林 松，宋炳忠，王廷斌

(1.黑龍江省穆棱市畜牧技術(shù)服務(wù)中心，156100; 2.湯原縣湯原鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，154700;3.佳木斯市家畜繁育指導(dǎo)站，154007)

山羊、綿羊的凍精人工授精繁殖技術(shù)已經(jīng)開展20 多年，但在生產(chǎn)實(shí)踐中一直沒有得到大面積的推廣，其主要原因就是應(yīng)用凍精人工授精的受胎率始終不高，徘徊在30%左右，遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足不了生產(chǎn)需要。羊本交的受胎率在80% ～90%，羊鮮精人工授精的受胎率在70% ～80%。為了找出提高羊凍精人工授精受胎率的方法，本實(shí)驗(yàn)就深部輸精進(jìn)行了細(xì)致研究，2009 ～2012年間，累計(jì)進(jìn)行凍精人工授精山羊400 頭，情期受胎率達(dá)到85%以上，取得了良好的效果。

1 材料與方法

1.1 材料

選擇兩個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的羊場和養(yǎng)羊?qū)I(yè)戶，主要是本地山羊、雜交1 ～2 代的波爾山羊、奶山羊做為試驗(yàn)用羊，都是可繁殖的基礎(chǔ)母羊。飼養(yǎng)條件是放牧與舍飼相結(jié)合，舍飼期間補(bǔ)充一定數(shù)量的精飼料。在凍精人工授精試驗(yàn)期間，羊群中的種公羊，一是采取隔離方式杜絕本交，二是采取帶布兜方式以達(dá)到只能試情、不能交配的目的。本試驗(yàn)主要器材是凍精人工授精的必備器具，包括羊輸精槍或牛輸精槍，一次性塑料外套、液氮罐、陰道擴(kuò)張器、波爾山羊與奶山羊冷凍細(xì)管精液，光源即微型手電筒和普通手電筒或礦燈，以及消毒酒精棉、生理鹽水、注射器、紙巾、液體石蠟或消毒過的食用油、標(biāo)記膠布(彩色膠帶) 、羊只保定架。

1.2 方法

發(fā)情觀察采取早、晚兩次種公羊試情或飼養(yǎng)員、技術(shù)員人為觀察，接受種公羊爬跨的母羊即為發(fā)情羊; 外陰有分泌物黏液的也視為發(fā)情羊。發(fā)情羊只的特點(diǎn)是鳴叫、走動(dòng)、喜歡接近人，外陰腫脹有黏液，爬跨或接受爬跨。輸精時(shí)間是在羊只發(fā)情的中后期，一般在發(fā)情開始后24 ～31 h輸精。確定輸精的技術(shù)要點(diǎn)為，此期陰道分泌物的特點(diǎn)是透明黏液中有少量至大量白色黏液塊。如果都是透明黏液則輸精過早; 如果是蠟狀黏液則輸精過晚。輸精前，外陰消毒采用酒精棉擦洗外陰、生理鹽水沖洗一次，紙巾擦干，將擴(kuò)張器也用酒精棉消毒，晾干后備用，擴(kuò)張器用時(shí)涂上消過毒的食用油。冷凍細(xì)管精液解凍采用38℃溫水解凍12 ～15 s，鏡檢活力不低于0.3。輸精方法是用擴(kuò)張器擴(kuò)開陰道，利用光源找到子宮頸口，將裝好精液的輸精槍緩慢插入子宮頸內(nèi)，如果插入困難，可以適當(dāng)加力，找方向進(jìn)入，輸精槍頭用彩色膠帶標(biāo)記5 ～6 cm的位置，輸精槍插入深度為4 ～5 cm，即達(dá)到子宮體的位置。

本試驗(yàn)累計(jì)輸精山羊400 頭次，受胎率為85.6%(342/400) 。

2 討論

2.1 鮮精與凍精人工授精效果是不同的

據(jù)多年資料顯示，鮮精人工授精受胎率為76.5%(612/800) ，凍精人工授精受胎率為32.2%(161/500) ，產(chǎn)生差異的主要因素是鮮精精子數(shù)量多，活力強(qiáng)，鮮精輸精即使是在子宮頸0.5 ～1.0 cm輸精，也能獲得較好的受胎率。

2.2 對以往輸精時(shí)間的看法

許多資料或操作規(guī)程寫到，輸精時(shí)間規(guī)律一般要求是: 上午發(fā)情下午第1 次輸精，次日上午再次輸精，下午發(fā)情第2 天上午輸精，下午再輸精。本試驗(yàn)著重采取一次性輸精，采取試情羊試情，再人工觀察，最后用陰道擴(kuò)張器觀察黏液狀態(tài)為主，即根據(jù)發(fā)情黏液狀態(tài)特點(diǎn)進(jìn)行輸精，個(gè)別輸精過早的羊只進(jìn)行兩次輸精。凍精輸精過早，因精子存活時(shí)間短，必然降低受胎率。以往的兩次輸精也多數(shù)是在24 h內(nèi)，沒有真正按羊只發(fā)情與排卵規(guī)律輸精，時(shí)間不確切，受胎不會(huì)達(dá)到理想效果。

2.3 對以往輸精深度的看法

一些資料或者操作規(guī)程顯示，輸精深度為0.5 ～1.0 cm。我們現(xiàn)場按此法和子宮深部輸精法(4 ～5 cm) 做了對比，前者受胎率明顯低(28%，56/200) ，而后者受胎率達(dá)到了預(yù)期效果(85.6%，342/400) 。說明凍精在經(jīng)過子宮頸時(shí)數(shù)量和能量消耗很大，許多精子都沒有上行到受精部位，或即使到達(dá)受精部位，精子數(shù)量和活力都達(dá)不到指標(biāo)，其受精能力也大大降低。

2.4 按本實(shí)驗(yàn)研究的技術(shù)操作規(guī)程實(shí)施人工授精的必要性

要按照羊的發(fā)情規(guī)律和生理結(jié)構(gòu)、發(fā)情特殊性進(jìn)行技術(shù)操作，在操作規(guī)程中，強(qiáng)調(diào)每一步驟的嚴(yán)謹(jǐn)性和科學(xué)性，消毒衛(wèi)生、解凍與活力、輸精時(shí)間與輸精位置，輸精深度，都必須嚴(yán)格按規(guī)程執(zhí)行，否則只是貪圖工作方便，粗心大意，敷衍了事，受胎率會(huì)大打折扣，是做不好這項(xiàng)技術(shù)服務(wù)的。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)研究的山羊凍精人工授精深部輸精是完全可行的，是提高受胎率的關(guān)鍵技術(shù)之一。在羊只健康、解凍后精子數(shù)量和活力正常、輸精時(shí)間適宜，衛(wèi)生消毒良好的前提下，深部輸精可以提高受胎率。