培養(yǎng)箱（Heraeus BB-16 CO2Incubators, Germany）中培養(yǎng)。血清及培養(yǎng)液購自美國Gibco公司（GibcoBRL, Carlsbad, CA, USA）。慢病毒介導(dǎo)綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)染CPA-Yang1細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)由上海吉?jiǎng)P基因化學(xué)技術(shù)有限公司完成（圖1）。

1.3 肺腺癌腦轉(zhuǎn)移模型的建立

1.3.1 左心室注射建模[12,13]取經(jīng)體外培養(yǎng)的對數(shù)生長期CPA-Yang1 GFP細(xì)胞，每只裸小鼠左心室接種7×105-8×105/0.1 mL細(xì)胞懸液。左心室注射2周后隔天稱重，體重低于16 g時(shí)嚴(yán)密觀察有否出現(xiàn)嗜睡、行動遲緩等癥狀或異樣體征。

1.3.2 動物影像學(xué)檢測 左心室接種造模7周-8周，當(dāng)觀察到裸小鼠全身嚴(yán)重衰竭、呼吸短促、體重減輕20%時(shí)，為裸小鼠腹腔注射硫噴妥鈉麻醉后行micro PET/CT顯像、X線、放射性核素、熒光（三合一）活體成像系統(tǒng)和小線圈MRI顯像。

1.3.2.1 Micro PET/CT scanners顯像（Inveon micro PET/CT,Siemens Preclinical Solution, Knoxville, TN, USA） 對荷CPA-Yang1細(xì)胞的裸鼠尾靜脈注射18F-FDG 0.2 mci/只，30 min后行micro CT和micro PET顯像。

1.3.2.2 三合一活體顯像系統(tǒng)［Kodak FX PRO in vivo Imaging System Multispectral (Kodak, USA)］ 顯像前2 h-3 h每只小鼠尾靜脈注射放射性核素99mTc-MDP 2mCi。圖像采集條件：excitation= 730 nm，emission= 790 nm；視野直徑為12 cm，熒光/X線/放射性核素曝光時(shí)間4/1/10 min；照相機(jī)設(shè)置為4×4像素單元；分別顯像后獲得熒光、X線和放射性核素融合圖像。

1.3.2.3 MRI with sense body采集（1.5 Tesla MRI unit, Philips Healthcare, The Netherlands） 小鼠MRI顯像無需注射造影劑，顯像序列為：T1WI、T2WI、FLAIR。記錄腦內(nèi)異常信號灶的數(shù)量、部位、大小等信息。

1.3.3 病理檢測 顯像完成后深麻醉處死裸小鼠，在無菌條件下取出異常眼球、完整腦組織，若肉眼能觀察到眼、腦組織存在綠色腫塊（GFP），則提示有腦轉(zhuǎn)移病灶并拍照做記錄；腦組織和部分病灶組織以10%甲醛溶液固定，行常規(guī)石蠟包埋切片，H&E染色，光學(xué)顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)移情況，另外部分病灶進(jìn)行體外細(xì)胞培養(yǎng)。

1.3.4 體內(nèi)外篩選肺腺癌腦轉(zhuǎn)移亞株 將腦轉(zhuǎn)移腫瘤組織，剪碎成1 mm-2 mm直徑的組織塊，放置于培養(yǎng)瓶中行原代細(xì)胞培養(yǎng)（培養(yǎng)條件同前），待細(xì)胞貼壁后增殖生長至約90%密度時(shí)按1:2比例傳代擴(kuò)增。將此體外擴(kuò)增腦轉(zhuǎn)移細(xì)胞再次經(jīng)左心室注射接種裸小鼠，重復(fù)體內(nèi)建模-體外培養(yǎng)增殖過程，經(jīng)4個(gè)循環(huán)后篩選出具有較高潛能腦轉(zhuǎn)移的肺腺癌細(xì)胞亞株。

1.4 各輪次細(xì)胞與其源細(xì)胞CPA-Yang1的比較

1.4.1 細(xì)胞倍增時(shí)間 各輪次細(xì)胞取1×104個(gè)細(xì)胞/每孔，接種于24孔板中，培養(yǎng)24 h后取3孔細(xì)胞計(jì)數(shù)并計(jì)算均值，按公式TD=t*[lg2/(lgNt-lgNo)]得到細(xì)胞倍增時(shí)間[16]，在各時(shí)間段，倍增時(shí)間是不同的，設(shè)定取24 h-48 h時(shí)間段；也可使用專業(yè)計(jì)算軟件http://www.doubling-time.com。CPA-Yang1細(xì)胞倍增時(shí)間見參考文獻(xiàn)[11]。

1.4.2 轉(zhuǎn)移率計(jì)算 綜合以下兩方面判斷腫瘤轉(zhuǎn)移率：①經(jīng)病理證實(shí)的每組裸鼠腦轉(zhuǎn)移率；②經(jīng)病理證實(shí)的每組腦轉(zhuǎn)移裸鼠的轉(zhuǎn)移部位數(shù)量。

2 結(jié)果

2.1 荷瘤小鼠的表現(xiàn) 約在左心室造模6周-7周后可發(fā)現(xiàn)模型鼠或出現(xiàn)嗜睡，或1只/2只眼睛失明，或頭骨鼓出，這些都提示有腦轉(zhuǎn)移存在，需密切關(guān)注小鼠的生命體征，防止過度衰竭而亡（圖2）。

2.2 模型鼠分子影像檢測18F-FDG micro PET/CT顯像，采集的圖像由計(jì)算機(jī)處理后分別獲得CT、PET和兩者融合的圖像（圖3），能發(fā)現(xiàn)腦部濃聚18F-FDG，但不能肯定是骨轉(zhuǎn)移還是腦轉(zhuǎn)移。小動物“三合一”活體成像系統(tǒng)在檢出腰椎轉(zhuǎn)移的同時(shí)發(fā)現(xiàn)頸椎以上腦部也有綠色熒光顯示病灶，提示可能伴發(fā)腦轉(zhuǎn)移（圖4）。帶小動物線圈的MRI顯像檢測荷瘤小鼠的腦內(nèi)異常信號病灶最為清晰（圖5）。

2.3 細(xì)胞生物學(xué)變化

2.3.1 細(xì)胞倍增時(shí)間 每輪次細(xì)胞倍增最快時(shí)間在24 h-48 h之間，1st、2nd、3rd、4th的倍增時(shí)間分別為：22.59 h、19.68 h、17.34 h和16.88 h。

2.3.2 體內(nèi)外篩選腦轉(zhuǎn)移細(xì)胞的形態(tài)變化 各細(xì)胞形態(tài)見圖6；早期（p3）及傳代半年時(shí)間（p34）的CPA-Yang1是人肺腺癌細(xì)胞株，分別見圖6A（a）和（b）。細(xì)胞呈多核，半貼壁、半懸浮狀。經(jīng)細(xì)胞體內(nèi)外4次篩選，細(xì)胞呈懸浮、圓形狀變化。

2.4 病理 CPA-Yang1腦轉(zhuǎn)移小鼠病理見圖7，同時(shí)可見轉(zhuǎn)移灶的周圍血管密度隨輪次上升而增加。

2.5 肺腺癌細(xì)胞各輪次左心室接種后腦轉(zhuǎn)移發(fā)生率 腦轉(zhuǎn)移細(xì)胞通過眼管侵襲視神經(jīng)使得眼球轉(zhuǎn)移-失明，發(fā)生率約為6%（2/33）。腦轉(zhuǎn)移發(fā)生率與輪次相關(guān)（表1）。根據(jù)病理和解剖，每只腦轉(zhuǎn)移小鼠僅發(fā)現(xiàn)腦轉(zhuǎn)移灶1個(gè)；腦轉(zhuǎn)移病灶大小1 mm2-8 mm2，有占據(jù)整個(gè)小腦的，也有位于大腦近嗅腦處的病灶。病灶分別分布在嗅腦2個(gè)，大腦4個(gè)，小腦3個(gè)，視神經(jīng)2個(gè)。

圖 1 慢病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染GFP后的CPA-Yang1細(xì)胞。A：倒置顯微鏡光鏡下的細(xì)胞；B：熒光倒置顯微鏡下的A圖細(xì)胞（×100）。Fig 1 CPA-Yang1 with lentiviral vector-mediated transfection of green fluorescence protein (GFP). A: light-field; B: green fuorescence (×100).

圖 2 荷CPA-Yang1 GFP細(xì)胞左心室造模5周-7周后腦轉(zhuǎn)移裸鼠。A：小鼠自造模第5周始嗜睡，活動日漸減少，進(jìn)食也下降，白色箭頭指向該小鼠額頭明顯鼓出；B：是A鼠解剖取出的腦組織，綠色箭頭所指部分疑嗅腦轉(zhuǎn)移灶；C：小鼠自造模第6周始，眼睛失明，進(jìn)食全靠觸須和嗅覺；D：第7周解剖模型鼠取腦組織，發(fā)現(xiàn)綠色（GFP）轉(zhuǎn)移灶（黃色箭頭）。Fig 2 The brain metastasis mice with CPA-Yang1 GFP cells by intracardiac inoculation after 5-7 weeks. A: Since fifth week, the mouse appeared lethargy, activity decreased, eating also fell, the white arrow indicated to the bulging forehead suspected brain metastasis; B: Autopsy of (A)mouse brain tissue, the green arrow indicated bigger lesion of olfactory bulb brain metastases; C: The mouse eyes blind gradually after the inoculation six weeks, eat all by tentacles and smell; D: Dissect out brain tissue in the mouse at seventh week; the yellow arrow indicated the small GFP lesion.

圖 3 荷CPA-Yang1裸鼠50天行18F-FDG micro PET/CT顯像（矢狀位），從左-右分別為CT、FDG和融合圖像。該裸鼠被檢出在下頜骨（桔黃色箭頭）、腰椎（紅色箭頭）骨轉(zhuǎn)移，同時(shí)伴有后腦部濃聚FDG（白色箭頭），但是骨/腦轉(zhuǎn)移無法辨別。Fig 3 18F-FDG micro PET/CT imagings detected the model mouse after inoculation 50 days (sagittal). CT, FDG and fusion image from left to right respectively. The mouse was found bone metastasis in mandibular (orange arrow) and lumbar (red arrow), but not sure bone/brain metastases as back of the head accumulated FDG (white arrow).

圖 4 三合一小動物活體成像系統(tǒng)疑該小鼠在胸椎轉(zhuǎn)移的同時(shí)伴有腦轉(zhuǎn)移可能。Fig 4 Small animal in vivo imaging system for fluorescence, radionuclide and X ray fused imaging suspected metastasis in thoracic vertebra associated with brain of the mouse.

圖 5 對CPA-Yang1細(xì)胞造模40天的裸鼠行帶小動物線圈的MRI顯像，結(jié)果清晰顯示小鼠小腦半球轉(zhuǎn)移（白色箭頭示）。Fig 5 MRI imaging of the mouse bearing CPA-Yang1 with small animals coil (sense body) resulted clear display cerebellar hemisphere lesion(white arrow).

表 1 腦轉(zhuǎn)移發(fā)生率Tab 1 The morbidity of brain metastasis

圖 6 CPA-Yang1細(xì)胞的相差倒置顯微鏡拍攝圖片。A：人肺腺癌細(xì)胞株（×100），（a）早期細(xì)胞形態(tài)（p3），多懸?。唬╞）傳代至（p34），多核； B：模型鼠首代腦轉(zhuǎn)移細(xì)胞爬出的狀況（×200）懸浮，成團(tuán)細(xì)胞較多；C：第2輪次腦轉(zhuǎn)移細(xì)胞，梭形細(xì)胞減少，圓形（懸浮）、多邊形細(xì)胞占多數(shù)（×100）；D：第3輪次細(xì)胞圓形占多數(shù)（懸?。?，更活躍（×100）；E：第4輪次懸浮細(xì)胞還是占據(jù)多數(shù)，同時(shí)梭形、多邊形也有一定比例（×200）。隨著輪次的變化，細(xì)胞呈小型圓形和懸浮狀變化。Fig 6 Morphology of the CPA-Yang1 cells under the contrast phase inverted microscope. A: Human lung adenocarcinoma cell line (×100), (a)third passage cells more suspension, (b) 34th passage cells suspension and more nucleus; B: First brain metastasis clone presented appearance of growth (×200); C: The brain metastasis clone of 2nd cycle, suspension, polygon cells in the majority; D: The clone of 3rd cycle, suspension cells in the majority (×200); E: Suspended cells of 4th cycle in the majority too (×200).

圖 7 小鼠病理 (HE, ×100)。A：正常腦組織；B、C、D：分別是第1、2、3輪次腦轉(zhuǎn)移灶，病灶血供隨輪次增加而增加；E：是第4輪次腦-眼轉(zhuǎn)移灶，左下角粉紅色為眼晶體；F：第4輪次腦轉(zhuǎn)移灶，細(xì)胞呈圓形分布。Fig 7 Histological features (HE, ×100). A: The brain of disease-free nude mouse; B, C, D is the lesions of brain metastases in 1st, 2nd, 3rd cycle respectively and diffusive blood supply increases with the cycles; E: The brain metastasis to eye, the lower left corner that pink color is an eye crystal; F: The brain metastasis lesion of 4th cycle, the cells presented circular distribution.

3 討論

研究肺癌腦轉(zhuǎn)移需要建立可靠的細(xì)胞及動物模型，是探討肺癌腦轉(zhuǎn)移機(jī)制和阻斷研究的前提。國內(nèi)外有關(guān)腫瘤腦轉(zhuǎn)移模型研究的報(bào)道很多，而對中國人肺腺癌患者轉(zhuǎn)移發(fā)生率同樣較高的腦轉(zhuǎn)移細(xì)胞和動物模型的研究卻少見報(bào)道。

不同的惡性腫瘤細(xì)胞具有不同的生物學(xué)特性，只有部分惡性腫瘤能產(chǎn)生腦轉(zhuǎn)移，腫瘤轉(zhuǎn)移模型的建立依賴于高致瘤能力的腫瘤細(xì)胞，目前研究結(jié)果提示能夠引起腫瘤發(fā)生、轉(zhuǎn)移的細(xì)胞只占腫瘤細(xì)胞中的少量，而大部分的腫瘤細(xì)胞并不具備轉(zhuǎn)移侵襲能力。即使對于同一惡性腫瘤而言，雖然大多是單克隆細(xì)胞起源，為同基因型，但其增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移特性并不完全相同。腫瘤細(xì)胞在轉(zhuǎn)化、生長過程中的自然篩選及其與機(jī)體免疫系統(tǒng)的相互作用，使不同腫瘤細(xì)胞亞群獲得了不同的生物學(xué)特性，從而使腫瘤細(xì)胞具備了生物學(xué)活性的異基因型[17]。在可以產(chǎn)生腦轉(zhuǎn)移的惡性腫瘤中，不是所有的腫瘤細(xì)胞都具有產(chǎn)生腦轉(zhuǎn)移的能力，只有特定的對腦組織具有特異性親和力的亞群才具有這種能力[18]。血腦屏障能保護(hù)患者避免腫瘤細(xì)胞輕易擴(kuò)散至腦組織，反之，能轉(zhuǎn)移到腦的腫瘤細(xì)胞必定具有非凡的侵襲潛能。1889年P(guān)aget提出的“種子與土壤”假設(shè)[19]，現(xiàn)代“種子與土壤”學(xué)說包括以下內(nèi)容：①腫瘤是生物學(xué)的異基因型，包含不同血管化、侵襲及轉(zhuǎn)移活性的亞群；②轉(zhuǎn)移的整個(gè)過程就是特異性轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞的篩選過程；③轉(zhuǎn)移的產(chǎn)生依賴于器官微環(huán)境與腫瘤細(xì)胞多方面的相互作用[20-22]。因此，腫瘤細(xì)胞株經(jīng)反復(fù)多代接種免疫缺陷型動物并行篩選后，此類亞群細(xì)胞得到有效的富集，靶組織轉(zhuǎn)移率漸進(jìn)升高。一些研究[23,24]報(bào)道通過手術(shù)肺葉原位嫁接，然后產(chǎn)生腦轉(zhuǎn)移及骨、腎上腺的轉(zhuǎn)移，這個(gè)方法無特異性且非常復(fù)雜，限制了其在腦轉(zhuǎn)移機(jī)制研究中的應(yīng)用。頸動脈注射腫瘤細(xì)胞造模方法[25]，由于一次性強(qiáng)制進(jìn)入腦組織的腫瘤細(xì)胞太多導(dǎo)致模型鼠生存期較短，不利于藥物療效觀察和向臨床醫(yī)學(xué)轉(zhuǎn)換研究，且不符合腦轉(zhuǎn)移生物學(xué)特性。左心室注射法很好地模擬了肺癌的血道轉(zhuǎn)移，即通過肺毛細(xì)血管床的腫瘤細(xì)胞及從形成的微轉(zhuǎn)移灶脫離的腫瘤細(xì)胞進(jìn)入左心室，隨血流流向腦部，才能產(chǎn)生腦轉(zhuǎn)移。左心室注射可以減少肺毛細(xì)血管床滯留并生長的腫瘤細(xì)胞數(shù)，增加穿過腦實(shí)質(zhì)的腫瘤細(xì)胞數(shù)，并延遲因肺癌而致的死亡，延長腫瘤細(xì)胞在腦內(nèi)增殖生長的時(shí)間，從而獲得更高的腦轉(zhuǎn)移形成的成功率[26-28]；我們所選用的造模細(xì)胞是自主篩選培養(yǎng)的人肺腺癌細(xì)胞CPA-Yang1。以往的裸鼠實(shí)驗(yàn)證實(shí)其首代致瘤，且尾靜脈、左心室種植后均產(chǎn)生溶骨性轉(zhuǎn)移，除了肺部約有10%結(jié)節(jié)外均未發(fā)現(xiàn)其它臟器轉(zhuǎn)移。我們已通過這種方法構(gòu)建了特異性骨轉(zhuǎn)移的細(xì)胞及其動物模型[11,29]，同樣很多學(xué)者也支持上述理論[15,30]。

因小動物腦轉(zhuǎn)移的檢測技術(shù)存在局限性，很難通過活體早期影像檢測到腦轉(zhuǎn)移灶。這是將CPA-Yang1轉(zhuǎn)染GFP的原因，一則可以借助熒光活體成像系統(tǒng)；二則在解剖取材時(shí)可以借以辨別是否轉(zhuǎn)移、轉(zhuǎn)移灶在何處。既往實(shí)驗(yàn)中的18F-FDG micro PET/CT顯像、X線、放射性核素、熒光（三合一）活體成像系統(tǒng)顯像均未明確檢測出小鼠腦轉(zhuǎn)移灶。分析原因可能是我們使用的放射性核素示蹤劑不是難以通過BBB，就是使腦內(nèi)的本底較高，如18F-FDG，造成腦病灶檢出靈敏度降低；其次受到設(shè)備分辨率的限制，對于小病灶的檢出有一定難度；期待將來能開發(fā)出靈敏度、特異性更高的示蹤劑。熒光顯像受細(xì)胞內(nèi)GFP的表達(dá)水平及組織衰減影響較大，且我們使用的三合一活體成像系統(tǒng)為平面顯像，沒有斷層或三維重建，對于深部組織的病變難以定位，無法鑒別腦轉(zhuǎn)移和顱骨轉(zhuǎn)移。實(shí)驗(yàn)中偶然發(fā)現(xiàn)小動物線圈MRI掃描能清晰發(fā)現(xiàn)腦轉(zhuǎn)移灶并解剖根據(jù)（GFP）捕捉病灶。于是，在以后的檢測裸鼠腦轉(zhuǎn)移時(shí)，行MRI（with sense body）掃描+解剖查看綠色病灶（GFP），明顯提高了腦轉(zhuǎn)移灶的檢出率，尤其是深部、較小腦組織轉(zhuǎn)移灶。但是由于分辨率等的設(shè)備技術(shù)問題，早期微小轉(zhuǎn)移灶的檢出還存在一定的難度，寄希望于更靈敏的micro MRI。

CPA-Yang1-BR人肺腺癌腦轉(zhuǎn)移細(xì)胞株及其動物模型的成功建立為進(jìn)一步篩選靶向腦轉(zhuǎn)移細(xì)胞奠定了基礎(chǔ)，也為系統(tǒng)研究肺癌的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和治療提供了一個(gè)良好的實(shí)驗(yàn)平臺，并將在今后的肺癌分子生物學(xué)的研究中發(fā)揮更大的作用。同時(shí)，小動物線圈MRI或micro MRI活體顯像是檢測小鼠肺癌腦轉(zhuǎn)移敏感、準(zhǔn)確、無創(chuàng)的顯像方法。