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        舉重運動員免疫與內(nèi)分泌網(wǎng)絡及機能評定指標體系的結構研究

        2013-08-15 12:17:14洪長清謝敏豪
        湖北體育科技 2013年1期

        洪長清,謝敏豪,嚴 翊

        運動員機能評定具有多維性?!吧窠?jīng)—免疫—內(nèi)分泌”網(wǎng)絡的存在使得運動員免疫、內(nèi)分泌機能評定可能具有綜合性、復雜性甚至交叉性。對運動員神經(jīng)—免疫—內(nèi)分泌網(wǎng)絡系統(tǒng)的結構和維度進行研究有利于運動員機能評定的全面性準確性,也有利于實際工作中評定指標的篩選。因子分析(factor analysis)主要用于發(fā)現(xiàn)一組變量內(nèi)部關聯(lián)結構,并且用較少相對獨立的指標反映較多指標所包含的信息。其具體的目標有三個:總結變量間的相關模式;將大量的觀測變量縮減為少量因素;通過觀測變量對潛在過程提供操作定義[1]。本研究根據(jù)內(nèi)分泌學及免疫學的相關基礎理論結合舉重運動員免疫、內(nèi)分泌機能評定的實際,在較大范圍指標測試的基礎上,通過主成分和因子分析的方法,探討變量間的相關模式和維度,為探討舉重運動員神經(jīng)-免疫-內(nèi)分泌網(wǎng)絡的結構和運動訓練的機能綜合評定提供依據(jù)。

        1 研究對象與方法

        1.1 對象

        河北省舉重運動隊25名優(yōu)秀男子舉重運動員,均為二級以上,年齡18.3±1.2歲,身高169±4厘米,體重78±11公斤,系統(tǒng)專項訓練年限3±1年。

        1.2 指標測試與數(shù)據(jù)庫建立

        運動員進行為期5周的冬訓。于訓練前、訓練每周共6次重復對運動員應激和生殖內(nèi)分泌(血清睪酮、皮質醇、泌乳素、黃體生成素、卵泡刺激素)、免疫細胞(外周血CD4+、CD8+、CD14+、CD16+、CD56+、HLA-DR+)、免疫分子(外周血IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ的 mRNA)等共15個指標進行檢測。內(nèi)分泌指標測定采用DPC公司immulite型全自動化學發(fā)光分析儀及相關試劑盒完成。免疫細胞采用Becton Dickson公司產(chǎn)FACS420型熒光激活細胞分選儀完成,相關鼠抗人單克隆抗體由美國Zy med公司提供。全血細胞因子mRNA采用實時熒光定量PCR(澳大利亞Cor bett公司,Rotor-Gene RG 3000型PCR儀)方法測定(注:由于本研究主要側重于指標的統(tǒng)計分析,故不詳述指標測定方法,指標詳細測定方法見本文作者本課題研究系列的相關文獻[2,3])。以所測定指標有效數(shù)據(jù)為基礎建立數(shù)據(jù)庫供統(tǒng)計和分析。

        1.3 數(shù)據(jù)處理方法

        調用SPSS13.0的data reduction factor程序,對數(shù)據(jù)進行主成分分析和因子分析,并計算因子和指標的權重。各成分的權重計算及各指標在各因子中的權重計算方法依據(jù)有關文獻[8]。

        2 結果與分析

        2.1 運動員免疫、內(nèi)分泌機能指標的主成分

        通過主成分和因子分析得出Bartlett′s值為105,P等于0.000,可以進行因子分析。KMO檢驗的值為0.57,接近0.6,因此可以認為因子分析結果被接受的可能性較大。由表1可知,根據(jù)特征值與方差確定6個主成分,累計方差百分比達到60%,6 個 因 子 依 次 分 別解 釋 總 方 差 的12.4%、11.3%、9.9%、9.2%、9.1%、8.3%,可見舉重運動員免疫與內(nèi)分泌機能評定具有多維性,并且各維度具有的權重比較接近。

        表1 解釋總方差表(N=150)

        2.2 因子構成和指標載荷

        表2顯示正交旋轉后因子載荷矩陣和各指標在各因子中的載荷情況,以及根據(jù)載荷絕對值的大小確定的指標因子歸屬。由表可知,如果以載荷絕對值大于或等于0.5為入選最低標準,則因子1主要由泌乳素(Prolactin,Prl)、睪酮(T,Testosterone)、皮質醇(C,Cortisol)構成,顯然屬內(nèi)分泌類。由于Prl和C均與應激有關[3],故因子1可以命名為“應激內(nèi)分泌”。而值得注意的是,睪酮與其固有的調節(jié)因素黃體生成素(Luteinizing hor mone,L H)、卵泡刺激素(Follicle stimulating hor mone,F(xiàn)SH)發(fā)生了“分離”,而歸屬了應激內(nèi)分泌,提示在運動訓練中影響睪酮分泌的因素主要是應激而不是LH、FSH,這與一般情況下睪酮分泌的調節(jié)具有明顯的不同。

        因子2主要由IFN-γ、IL-4構成。IFN-γ是 Th1類免疫細胞分泌的細胞因子,IL-4是Th2類免疫細胞分泌的細胞因子,Th1/Th2構成機體重要的免疫平衡,因此IFN-γ、IL-4構成的因子可以命名為“Th平衡”。在“Th平衡”中,主要成分IFN-γ、IL-4的載荷均為正值。根據(jù)免疫學的理論,Th1/Th2平衡在免疫應答過程中呈相互拮抗[7],拮抗關系表現(xiàn)為“此消彼長”現(xiàn)象,往往通過負相關體現(xiàn),但本研究中二者的關系并不呈負相關,而是正相關,表現(xiàn)出一定的平衡關系(正相關性),這一點與理論或臨床上的表現(xiàn)不同,提示了運動刺激條件下免疫應答的特殊性。

        因子3主要由CD14+、IL-10、CD16+構成,是二個免疫細胞和一個免疫分子混合構成的因子。膜表達CD14分子的CD14+細胞是以細胞學技術定義的典型的單核細胞,CD14是單核細胞的特征性標志,也是內(nèi)毒素LPS的重要受體[7],LPS與CD14有很強的親和力,機體發(fā)生炎癥反應時,LPS通過其結合蛋白(Lsp binding protein,LBP)與單核細胞表面的CD14結合[9]。因此CD14+可以視作單核細胞的激活態(tài)。CD16+則是NK細胞(CD56+)中激活的成分,NK細胞的CD16分子介導的信號轉錄主要發(fā)揮在ADCC作用時,或發(fā)生在CD16的單克隆抗體(CD16 mAB)與CD16交聯(lián)時[7]。因此CD14+、CD16+分別顯示的單核細胞和NK細胞中的激活成分,單核細胞和NK細胞是重要的天然免疫細胞,因此因子3命名為“天然免疫激活”。在該因子的主要成分中IL-10是重要的抗炎癥因子,其在因子3中的載荷值為負,意味著運動應激下免疫細胞激活導致的炎癥反應與抗炎癥作用的拮抗關系。

        FSH、L H、CD8+入選因子4。FSH、L H均是由下丘腦分泌的調節(jié)睪酮分泌的下神經(jīng)激素[4],CD8+是抑制(細胞毒性)T細胞,按照免疫學理論,CD8+應當與CD4+間存在密切的關系,在臨床上及運動免疫學中,一直將CD4+/CD8+作為評定機體免疫機能的重要指標。本研究中CD8+與CD4+沒有歸屬同一因子,而是與外周血下丘腦睪酮調節(jié)激素同屬一個因子,說明機能評定的數(shù)據(jù)不支持二者間的關系。依據(jù)L H與FSH的功能,應將因子4命名為“睪酮調節(jié)”。但本研究中睪酮與上述激素并不歸屬同一因子,其機制不明。上述關系可能提示,在運動訓練中L H、FSH對運動睪酮水平的調節(jié)作用并不明顯,可能被其它因素掩蓋,在運動員機能評定中,當涉及睪酮時,可以不測定L H、FSH以節(jié)省成本。

        表2 因子載荷和權重(N=150)

        HLA-DR+、IL-2入選因子5。HLA-DR+是激活的 T、B淋巴細胞,是獲得性免疫激活的標志[5],IL-2是T細胞分泌的刺激T細胞增殖的因子,也與T細胞的激活有關。激活的T細胞是HLA-DR+的重要部分,因此 HLA-DR+與T細胞因子IL-2間的關系密切。HLA-DR+與IL-2均與獲得性免疫的激活有關,因此因子5可以命名為“獲得免疫激活”。HLA-DR+與IL-2間的關系在運動應激中是有所表現(xiàn)的,如運動員在為期10天的大負荷、高強度耐力訓練期間,前5天HLA-DR+升高了1.3-1.8倍,同時伴有血清IL-2升高[6]。筆者研究發(fā)現(xiàn),舉重運動員訓練期間外周血IL-2 mRNA與HLA-DR+的變化趨勢一致[2,3]。

        CD4+、CD56+入選因子6。CD4+是獲得免疫的主力細胞,CD56+NK細胞是天然免疫的主力,這兩種細胞顯示的是機體免疫力的基礎,因此因子6可以命名為“基礎免疫”。

        由表1和表2可知,免疫、內(nèi)分泌指標所構成的因子數(shù)量較多,提示運動員免疫與內(nèi)分泌機能評定的多維性和復雜性。由表2可知,免疫與內(nèi)分泌指標群的6個因子中除了因子4的主要構成指標由內(nèi)分泌和免疫混合構成外,其余因子的主要構成指標均由單一的內(nèi)分泌或單一的免疫指標構成,提示雖然神經(jīng)、免疫、內(nèi)分泌間存在復雜的網(wǎng)絡關系,但在運動員機能評定中,免疫與內(nèi)分泌間的界限依然明顯存在,因此在舉重運動員免疫、內(nèi)分泌機能綜合評定時,各種機能間應當有所區(qū)分并多方面考慮。

        由表2所知,所有因子的主要構成指標與各指標在各因子中的權重一致,以上因子中權重較大的指標充分體現(xiàn)了各因子的命名屬性,說明因子分析的結果可以被較好地解釋。雖然因子分析顯示6個因子反映總體的權重相當,但是,各因子權重依然存在差異性,這種差異性值得重視,對此進行分析可能發(fā)現(xiàn)機能評定指標敏感性的有關線索。從各因子的載荷排名可以看出,在現(xiàn)有的免疫、內(nèi)分泌指標或維度中,從數(shù)值(量的方面)講,整體上內(nèi)分泌比免疫更具敏感性;而在內(nèi)分泌層面,應激激素更為敏感;在免疫層面,免疫分子較細胞更敏感,免疫激活較基礎免疫更敏感;在免疫激活層面,天然免疫的激活較獲得性免疫激活更敏感,作為免疫基礎的T淋巴細胞(CD4+)和NK細胞(CD56+)是較為穩(wěn)定的指標。王茹等在對過度訓練大鼠免疫機能特征的研究中也發(fā)現(xiàn)免疫分子(細胞因子)對訓練的反應較免疫細胞類指標CD4+/CD8+更為敏感[10]。

        3 結論

        以現(xiàn)有的舉重運動員機能評定數(shù)據(jù)的分析表明:舉重運動員免疫內(nèi)分泌機能評定存在多維性,免疫與內(nèi)分泌機能間存在獨立性。睪酮的變化更多與運動應激因素有關。在免疫機能評定中免疫分子對訓練的敏感性高于免疫細胞類指標,而免疫細胞中以激活態(tài)細胞更為敏感,運動訓練中的免疫激活首先是天然免疫激活,其次是獲得性免疫激活。

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