江蘇省東臺(tái)市畜牧獸醫(yī)站 王立鈞 徐國(guó)慶 韓書(shū)英

江蘇省東臺(tái)市農(nóng)業(yè)委員會(huì) 王長(zhǎng)青＊

揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院 王小波

低聚木糖（XOS）是一種功能性寡糖，能選擇性地促進(jìn)腸道有益微生物生長(zhǎng)，抑制病原微生物，提高機(jī)體免疫力 （徐麗萍和馬明穎，2011）。張菊等（2012）研究報(bào)道，地衣芽孢桿菌能調(diào)節(jié)腸道菌群平衡、增強(qiáng)動(dòng)物免疫力、提高生產(chǎn)性能，被視為最理想的微生物添加劑之一，在動(dòng)物生產(chǎn)中具有較好的應(yīng)用潛力。單一益生菌或寡糖在飼料中的應(yīng)用已日趨廣泛，而對(duì)于低聚木糖與地衣芽孢桿菌合生素在家禽生產(chǎn)中的應(yīng)用研究較少，其作用效果及機(jī)理還有待進(jìn)一步探討。本試驗(yàn)研究了低聚木糖與地衣芽孢桿菌合生素對(duì)東臺(tái)地方草雞生長(zhǎng)性能、免疫功能、腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響，并進(jìn)一步探索二者的協(xié)同作用機(jī)理，為尋求二者最佳配比組合提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 低聚木糖，由江蘇康維生物有限公司生產(chǎn)，含低聚木糖35%；地衣芽孢桿菌，由山東省健牧生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，地衣芽孢桿菌≥1.0×1010cfu/g。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及日糧 試驗(yàn)動(dòng)物選用40日齡東臺(tái)地方草雞，基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼養(yǎng)管理 選擇300只40日齡東臺(tái)地方草雞，隨機(jī)分為5個(gè)組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)（籠）15只雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.015%低聚木糖、0.25%地衣芽孢桿菌、0.0075%低聚木糖+0.125%地衣芽孢桿菌、0.01125%低聚木糖+0.1875%地衣芽孢桿菌。試驗(yàn)期35 d（41～75日齡）。試驗(yàn)期間，所有試驗(yàn)條件一致，半開(kāi)放雞舍，層疊式籠養(yǎng)，專(zhuān)人負(fù)責(zé)，自由采食與飲水。每天定時(shí)喂料。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能 在試驗(yàn)開(kāi)始和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)分別以重復(fù)為單位，早晨空腹稱(chēng)取試驗(yàn)雞的重量，并記錄試驗(yàn)雞平均日采食量、日增重，計(jì)算飼料報(bào)酬。

1.4.2 免疫器官指數(shù) 試驗(yàn)期末，每組分別取5只雞，稱(chēng)重后頸部放血致死，采集5只雞胸腺、脾臟和法氏囊進(jìn)行稱(chēng)重，計(jì)算胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)：

胸腺指數(shù)=胸腺重量（mg）/雞體重（g）；

脾臟指數(shù)=脾臟重量（mg）/雞體重（g）；

法氏囊指數(shù)=法氏囊重量（mg）/雞體重（g）。

1.4.3 小腸形態(tài)學(xué)指標(biāo) 試驗(yàn)期末，每組分別取5只雞，頸部放血致死，采集卵黃蒂前1 cm空腸段，10%福爾馬林固定24 h后制作石蠟切片，用Leica顯微圖像分析軟件測(cè)定空腸絨毛長(zhǎng)度、隱窩深度、腸黏膜厚度。

V/C值=空腸絨毛長(zhǎng)度/隱窩深度。

1.5 數(shù)據(jù)處理 采用SPSS 17.0軟件中的單因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。均值的多重比較采用LSD法進(jìn)行，P＜0.05為差異顯著，P＜0.01為差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 低聚木糖與地衣芽孢桿菌合生素對(duì)東臺(tái)地方草雞生長(zhǎng)性能的影響 由表2可知，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組只均采食量分別比對(duì)照組顯著降低0.82%、0.74%、1.29%、1.11%，其中試驗(yàn)Ⅲ、Ⅳ組與對(duì)照組差異極顯著（P＜0.01）。試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組平均日增重分別比對(duì)照組提高5.66%、4.37%、11.41%、11.84%（P＜0.05）；料重比則分別顯著降低6.95%、6.28%、12.56%、12.78%，其中試驗(yàn)Ⅲ、Ⅳ組與對(duì)照組差異極顯著（P＜0.01）。

表2 低聚木糖與地衣芽孢桿菌合生素對(duì)東臺(tái)地方草雞生長(zhǎng)性能的影響

2.2 低聚木糖與地衣芽孢桿菌合生素對(duì)東臺(tái)地方草雞免疫性能的影響 由表3可知，各試驗(yàn)組脾臟指數(shù)、法氏囊指數(shù)均高于對(duì)照組，其中試驗(yàn)Ⅰ組脾臟指數(shù)比對(duì)照組高30.12%，試驗(yàn)Ⅱ組法氏囊指數(shù)比對(duì)照組高25.52%，說(shuō)明試驗(yàn)組脾臟指數(shù)、法氏囊指數(shù)均有提高的趨勢(shì)，但差異不顯著（P＞0.05）。添加低聚木糖與地衣芽孢桿菌對(duì)胸腺指數(shù)的影響不一致。

表3 低聚木糖與地衣芽孢桿菌合生素對(duì)東臺(tái)地方草雞免疫性能的影響

2.3 低聚木糖與地衣芽孢桿菌合生素對(duì)東臺(tái)地方草雞空腸形態(tài)的影響 由表4可知，各試驗(yàn)組空腸絨毛長(zhǎng)度均高于對(duì)照組，其中試驗(yàn)Ⅳ組空腸絨毛長(zhǎng)度顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。試驗(yàn)組腸黏膜厚度均高于對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05）。試驗(yàn)組隱窩深度均略淺于對(duì)照組，差異不顯著 （P＞0.05）。各試驗(yàn)組V/C值均高于對(duì)照組（P＞0.05）。

表4 低聚木糖與地衣芽孢桿菌合生素對(duì)東臺(tái)地方草雞空腸形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

3 討論

3.1 低聚木糖與地衣芽孢桿菌合生素對(duì)東臺(tái)地方草雞生長(zhǎng)性能的影響 司梅霞等（2008）研究表明，在飼料中添加低聚木糖能提高21～42 d淮南麻雞的體重（P ＞ 0.05），降低料重比（P ＜ 0.01）。王俊峰等（2010）在肉雞日糧中添加合生素500 g/t，發(fā)現(xiàn)其顯著降低了肉雞采食量和試驗(yàn)前期料重比。楊會(huì)玲等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，在肉雞基礎(chǔ)日糧中添加不同類(lèi)型的合生素，均能提高肉雞的平均日增重和平均日采食量。Awad等（2009）研究報(bào)道，在肉仔雞基礎(chǔ)日糧中添加合生素500 g/t，肉仔雞的體重、平均日增重、屠宰率和飼料轉(zhuǎn)化率均顯著高于對(duì)照組和抗生素添加組。卜祥斌等（2006）研究表明，添加低聚木糖和地衣芽孢桿菌組肉雞的生產(chǎn)性能均優(yōu)于對(duì)照組，其中混合添加沸石、低聚木糖組和混合添加沸石、低聚木糖、地衣芽孢桿菌組日增重分別比對(duì)照組高出3.2%和3.4%，料重比分別比對(duì)照組降低3.2%和5.4%。本試驗(yàn)表明，低聚木糖、地衣芽孢桿菌單獨(dú)或復(fù)合添加，均能顯著降低東臺(tái)地方草雞的只均采食量、料重比，提高雞的平均日增重，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組平均日增重分別比對(duì)照組提高 5.66%、4.37%、11.41%、11.84%（P＜0.05），料重比則分別降低6.95%、6.28%、12.56%、12.78%（P ＜0.05或 P＜ 0.01），其中添加合生素的試驗(yàn)Ⅲ、Ⅳ組只均采食量、料重比與對(duì)照組之間差異極顯著。分析原因，可能是低聚木糖選擇性地促進(jìn)大腸中雙歧桿菌的增殖，使腸道微生態(tài)環(huán)境得到改善，同時(shí)雙歧桿菌在生長(zhǎng)代謝過(guò)程中產(chǎn)生各種酶類(lèi)、有機(jī)酸、細(xì)菌素、維生素、煙酸和乙酸，對(duì)腸道致病菌起到拮抗作用，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收；地衣芽孢桿菌消耗腸道內(nèi)大量游離氧，維持腸道厭氧環(huán)境，改善雙歧桿菌等厭氧菌的生長(zhǎng)環(huán)境，阻止有害菌的生長(zhǎng)，并對(duì)致病菌有拮抗作用。二者以合生素形式添加時(shí)產(chǎn)生的協(xié)同作用，可能使其對(duì)草雞生長(zhǎng)性能的影響更加顯著。

3.2 低聚木糖與地衣芽孢桿菌合生素對(duì)東臺(tái)地方草雞免疫器官發(fā)育的影響 胸腺、脾臟、法氏囊是禽類(lèi)的主要免疫器官，它們的發(fā)育狀態(tài)及其機(jī)能強(qiáng)弱決定著機(jī)體的免疫水平。李路勝等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，在肉雜雞基礎(chǔ)日糧中添加合生素0.1%～0.2%可以使34 d肉雜雞脾指數(shù)和法氏囊指數(shù)有升高趨勢(shì)。王俊峰等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，肉雞日糧中添加合生素對(duì)42 d肉雞的胸腺和脾臟的發(fā)育有一定的促進(jìn)作用，且降低了空腸中大腸桿菌的數(shù)量，提高了乳酸桿菌的數(shù)量。本試驗(yàn)中各添加組脾臟指數(shù)、法氏囊指數(shù)均高于對(duì)照組（P＞0.05），其中試驗(yàn)Ⅰ組脾臟指數(shù)比對(duì)照組高30.12%，試驗(yàn)Ⅱ組法氏囊指數(shù)比對(duì)照組高25.52%。綜上可以推測(cè)，飼料中添加低聚木糖和地衣芽孢桿菌可能在一定程度上誘生動(dòng)物免疫系統(tǒng)中的多種細(xì)胞因子，從而提高了草雞血清中免疫球蛋白含量，使脾臟、法氏囊等免疫器官的相對(duì)重量呈現(xiàn)增加趨勢(shì)，促進(jìn)干擾素的生成，激活巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞，進(jìn)而使草雞整體免疫機(jī)能增強(qiáng)。本試驗(yàn)結(jié)果差異不顯著，可能是組內(nèi)差異較大造成的。

3.3 低聚木糖與地衣芽孢桿菌合生素對(duì)東臺(tái)地方雞空腸形態(tài)的影響 Awad等（2009）研究發(fā)現(xiàn)，合生素添加組肉仔雞的小腸絨毛高度和隱窩深度等指標(biāo)均要優(yōu)于對(duì)照組。李琰（2010）研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加益生菌可使雛雞21日齡空腸絨毛和盲腸絨毛高度較對(duì)照組顯著增長(zhǎng)，空腸和盲腸腸壁厚度較對(duì)照組有不同程度增厚。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，在東臺(tái)地方草雞飼糧中添加低聚木糖、地衣芽孢桿菌能夠促進(jìn)空腸絨毛生長(zhǎng)，隱窩變淺，黏膜增厚。分析其原因，這可能是由于地衣芽孢桿菌進(jìn)入腸道后定植增殖，低聚木糖選擇性促進(jìn)有益菌生長(zhǎng)，抑制有害菌，并且益生菌代謝產(chǎn)物可被腸黏膜細(xì)胞吸收，從而促進(jìn)腸上皮細(xì)胞生長(zhǎng)，改變腸道黏膜結(jié)構(gòu)，使雞腸道內(nèi)隱窩變淺、絨毛變長(zhǎng)，增大了腸黏膜的表面積，增強(qiáng)了腸道的吸收功能。V/C值綜合反映小腸的功能狀況。比值上升，表明黏膜改善，消化吸收功能增強(qiáng)，生長(zhǎng)發(fā)育加快。本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加組V/C值有提高的趨勢(shì)。

4 小結(jié)

本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼料中添加低聚木糖與地衣芽孢桿菌合生素能顯著提高東臺(tái)地方草雞生長(zhǎng)性能，有提高脾臟指數(shù)、法氏囊指數(shù)、空腸絨毛高度、V/C值，增加腸黏膜厚度，改善腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的趨勢(shì)。使用效果以0.01125%低聚木糖+0.1875%地衣芽孢桿菌合生素組最佳。而兩種物質(zhì)的混合使用有可能提高腸道中益生菌的存活率，抑制有害菌增殖，增強(qiáng)機(jī)體免疫能力，提高消化酶的活性，其作用可能具有可加性或者是協(xié)同性。

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