蔡祖勛

Survivin抗體及其基因表達(dá)在肺癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值

蔡祖勛

目的 探討survivin抗體及其基因表達(dá)在肺癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值。方法 2013年1月至2013年5月期間, 本院診治的24例肺癌患者(觀察組), 以及24例健康者(對(duì)照組), 作為研究對(duì)象, 采集外周血液標(biāo)本, 通過(guò)ELISA法、RT-PCR法, 檢測(cè)兩組血清中survivin抗體及survivin mRNA表達(dá)水平。結(jié)果 與對(duì)照組相比, 觀察組血清中survivin抗體及survivin mRNA表達(dá)水平均明顯升高, P＜0.05, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義, 并且血清survivin抗體表達(dá)與survivin mRNA表達(dá)呈正相關(guān)。結(jié)論 survivin抗體及其基因表達(dá)檢測(cè)有利于肺癌的臨床診斷, 值得臨床推廣。

Survivin抗體；基因表達(dá)；肺癌；診斷

肺癌作為臨床上比較常見(jiàn)的惡性腫瘤, 近年來(lái), 其發(fā)病率呈逐年增高趨勢(shì), 嚴(yán)重影響著患者的生活質(zhì)量, 甚至危及生命。所以, 對(duì)于肺癌患者, 早期診斷、早期治療, 具有非常重要的臨床意義。本研究中, 2013年1月至2013年5月期間, 河南省胸科醫(yī)院胸外一科診治的24例肺癌患者(觀察組), 以及24例健康者(對(duì)照組), 通過(guò)ELISA法、RT-PCR法,檢測(cè)兩組血清中survivin抗體及survivin mRNA表達(dá)水平, 現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下, 以供臨床參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2013年1月至2013年5月期間, 本院診治的24例肺癌患者(觀察組), 以及24例健康者(對(duì)照組), 作為研究對(duì)象。24例肺癌患者中, 10例小細(xì)胞肺癌、5例鱗癌、4例腺癌, 以及5例大細(xì)胞癌。24例對(duì)照組中, 男15例、女9例, 年齡49.0~70.0, 平均(57.0±6.0)歲；24例觀察組中,男16例、女8例, 年齡48.0~69.0歲, 平均(56.0±6.5)歲。兩組性別、年齡比較, 差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義, P＞0.05, 具有可比性。

1.2 標(biāo)本檢測(cè)方法

1.2.1 血清survivin抗體檢測(cè)方法 采集兩組外周血液標(biāo)本約2ml, 促凝膠促凝。通過(guò)ELISA法, survivin抗體試劑盒購(gòu)自Assay Design公司, 嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書操作, 應(yīng)用特異性單克隆抗體包被反應(yīng)板, 加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)標(biāo)本, 進(jìn)行孵育, 隨后計(jì)入兔多克隆抗體及辣根過(guò)氧化物酶的羊抗兔IgG抗體, 檢測(cè)血清survivin抗體。

1.2.2 survivin mRNA表達(dá)水平檢測(cè)方法 采集兩組靜脈血約2ml, 枸櫞酸鈉抗凝處理, 淋巴細(xì)胞分離液處理有核細(xì)胞, 應(yīng)用生理鹽水洗滌3次, -80℃冰箱保存, 待檢。通過(guò)RT-PCR法, 檢測(cè)survivin mRNA表達(dá)水平。應(yīng)用Trizol試劑提取細(xì)胞總RNA, 通過(guò)分光光度法, 檢測(cè)RNA濃度和純度, 通過(guò)1%瓊脂糖電泳法, 鑒定RNA完整性。以2ug總RNA作為逆轉(zhuǎn)錄模板, 以O(shè)ligo(dT)12作為引物,在MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶作用下, 合成單鏈cDNA。反應(yīng)條件為94℃作用下, 預(yù)變性4min, 循環(huán)30個(gè)后, 在72℃作用下,終延伸7min。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件, 進(jìn)行分析和處理, 計(jì)數(shù)資料率的比較, 采用卡方檢驗(yàn), 采用Pearson's相關(guān)性分析法, 進(jìn)行相關(guān)性分析, P＜0.05, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組survivin抗體及survivin mRNA表達(dá)檢測(cè)結(jié)果比較 與對(duì)照組相比, 觀察組survivin抗體、survivin mRNA表達(dá)陽(yáng)性率均明顯升高, P＜0.05, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義, 詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 兩組survivin抗體及survivin mRNA表達(dá)檢測(cè)結(jié)果比較［例(%)］

2.2 survivin抗體與survivin mRNA表達(dá)的相關(guān)性分析 肺癌患者血清survivin抗體與survivin mRNA表達(dá)呈正相關(guān)性,相對(duì)系數(shù)為0.371, P＜0.05。

3 討論

惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中, 必然存在細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡的平衡紊亂狀況。survivin作為細(xì)胞凋亡抑制因子家族中的一員, 在細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期的基因調(diào)控方面,發(fā)揮著重要的臨床作用［1］。正常情況下, survivin在胚胎及胎兒組織, 分化的睪丸、胸腺及胎盤組織中, 以及多數(shù)腫瘤組織中表達(dá)。有報(bào)道稱, 肺腺癌患者的腫瘤病灶組織中, survivin蛋白表達(dá)陽(yáng)性率為53.6%, 并且survivin蛋白表達(dá)與TNM病理分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、p53蛋白過(guò)表達(dá)呈正相關(guān)性,所以, survivin蛋白表達(dá)證實(shí)腫瘤病灶的侵襲性較強(qiáng), 預(yù)后相對(duì)較差［2］。

在非小細(xì)胞肺癌患者中, survivin mRNA表達(dá)陽(yáng)性率越高, 其細(xì)胞分化程度相對(duì)較低, 抑制細(xì)胞凋亡的作用較強(qiáng),患者的預(yù)后效果相對(duì)較差。在小細(xì)胞肺癌患者中, survivin蛋白表達(dá)明顯升高, 這可能與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期有關(guān)［3］。所以, survivin表達(dá)說(shuō)明正常組織存在癌變的可能, 所以, 對(duì)于肺癌患者, 應(yīng)選擇survivin抗體及其基因表達(dá)的檢測(cè)方法,進(jìn)行早期診斷、早期治療。

目前, 腫瘤檢測(cè)標(biāo)志物包括腫瘤特異性標(biāo)志物、組織特異性標(biāo)志物, 本研究中, 與對(duì)照組相比, 觀察組血清中survivin抗體及survivin mRNA表達(dá)水平均明顯升高, 并且血清survivin抗體表達(dá)與survivin mRNA表達(dá)呈正相關(guān)?？偠灾? survivin抗體及其基因表達(dá)作為目前肺癌診斷的理想檢測(cè)方法, 有利于提高肺癌的臨床診斷率, 值得臨床廣泛推廣。

［1］ 吳偉杰, 王良旭. Survivin基因與肺癌臨床關(guān)系的研究進(jìn)展. 現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué), 2012,24(4):475.

［2］ 王紀(jì)敏, 血清survivin抗體及基因表達(dá)檢測(cè)對(duì)肺癌的診斷價(jià)值.山東醫(yī)藥, 2009,49(45):39.

［3］ 丁衛(wèi)民, 支氣管灌洗液survivin基因檢測(cè)在肺癌診斷中的價(jià)值.結(jié)核病與胸部腫瘤, 2012,4(2):99.

450000 河南省胸科醫(yī)院胸外一科