王利民 劉玉民 尹志明 武英 盛清凱*

（ ①山東省農(nóng)科院技信息工程技術(shù)研究中心 濟(jì)南 250100 ②.濟(jì)南科旺牧業(yè)發(fā)展有限公司 濟(jì)南③山東省農(nóng)科院畜牧獸醫(yī)研究所 濟(jì)南 ③山東省畜禽疫病防治與繁育重點試驗室 濟(jì)南）

豬糞尿污染已成為嚴(yán)重的社會公害。目前已發(fā)現(xiàn)豬糞尿中惡臭物質(zhì)160多種，其中主要為氨氣、硫化氫等幾種。氨氣主要來源于兩個方面，其一為動物機(jī)體產(chǎn)生，其二為糞污在體外發(fā)酵產(chǎn)生。為了減少氨氣的產(chǎn)生，人們常在日糧中添加有益菌、低聚糖、酶制劑或配制氨基酸平衡日糧等。糞污中殘留的有益菌等功能物質(zhì)對糞污體外發(fā)酵產(chǎn)氨的影響鮮見報道。本文探討豬糞中添加色氨酸、酪蛋白以及果聚糖對不同豬糞產(chǎn)氨的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 將80頭平均體重約為50.0kg的杜長大三元雜交商品豬，隨機(jī)分為對照組和試驗組，每組4個重復(fù)，每重復(fù)10頭豬，兩組分別飼喂基礎(chǔ)日糧及添加0.2%納豆芽孢桿菌的試驗日糧，每組兩個重復(fù)。對照組和試驗組均為水泥地面飼養(yǎng)。納豆芽孢桿菌含量為109CFU/g。

1.2 試驗設(shè)計 6周后試驗結(jié)束。對照組和試驗組每組隨機(jī)選取8頭豬，直腸無菌取樣。將每頭豬的新鮮糞便280g懸浮在無菌厭氧的礦物質(zhì)介質(zhì)中質(zhì)(每升含5.0gNaHCO3、0.9gNaCl、0.9g(NH4)2SO4、0.45gKH2PO4、0.45g K2HPO4.3H2O、0.03g CaC12.2H2O、0.02gMgCl2、0.01g MnSO4.4H2O、0.01gCoCl2.6H2O、0.01gFeSO4.7H2O、1.0g半胱氨酸濃度為10%溶液)。將這種懸浮液轉(zhuǎn)移到無菌充滿CO2的塑料袋中，拍打5min后6層滅菌紗布過濾以除去粗微粒物質(zhì)。將10%(W/V)糞水厭氧分裝于27個150ml無菌瓶中，每瓶100ml。每3瓶為1組，共分為9組。將9組瓶按3×3拉丁方試驗設(shè)計，分別加入不同劑量的L-色氨酸、果聚糖和酪蛋白。38℃厭氧下分別培養(yǎng)24h。培養(yǎng)結(jié)束后從瓶中各取出20ml溶液，-18℃冰箱冷凍保存，用于氨、總氮的測定。

表1 豬糞中各物質(zhì)添加量 (%)

1.3 測試指標(biāo)及方法 氨，納氏比色法測定；總氮，凱氏定氮法測定。

1.4 數(shù)據(jù)測定 試驗數(shù)據(jù)采用Excel 2003和SAS進(jìn)行方差分析和Duncan′s多重比較。數(shù)據(jù)為平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤。

2 試驗結(jié)果與分析

2.1 不同殘留組分對發(fā)酵液中氨和氮的影響

對照組中氨濃度極顯著高于試驗組(P<0.01)，總氮含量無差異，表明豬糞中添加外源物質(zhì)對豬糞產(chǎn)氨存在影響(表2)。

表2 不同殘留組分對發(fā)酵液中氨和氮含量的影響 (mg/kg、%)

2.2 不同殘留組分對發(fā)酵液中氨、氮影響數(shù)值極差分析

表3 不同殘留組分對發(fā)酵液中氨影響數(shù)值極差分析

表3中對照組中酪蛋白R值極顯著高于果聚糖和色氨酸(P<0.01)，果聚糖和色氨酸二者無顯著差異；試驗組中色氨酸R值極顯著高于酪蛋白和果聚糖(P<0.01)，色氨酸和果聚糖二者無顯著影響，結(jié)果表明色氨酸、酪蛋白和果聚糖對不同豬糞影響不同。

表4 不同殘留組分對發(fā)酵液中總氮影響數(shù)值極差分析

表4中對照組和試驗組中色氨酸、酪蛋白、果聚糖的R值彼此皆無顯著差異，表明外加色氨酸、酪蛋白和果聚糖對不同豬糞總氮含量影響無顯著差異。

3 討論

養(yǎng)豬過程中產(chǎn)生的大量氨氣不僅嚴(yán)重影響了豬的生長發(fā)育，也使豬場附近居民受到危害?？諝庵械陌睔馕廴臼撬嵊晷纬傻闹匾蛑?，而畜禽生產(chǎn)已經(jīng)成為全球最大的氨氣污染來源。益生菌作為一種無毒、無殘留、無抗藥性的飼料添加劑，具有調(diào)節(jié)腸道菌群平衡、降低排泄物氨氣散發(fā)量等諸多功能。為了改善養(yǎng)殖環(huán)境，日糧中常添加益生菌。納豆芽孢桿菌作為一種益生菌，可以添加于豬日糧中(耿春銀等，2010)，也可以作為一種發(fā)酵床菌種使用(盛清凱等，2009)，減少氨的產(chǎn)生。本研究用含有納豆芽孢桿菌的日糧喂豬，檢測不同物質(zhì)對該豬糞發(fā)酵液產(chǎn)氨的影響，結(jié)果表明該豬糞發(fā)酵液產(chǎn)氨能力顯著降低。該結(jié)果與楊鋒(2011)試驗結(jié)果相似，差異之處在于楊鋒(2011)在豬糞混合液中添加枯草芽孢桿菌，本研究將納豆芽孢桿菌添加于日糧中。

為了減少糞氮的污染，人們常常配制氨基酸平衡日糧，以降低日糧蛋白質(zhì)含量(元娜等，2008)。本試驗中酪蛋白對照組豬糞發(fā)酵液產(chǎn)氨影響大，結(jié)果與孫國榮等(2011)結(jié)果相似。外源色氨酸對豬糞發(fā)酵液產(chǎn)氨的影響相關(guān)報道，較為缺乏。本試驗中外源色氨酸對豬糞發(fā)酵液產(chǎn)氨影響大，具體原因是否與豬糞中納豆芽孢桿菌有關(guān)，尚需進(jìn)一步研究。

果聚糖作為一種益生元，通過促進(jìn)腸道內(nèi)有益菌的增殖而發(fā)揮腸道菌群的調(diào)節(jié)功能，從而提高動物的生產(chǎn)性能(顧憲紅等，2004)。但豬糞中添加果聚糖豬糞發(fā)酵液產(chǎn)氨影響的研究報道較少。李彩燕(2009)認(rèn)為在豬糞發(fā)酵液中添加果聚糖，可以降低發(fā)酵液中糞臭素的濃度和相對產(chǎn)率，影響色氨酸的代謝，對于氨的代謝尚不清楚。本研究結(jié)果首次表明豬糞中添加外源果聚糖，對豬糞發(fā)酵液厭氧發(fā)酵產(chǎn)氨無影響。

4 結(jié)論

飼喂納豆芽孢桿菌日糧可以降低豬糞厭氧發(fā)酵產(chǎn)氨能力。酪蛋白、色氨酸和果聚糖三種物質(zhì)對豬糞產(chǎn)氨能力影響不同。

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