王 婭

(重慶市大足區(qū)人民醫(yī)院病理科， 重慶 大足 402360)

近年來，宮頸癌的臨床發(fā)病率呈逐年上升的趨勢[1]。對宮頸癌或癌前病變進(jìn)行早期診斷是目前預(yù)防和治療宮頸癌的最重要手段[2]。液基細(xì)胞學(xué)檢查技術(shù)已逐漸發(fā)展為一種宮頸疾病的普查手段[3]。液基細(xì)胞檢測能顯著降低傳統(tǒng)巴氏涂片法對宮頸病變檢測的假陰性率，進(jìn)而提高診斷的準(zhǔn)確性。隨著液基細(xì)胞學(xué)檢查技術(shù)的不斷發(fā)展，其制片方法也得到不斷改進(jìn)。目前，臨床主要采用的制片方法有離心甩片(TLT)和膜式液基(TCL)兩種[4]。本文收集了我院2011年1月至2012年6月行宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查的450例受檢者標(biāo)本，分別進(jìn)行離心甩片(TLT)和膜式液基(TCL)兩種制片方法，比較兩種方法制片質(zhì)量及檢測結(jié)果的差異?，F(xiàn)將結(jié)果總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料:收集我院2011年1月至2012年6月行宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查的450例受檢者，年齡18-61歲，平均年齡為42.3歲。受檢者主要臨床表現(xiàn)有白帶異常、不規(guī)則陰道流血、絕經(jīng)后出血、性交后出血、外陰贅生物、宮頸糜爛等癥狀。

1.2 制片方法

1.2.1 取樣方法:受檢者取膀胱截石位，使用陰道窺器將子宮頸充分暴露，采用特制的小刷子尖端靠近宮頸口，將毛刷以適當(dāng)?shù)牧Χ鹊肿『?，沿順時針或逆時針方向旋轉(zhuǎn)4-5周。完成后，將刷頭置于存有保存液的小瓶內(nèi)，蓋緊瓶蓋后寫上受檢者姓名送檢。

1.2.2 離心甩片(TLT)液基細(xì)胞制作法:首先進(jìn)行液基細(xì)胞固定，將宮頸刷頭取材后置于保存液中，使紅細(xì)胞與部分白細(xì)胞溶解。繼而進(jìn)行離心操作，將小瓶輕輕振搖，混勻細(xì)胞保存液。取14mL保存液于離心管內(nèi)，以1500轉(zhuǎn)/min的離心速度，離心3min后，棄去上層澄清的液體，留下管底細(xì)胞團(tuán)及2.5mL保存液。再對標(biāo)本進(jìn)行涂片，取2mL保存液于細(xì)胞團(tuán)混勻后，加入制片機(jī)內(nèi)的拋液器中，離心速度為1000轉(zhuǎn)/min，離心3min。最后對涂片進(jìn)行固定，將玻片與吸水紙從拋液器中取出后，輕輕將吸水紙剝?nèi)?，切勿損傷涂片表面，將玻片完整放于95%乙醇中固定10min。

1.2.3 膜式(TCL)液基細(xì)胞制作法:首先將宮頸刷頭取材后置于保存液中，使紅細(xì)胞與部分白細(xì)胞溶解。再將保存液瓶移入液基薄層細(xì)胞制片機(jī)，經(jīng)過分散細(xì)胞、隔離無診斷意義的物質(zhì)后，將宮頸細(xì)胞收集于微孔膜表面，最后轉(zhuǎn)移到載玻片上。

1.2.4 染色方法:對兩種制片方法獲得的標(biāo)本均進(jìn)行巴氏染色，具體方法為，將所有標(biāo)本放于95%乙醇中固定10min后，進(jìn)行H-E染色，封片后在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行鏡檢。

1.3 效果評價方法:根據(jù)Bethesda系統(tǒng)標(biāo)本評估標(biāo)準(zhǔn)對兩種制片方法所得標(biāo)本質(zhì)量進(jìn)行評估與比較。滿意標(biāo)本:鱗狀上皮細(xì)胞數(shù)量為5000-12000個，結(jié)構(gòu)清晰，覆蓋面大于10%;頸管柱狀上皮細(xì)胞團(tuán)數(shù)量較多，存在化生細(xì)胞。不滿意標(biāo)本:鱗狀上皮細(xì)胞較少，結(jié)構(gòu)不結(jié)構(gòu)清晰，其覆蓋面小于10%;炎癥細(xì)胞與血細(xì)胞過多，細(xì)胞的重疊現(xiàn)象炎癥，細(xì)胞層過厚，固定效果不佳，污染情況較嚴(yán)重，使大于75%的上皮細(xì)胞觀察受到影響。

根據(jù)TBS-2001診斷標(biāo)準(zhǔn)對兩種標(biāo)本分別進(jìn)行閱片，陽性標(biāo)本包括不典型鱗狀上皮、低度鱗狀上皮內(nèi)瘤變、不典型鱗狀上皮、高度鱗狀上皮內(nèi)瘤變、鱗狀上皮癌、可疑腺癌以及腺癌。比較兩種制片診斷結(jié)果的差異。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法:運(yùn)用SPSS13.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計量資料采用t檢驗，計數(shù)資料采用卡方檢驗，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 比較離心甩片(TLT)和膜式液基(TCL)兩種制片方法細(xì)胞片背景與滿意度，結(jié)果顯示，離心甩片(TLT)和膜式液基(TCL)兩種制片方法獲得的標(biāo)本制片效果均較理想，細(xì)胞片背景清晰，制片滿意度較高，兩者制片質(zhì)量無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，見表1。

表1 離心甩片(TLT)和膜式液基(TCL)兩種制片方法細(xì)胞片背景與制片滿意度比較 n(%)

2.2 比較離心甩片(TLT)和膜式液基(TCL)兩種制片法檢出率情況，離心甩片(TLT)法檢出陽性標(biāo)本47例，陽性率為10.44%;膜式液基(TCL)法檢出陽性標(biāo)本46例，陽性率為10.22%。兩種制片方法對陽性標(biāo)本檢出率無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。

2.3 比較離心甩片(TLT)和膜式液基(TCL)兩種制片法制片過程，離心甩片(TLT)法操作簡便，一次操作可對12張細(xì)胞片進(jìn)行處理，對血性標(biāo)本無需進(jìn)行特殊處理;而膜式液基(TCL)法操作相對復(fù)雜，一次只操作僅能處理1張細(xì)胞片，對血性標(biāo)本必須進(jìn)行預(yù)處理。

3 討論

本文通過對離心甩片(TLT)和膜式液基(TCL)兩種制片方法的制片質(zhì)量及陽性標(biāo)本檢出率進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，離心甩片(TLT)和膜式液基(TCL)兩種制片方法獲得的標(biāo)本制片效果均較理想，細(xì)胞片背景清晰，制片滿意度較高，兩者制片質(zhì)量無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。兩種制片方法對陽性標(biāo)本檢出率無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。離心甩片(TLT)法操作簡便，一次操作可對12張細(xì)胞片進(jìn)行處理，對血性標(biāo)本無需進(jìn)行特殊處理;而膜式液基(TCL)法操作相對復(fù)雜，一次只操作僅能處理1張細(xì)胞片，對血性標(biāo)本必須進(jìn)行預(yù)處理。

由于膜式液基細(xì)胞(TCL)制片方法中無分離步驟，僅僅依靠過濾膜對取樣細(xì)胞進(jìn)行過濾，易導(dǎo)致最終細(xì)胞片中細(xì)胞數(shù)量不足，另外，部分粘液可黏附在薄膜上，在制片時容易轉(zhuǎn)移到玻片上。此外，制片系統(tǒng)在進(jìn)行高速旋轉(zhuǎn)時可能造成部分細(xì)胞核膜破裂，對診斷造成困難，因此，使制片的質(zhì)量不易控制(本文收集的樣本制片效果較好)[5]。膜式制片法需要使用專門儀器與耗材，費(fèi)用相對昂貴。

離心甩片(TLT)法利用細(xì)胞黏附原理，采用梯度離心去除黏液和無診斷意義的物質(zhì)，再使用特殊的細(xì)胞基液將脫落細(xì)胞混勻，然后進(jìn)行人工涂片。涂片質(zhì)量較好，細(xì)胞豐富，背景清晰。離心甩片(TLT)法不需要使用特殊的儀器和耗材，操作簡便、一次操作可進(jìn)行多張細(xì)胞片同時制作。

本文比較結(jié)果表明，離心甩片(TLT)法與膜式液基細(xì)胞(TCL)制片方法相比，陽性樣本的檢出率均較高，制片質(zhì)量較好，滿意度相仿。但離心甩片(TLT)法的操作過程更簡便，對血性樣本無需進(jìn)行特殊處理，檢測成本低廉，因此，離心甩片(TLT)法用于宮頸癌液基細(xì)胞學(xué)檢查與膜式液基細(xì)胞(TCL)制片方法相比效果更理想。

[1]高淑平.宮頸癌診斷與治療的新進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)理論與實踐，2012，25(12):1446-1448.

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[3]陳曉露，何磊樂.宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查在宮頸癌篩查中的應(yīng)用[J].按摩與康復(fù)醫(yī)學(xué)，2012，3(17):96-97.

[4]國宏莉，唐幕湘，田林，等.宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查國內(nèi)外方法的對比研究[J].西部醫(yī)學(xué)，2009，21(9):1524-1526.

[5]黃敏，鐘桂玲，許成芳.宮頸巴氏涂片與液基細(xì)胞薄層技術(shù) (TCT)的比較分析[J].國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報，2008，14(6):68-70.