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        鬼針草提取物對去勢所致的干眼癥雄兔淚液分泌影響的實驗研究

        2013-07-29 03:00:44施煒張傳偉王育良
        實用老年醫(yī)學(xué) 2013年9期

        施煒 張傳偉 王育良

        干眼癥為任何原因所致淚液質(zhì)或量或動力學(xué)的異常,從而導(dǎo)致淚膜不穩(wěn)定和(或)眼表面的異常,并伴有眼部不適癥狀的一類疾病。引起干眼癥的病因很多,近年來國內(nèi)外研究表明,性激素,尤其是雄激素水平下降后,對淚腺調(diào)節(jié)作用異常,導(dǎo)致淚膜不穩(wěn)定、局部炎癥反應(yīng)加重,最終導(dǎo)致干眼癥。鬼針草為菊科植物鬼針草的全草。全草含生物堿、鞣質(zhì)、皂甙、黃酮甙。黃酮類化合物化學(xué)結(jié)構(gòu)與雄激素類似,可能起到擬雄激素活性作用,同時鬼針草中含大量膽堿,非消炎成分,卻可引起不良反應(yīng)如唾液分泌、流淚等。我們制作去勢兔干眼模型,旨在探討鬼針草提取物對抗雄激素水平下降導(dǎo)致干眼的作用機制以及治療效果。

        1 材料和方法

        1.1 主要材料及試劑 0.125%熒光素溶液,Schirmer試紙(天津晶明新技術(shù)開發(fā)有限公司),鬼針草顆粒劑(江蘇省中醫(yī)院)。

        1.2 動物選擇與分組 將2 月齡13 只新西蘭雄性大白兔,隨機分為3 組,空白組(A 組)3 只、模型組(B 組)5 只、鬼針草提取物治療組(C 組)5 只,將B、C 組實驗雄兔行雙側(cè)睪丸切除術(shù)制作雄激素水平下降所導(dǎo)致的干眼模型,對C 組以鬼針草提取物連續(xù)灌胃6 周。

        對全部實驗兔造模前后行角膜熒光染色(FI),淚膜破膜時間(BUT)測定、基礎(chǔ)淚液分泌量SchirmerⅠ試驗。

        1.3 用藥方法 鬼針草提取物稀釋液根據(jù)兔體質(zhì)量配比率0.1g/(ml·kg)予治療組每天上午10 點灌胃1次。每組分別于造模前及造模后第7、14、21、28、35、42 天行表面麻醉后Fl、BUT、基礎(chǔ)淚液分泌量檢測,檢測由同一人在同一環(huán)境中進行。

        1.4 檢查方法 檢查前結(jié)膜囊先滴倍諾喜眼液表面麻醉,10 min 后,將Schirmer 試紙圓頭端沿折線處折疊插入兔下方結(jié)膜囊后半部5 min 后,取出試紙測量其濕長。FI 及BUT 實驗按常規(guī)進行。

        1.5 FI 評分標準 過角膜中心作水平與垂直兩條線將角膜分為四個區(qū),每個區(qū)按0、1、2、3 評分,規(guī)定無染色為0,有染色則分輕、中、重3 級,共12 分[1]。

        1.6 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 18.0 軟件包進行統(tǒng)計學(xué)分析。自身前后比較采用配對t 檢驗,兩組間比較采用成組t 檢驗,P <0.05 為差異有統(tǒng)計意義。

        2 結(jié)果

        2.1 基礎(chǔ)淚液分泌量比較 A 組基礎(chǔ)淚液分泌量無顯著性變化。B 組造模后2 周基礎(chǔ)淚夜分泌量明顯減少(P <0.05),C 組造模后1 ~3 周基礎(chǔ)淚夜分泌量明顯增加(P <0.05),造模后4 ~5 周與造模前相比無顯著性差異,C 組各時段基礎(chǔ)淚液分泌量較B 組明顯增加(P <0.05)。見表1。

        表1 3 組基礎(chǔ)淚液分泌量造模前后比較(±s,分)

        表1 3 組基礎(chǔ)淚液分泌量造模前后比較(±s,分)

        注:與造模前比較,* P <0.05;與模型組比較,△P <0.05

        組別造模前第7 天第14 天第21 天第28 天第35 天第42天120.67 ±1.2121.67 ±2.4221.17 ±1.94(n=3)B 組14.75 ±1.6713.63 ±4.7210.13 ±3.34*9.50 ±3.21*8.75 ±3.33*8.63 ±3.02*7.75 ±2.49*(n=5)C 組15.00 ±1.0518.00 ±3.16*△ 18.60 ±2.55*△ 17.10 ±1.97*△ 16.30 ±1.77△ 15.70 ±1.70△ 16.80 ±2.25△(n=5)A 組20.50 ±2.1720.17 ±2.3219.83 ±0.9821.33 ±1.5

        2.2 角膜FI 比較 A 組角膜FI 無顯著性變化。B 組造模后3 周角膜FI 無顯著性差異,其余時段角膜FI增加(P <0.05),C 組角膜FI 在各時段無顯著性差異。見表2。

        表2 3 組角膜FI 造模前后比較(±s,分)

        表2 3 組角膜FI 造模前后比較(±s,分)

        注:與造模前比較,* P <0.05

        組別造模前第7 天第14 天第21 天第28 天第35 天第42天0.17 ±0.410.17 ±0.410.17 ±0.410.17 ±0.4100(n=3)B 組0.1 ±0.320.1 ±0.3200.4 ±0.521.10 ±0.32*1.30 ±0.48*1.70 ±0.48*(n=5)C 組00.30 ±0.4900.1 ±0.320.2 ±0.4300(n=5)A 組0

        2.3 BUT 比較 A 組BUT 無顯著性變化。B 組造模后1 ~2 周BUT 與造模前相比減少不明顯,3 ~6 周BUT與造模前相比明顯減少(P <0.05);C 組在造模后1 周BUT 稍延長,無顯著性差異,2 ~5 周明顯延長(P <0.05);B 組于2 ~6 周,BUT 明顯減少,C 組BUT 增加或維持不變,2 組相比有顯著性差異(P <0.05)。見表3。

        表3 3 組BUT 造模前后比較(±s,分)

        表3 3 組BUT 造模前后比較(±s,分)

        注:與造模前比較,* P <0.05;與B 組比較,△P <0.05

        組別造模前第7 天第14 天第21 天第28 天第35 天第42天.17 ±0.9820.33 ±1.2120.50 ±1.23(n=3)B 組20.10 ±0.8820.40 ±2.0719.40 ±1.7817.70 ±1.64*16.40 ±1.08*15.70 ±2.06*11.30 ±1.64*(n=5)C 組20.30 ±1.3421.70 ±2.8326.20 ±1.55*△ 23.50 ±4.25*△ 22.10 ±1.45*△ 23.50 ±2.99*△ 19.90±1.29△(n=5)A 組20.00 ±019.33 ±1.0319.83 ±0.9820.67 ±1.2120

        3 討論

        引起干眼的病因很多,環(huán)境因素、個人習(xí)慣等引起的輕度干眼癥患者(如長時間使用電腦、長期處于空調(diào)環(huán)境等)僅出現(xiàn)較輕的癥狀,而無明顯的眼表損害,這些影響因素的及時改善可使眼部不適感消失;但對于局部或全身有明確病因引起的干眼癥(如眼表化學(xué)及熱燒傷、Sjgren 綜合征、過敏、瞼緣炎等),其發(fā)病機制十分復(fù)雜[2]。眼是性激素作用的靶器官,性激素尤其是雄激素,可調(diào)節(jié)機體及局部的免疫功能,調(diào)控淚腺和瞼板腺的形態(tài)、發(fā)育、分化及分泌功能。由絕經(jīng)、衰老、自身免疫疾病、抗雄激素藥物等引起雄激素缺乏的原因均可引起干眼癥。Sullivan 等[3]研究發(fā)現(xiàn)女性Sjgren 綜合征患者體內(nèi)雄激素水平普遍降低。單純的雄激素缺乏可能并不引起干眼癥,但加速干眼癥患者的病情惡化[4]。雄激素在干眼發(fā)病機制中具有較為肯定的作用,但是雄激素不是單獨發(fā)揮作用的,多種性激素之間通過相互作用、相互影響、相互轉(zhuǎn)化共同影響機體內(nèi)分泌環(huán)境,維持雄激素的最佳生物水平對于淚液分泌功能十分重要[5]。

        關(guān)于雄性激素治療干眼的機制仍不清楚,有研究發(fā)現(xiàn)淚腺和瞼板腺都是雄激素靶器官,雄激素通過對淚腺、瞼板腺分泌功能的影響,在淚膜結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變的機制中起作用[6]。

        現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認為,鬼針草含生物堿、鞣質(zhì)、皂甙、黃酮甙。莖葉含揮發(fā)油、鞣質(zhì)、苦味質(zhì)、膽堿等,并含多種氨基酸、胡蘿卜素和維生素等。用乙醇浸液在體外對革蘭氏陽性細菌有抑菌作用,花、莖對金黃色葡萄球菌也有抑菌作用。鬼針草提取物中含有大量黃酮類物質(zhì),研究已證明某些黃酮類化合物具有擬雄激素作用[7]。

        在本次實驗過程中,模型組在造模后1 周基礎(chǔ)淚液分泌量無顯著性變化,其余時段淚流量明顯減少,治療組各時段淚流量明顯增加,考慮為鬼針草擬膽堿作用,促進淚腺分泌增加所致。模型組在造模后3 周角膜FI 無顯著性變化,其余時段角膜FI 顯著增加,治療組FI 在各時段無顯著性變化。考慮為前期是第三眼瞼的保護及角膜細胞凋亡作用尚未明顯表現(xiàn)所致。模型組在造模后前2 周BUT 與造模前減少不明顯,第3周后BUT 與造模前相比明顯減少;治療組造模后2 ~6周與模型組相比,BUT 明顯延長。表明鬼針草具有擬性激素及膽堿作用,對淚腺細胞具有促進分泌,保護淚腺細胞凋亡作用。

        因此,鬼針草提取物可顯著抑制雄激素水平降低后兔干眼的發(fā)生。其作用機制可能與黃酮類物質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)與雄激素類似,可起到擬雄激素效應(yīng),同時其擬膽堿作用在增加淚液流量、延長BUT、改善FI 等方面都有一定的作用。鬼針草提取物可能成為治療干眼的新途徑。

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