孫慧莉 崔玉蘭 邢紹芝 (濱州醫(yī)學院附屬醫(yī)院門診部，山東 濱州 256603)

垂體腺瘤是由于垂體前葉腺細胞單克隆增生而形成的腺瘤，是較常見的顱內(nèi)腫瘤，約占所有顱內(nèi)腫瘤的10% ～15%。根據(jù)垂體腺瘤的生物學行為，可將其分為侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤，侵襲性垂體腺瘤的生物學行為介于良性與惡性腺瘤之間，可破壞并侵襲患者鞍區(qū)骨質和海綿竇等鞍區(qū)結構，具有治愈率低、術后復發(fā)率和并發(fā)癥發(fā)生率高、內(nèi)分泌學緩解率低等特點，是臨床治療的難點〔1，2〕。侵襲性垂體腺瘤的發(fā)生機制與細胞周期調節(jié)、細胞增生活性、血管生成、細胞外基質調控、癌基因及抑癌基因等相關，但目前尚無有效的指標來評判垂體腺瘤的生物學性質〔3〕。本文觀察老年垂體腺瘤患者垂體瘤轉化基因(PTTG)表達和微血管密度(MVD)計數(shù)與垂體腺瘤侵襲性的關系，為垂體腺瘤的臨床治療與預后評估提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2009年1月至2012年3月，在我科住院治療的老年垂體腺瘤患者52例，均有完備的臨床資料，無嚴重的基礎性疾病或重要臟器功能不全，排除了伴發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)其他腫瘤或惡性腫瘤腦轉移。根據(jù)臨床相關診斷標準分為侵襲性組和非侵襲性組，侵襲性組29例，男性16例，女性13例，年齡61～71歲，平均(66.2±3.6)歲;非侵襲性組23例，男性13例，女性10例，年齡60～72歲，平均(64.7±3.3)歲。兩組入選患者年齡、性別、患者基礎狀況等比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 侵襲性垂體腺瘤評判標準 (1)根據(jù)Wilson-Hardy分類法〔4〕，選擇Ⅲ ～ Ⅳ級或者 C、D、E 分期的患者;(2)根據(jù) MRI的Knosp分級標準〔5〕，選擇3級以上的患者;(3)術中觀察腫瘤組織侵犯到鞍區(qū)骨質、海綿竇、血管神經(jīng)和腦組織等周邊結構;(4)術后經(jīng)病理診斷證實患者伴硬腦膜的腫瘤侵犯。綜合以上評判標準，診斷垂體腺瘤是否具有侵襲性。

1.3 檢查方法 術后將腫瘤組織10%甲醛固定，組織包埋后連續(xù)切片，切片厚度3 μm。根據(jù)免疫組化試劑說明書，微波抗原修復后分別按序滴加一抗和二抗。PTTG檢測采用兔抗人多克隆抗體試劑盒，CD34檢測采用鼠抗人單克隆抗體試劑盒。

1.4 檢測評判標準 (1)PTTG評判標準：染色后染色部位位于瘤細胞的胞核及胞質，根據(jù)染色陽性腫瘤細胞數(shù)，半定量評判檢測結果：陰性或陽性細胞數(shù)＜5%為(-);陽性細胞數(shù)5% ～25%為(+);陽性細胞數(shù)25% ～50%為(?);陽性細胞數(shù)50% ～75%為(?);陽性細胞數(shù)＞75%為();陽性細胞為(+)及以上即計為陽性患者;(2)腫瘤組織內(nèi)MVD評定方法〔6〕：CD34染色部位位于細胞核膜，在低倍鏡(×40)下選擇陽性染色最為明顯的5個區(qū)域，接著在高倍鏡(×200)下進行計數(shù)，將與腫瘤細胞、毗鄰微血管和周圍結締組織不相連的內(nèi)皮細胞簇作為一條獨立的微血管，將有平滑肌圍繞的大血管、管腔內(nèi)紅細胞超過8個的血管除外，腫瘤壞死區(qū)域、硬化區(qū)域和腫瘤細胞稀少區(qū)域的微血管不計入，取5個高倍鏡下微血管數(shù)的平均值計為微血管密度(MVD)。

1.5 統(tǒng)計學方法 計數(shù)資料采用百分率表示，計量資料采用s表示，使用SPSS16.5統(tǒng)計學軟件分別行χ2檢驗和t檢驗。

2 結果

2.1 兩組患者PTTG表達和MVD計數(shù)比較 侵襲性組和非侵襲性組患者PTTG表達陽性率分別為89.7%(26例)和17.4%(4例)，組間比較差異顯著(P＜0.01);MVD計數(shù)均值分別為39.26±7.38和20.17±5.34，組間比較差異顯著(P＜0.01)。

2.2 侵襲性組患者PTTG陽性程度與MVD計數(shù)相關性分析將PTTG(+)～()分別計為1～4級，PTTG(+)MVD計數(shù)(33.52±6.17)個，PTTG(?)MVD 計數(shù)(36.38±6.63)個，PTTG(?)MVD計數(shù)(40.76±7.28)個，PTTG()MVD計數(shù)(44.64±7.71)個。分析不同級別與其相應MVD計數(shù)均值的相關性，r=0.806，P＜0.01，說明侵襲性老年垂體腺瘤患者PTTG陽性程度與MVD計數(shù)呈正相關。

3 討論

近年來，隨著細胞遺傳學與現(xiàn)代分子生物學在醫(yī)學領域的不斷發(fā)展，對垂體腺瘤的認識已經(jīng)從細胞水平逐漸達到分子水平。目前臨床研究證實，侵襲性垂體腺瘤的發(fā)生與發(fā)展，是由多種細胞因子及多基因相互作用的結果〔7〕。

正常人垂體中PTTG處于低水平表達，但在垂體腺瘤患者中其處于過度表達。PTTG誘發(fā)垂體腺瘤機制為：(1)PTTG通過與堿性成纖維細胞生長因子間形成正反饋環(huán)路，可以刺激腫瘤的血管生成;(2)PTTG通過激活c-Myc基因及其他脯氨酸增殖基因，誘導腫瘤細胞的增殖;(3)當機體內(nèi)PTTG過度表達時，可造成機體出現(xiàn)非整倍性的細胞分裂，造成遺傳的不穩(wěn)定性。臨床研究證實，PTTG與垂體腺瘤、乳腺癌及肺癌等腫瘤的浸潤性相關，其可能的機制為：(1)PTTG通過促進機體內(nèi)基質金屬蛋白酶-2(MMP-2)的表達，從而促進了細胞基質的產(chǎn)生;(2)PTTG通過促進bFGF和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達，而形成了三者間的正反饋作用，bFGF和VEGF可顯著促進腫瘤內(nèi)血管的生成，到患者垂體腺瘤出現(xiàn)侵襲性〔8～10〕。

微血管生成是指在原微血管的基礎上，通過出芽的方式形成微血管(小靜脈及毛細血管)的過程。Folrman等〔11〕通過臨床試驗證實，機體內(nèi)腫瘤組織的生長以及轉移，均依賴于局部微血管的生成。這一觀點已得到臨床的證實與廣泛的認同，同時通過臨床進一步的研究證實，微血管生成在腫瘤組織的生長、轉移和侵襲過程中起到了極其重要的作用，若沒有局部新生微血管的支持，腫瘤組織無法達到3 mm以上，新生的微血管為腫瘤組織提供了必要的營養(yǎng)并帶走生長過程中的廢物，同時為腫瘤組織的侵襲或轉移提供了必要的途徑。因此，侵襲性垂體腺瘤內(nèi)MVD計數(shù)與其侵襲性密切相關，臨床研究同時也提示，MVD計數(shù)與腫瘤的病理分級、轉移與復發(fā)密切相關，MVD計數(shù)可作為判斷腫瘤預后的獨立性指標，MVD計數(shù)較高往往提示腫瘤的預后不良〔12〕。

本文研究證實，老年患者中PTTG表達和MVD計數(shù)與垂體腺瘤侵襲性密切相關。兩項指標可提示老年垂體腺瘤患者的預后，指導臨床治療。

1 王任直.神經(jīng)外科學〔M〕.第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：462.

2 王 峰，張文德，劉永良，等.侵襲性垂體腺瘤組織中PTTG、bFGF蛋白的表達及意義〔J〕.中國臨床神經(jīng)外科雜志，2005;10(5)：345-51.

3 Kontogeorgos G.Predictive markers of pituitary adenoma behavior〔J〕.Neuroendocrinology，2006;83(4)：179-88.

4 Wilson CB.A decade of pituitary microsurgery：The Herbert Olivercrona Lecture〔J〕.J Neurosurg，1984;61(5)：814-33.

5 Knosp E，Steiner E，Kitz K，et al.Pituitary adenomas with invasion of the cavernous sinus space：a magnetic resonance imaging classification compared with surgical findings〔J〕.Neurosurgery，1993;33(4)：610-8.

6 Weidner G，F(xiàn)olkinan J，Pozza F，et al.Tumor angiogenesis：a new significant and independent prognostic indicator in early-stage breast carcinoma〔J〕.J Natl Cancer Inst，1992;84(24)：1875-87.

7 雷 霆，劉 勤，李 杰，等.多種細胞內(nèi)第二信使在人垂體生長激素腺瘤生長激素分泌的調控作用〔J〕.中華實驗外科雜志，2001;18(5)：456.

8 Jacob T，Deepthi K，Naibedya C.The emerging role of pituitary tumor transforming gene in tumorigenesis〔J〕.Clin Med Res，2006;4(2)：130-7.

9 Salehi F，Kovacs K，Scheithauer BW，et al.Pituitary tumor-transforming gene in endocrine and other neoplasms：a review and update〔J〕.Endocrine Relat Cancer，2008;15(3)：721-43.

10 Malik MT，Kakar SS.Regulation of angiogenesis and invasion by human pituitary tumor transforming gene(PTTG)through increased expression and secretion of matrix metalloproteinase-2(MMP-2)〔J〕.Mole Cancer，2006;5(61)：611-3.

11 Folrman J.Role of angiogenesis in tumor growth and metastasis〔J〕.Semin Oncol，2002;29(6)：15-8.

12 Nusser N，Gosmanova E，Zheng Y，et al.Nerve growth factor signals through TrkA，phosphatidylinositol 3-kinase，and Rac1 to inactivate RhoA during the initiation of neuronal differentiation of PC12 cells〔J〕.J Biol Chem，2002;277(39)：35840-6.