（南陽(yáng)師范學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，河南南陽(yáng) 473061）

芹菜（Apuium gravelous）是人們?nèi)粘２妥郎铣涞囊坏啦穗?，為傘形科植物旱芹的全草，屬傘形花科二年生蔬菜，在我?guó)栽培歷史悠久，分布廣泛[1]。芹菜含有多種人體所必需的微量元素以及多種藥理活性成分，具有極好的藥用功能，如黃酮類物質(zhì)、揮發(fā)油化合物、不飽和脂肪酸等。這些活性成分中研究最多的是芹菜黃酮類物質(zhì)，黃酮提取物具有降壓安神、保護(hù)血管和增強(qiáng)免疫等功效[2]。嚴(yán)建剛等研究發(fā)現(xiàn)芹菜黃酮提取物能顯著降低大鼠血清中的高血脂[3]。梁華等研究表明芹菜提取物確實(shí)能起到明顯的降壓、降血脂作用[4]。Zhang等發(fā)現(xiàn)芹菜素對(duì)由高K引起去除內(nèi)皮細(xì)胞的小鼠主動(dòng)脈環(huán)收縮有明顯松弛作用[5]。KoFN用芹菜素小鼠進(jìn)行預(yù)處理后可抑制由去甲腎上腺素引起的血管暫時(shí)性緊張收縮[6]。但是，關(guān)于不同濃度的芹菜浸出液的降壓功效，以及作用途徑等的報(bào)道比較少。因此本研究選擇蟾蜍為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采用斯氏蛙心灌流的方法，以任氏液作為對(duì)照，利用BL-410生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)描記不同濃度芹菜浸出液作用下的心搏曲線，來探討不同濃度的芹菜浸出液對(duì)蟾蜍心臟的影響，為探明芹菜降壓功效的機(jī)制提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

中華大蟾蜍（Bufo bufo gargarizans Cantor）10只，雌雄不限，體重 100 g～120 g。

1.2 實(shí)驗(yàn)器材

常用手術(shù)器械（手術(shù)剪、手術(shù)鑷、玻璃分針、毀髓針等）、蛙心插管、蛙板、蛙心夾、蛙心杠桿、鐵架臺(tái)、雙凹夾、蛙排釘、細(xì)線、紗布、大燒杯、小燒杯、滴管、BL-410生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)（泰盟科技）、JZ100張力換能器（20 g，北京新航興業(yè)科貿(mào)公司）。

1.3 藥品與試劑

NaCl、KCl、CaCl2、NaHCO3、NaH2PO4、標(biāo)準(zhǔn)任氏液（Ringer′s）[7]、不同濃度的芹菜浸出液任氏液溶液。

芹菜浸出液的配制：超市買回新鮮芹菜，除葉、洗凈、晾干水分后，稱量100 g，用榨汁機(jī)將100 g芹菜榨汁并過濾，得到60 mL芹菜浸出液原液，取4個(gè)干凈的試劑瓶分別依次加入標(biāo)準(zhǔn)任氏液49、45、42.5、30 mL，然后依次向4個(gè)瓶中分別加入1、5、7.5、10 mL芹菜浸出液原液配制成濃度為2%、10%、15%、25%等的芹菜浸出液任氏液溶液并做上標(biāo)記。

1.4 方法步驟

1.4.1 蟾蜍離體心臟制備

蟾蜍離體心臟制備包括：雙毀髓、暴露心臟、心臟插管、心臟離體等步驟，參見文獻(xiàn)[7] 。

1.4.2 連接實(shí)驗(yàn)裝置

將蛙心插管固定在鐵支架上，用蛙心夾在心室舒張期夾住心尖少許肌肉，并將蛙心夾的線頭通過滑輪連至張力換能器的應(yīng)變梁上，肌肉張力換能器另一端與生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)通道1相連接。插管內(nèi)的液面高度應(yīng)保持在1.5 cm，并在插管上做1.5 cm高度的標(biāo)記，在此后的實(shí)驗(yàn)過程中，灌流液恒定于該高度。

1.4.3 實(shí)驗(yàn)記錄

打開BL-410生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，在菜單欄選擇“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”，在其下拉菜單中選擇“循環(huán)實(shí)驗(yàn)”，在其子菜單中選擇“蛙心灌流”。點(diǎn)擊“開始”按鈕，待心搏曲線穩(wěn)定后，添加“對(duì)照1”標(biāo)記，作為對(duì)照曲線。然后，將套管內(nèi)的任式液快速更換為2%的芹菜浸出液，同時(shí)添加“2%芹菜”標(biāo)記，待效應(yīng)出現(xiàn)并穩(wěn)定后，再將套管內(nèi)的2%的芹菜浸出液快速更換為新鮮任氏液，同時(shí)做“換液”標(biāo)記，待心搏曲線后，進(jìn)行下一個(gè)實(shí)驗(yàn)。

依照同樣的方法依次用10%、12%、20%濃度的芹菜浸出液處理蟾蜍心臟，并描計(jì)心搏曲線。

1.4.4 數(shù)據(jù)采集與統(tǒng)計(jì)處理

根據(jù)記錄的心搏曲線，用BL-410生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中的測(cè)量功能，測(cè)量離體蟾蜍心臟的心率和心博幅度（反映心肌收縮力）。數(shù)據(jù)通過MATLAB 7.0編程軟件和SPSS軟件處理。

2 結(jié)果與分析

本實(shí)驗(yàn)采用前后對(duì)照的方式，分別用2%、10%、15%、25%等4個(gè)濃度梯度的芹菜浸出液灌注蟾蜍心臟，采用BL-410生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)描記其心搏曲線。四種處理因素作用下的心搏曲線見圖1～圖4。觀察分析圖1～圖4可知，不同濃度的芹菜浸出液作用下的蟾蜍離體心臟與對(duì)照組相比，心率有微小變化；從圖1、圖2可以看出，2%、10%芹菜浸出液灌注后心搏最大振幅明顯增大，心肌收縮力增強(qiáng)；從圖3、圖4可以看出，將任氏液完全換成15%和25%芹菜浸出液后心搏最大振幅明顯減小，心肌收縮力減弱。

圖1 2%芹菜浸出液灌注心臟的心搏曲線Fig.1 Heart beat curve of the heart perfused with 2%celery lixivium

圖2 10%芹菜浸出液灌注心臟的心搏曲線Fig.2 Heart beat curve of the heart perfused with 10%celery lixivium

圖3 15%芹菜浸出液灌注心臟的心搏曲線Fig.3 Heart beat curve of the heart perfused with 15%celery lixivium

圖4 25%芹菜浸出液灌注心臟的心搏曲線Fig.4 Heart beat curve of the heart perfused with 25%celery lixivium

2.1 不同濃度的芹菜浸出液對(duì)心率的影響

不同濃度芹菜浸出液對(duì)蟾蜍離體心臟心率影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1 不同濃度芹菜浸出液對(duì)蟾蜍離體心臟心率影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果Table 1 Heart rate of Toad′s isolated heart effected by different concentration of celery lixivium次/min

對(duì)表1進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析可知，不同濃度的芹菜浸出液作用下的蟾蜍離體心臟與對(duì)照組相比，心率沒有顯著差異（p＞0.05）。

2.2 不同濃度的芹菜浸出液對(duì)心肌收縮力的影響

心臟收縮幅度大小能反映出心肌收縮力的強(qiáng)弱，即心臟收縮幅度增大時(shí)，心肌收縮力增強(qiáng)，心臟收縮幅度減小時(shí)，心肌收縮力減弱。不同濃度芹菜浸出液對(duì)蟾蜍離體心臟收縮幅度的影響見表2。

表2 不同濃度芹菜浸出液對(duì)蟾蜍離體心搏幅度影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果Table 2 Heart throbbing amplitude of Toad′s isolated heart effected by different concentration of celery lixivium g

對(duì)表2進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，可以得出不同濃度的芹菜浸出液作用下的蟾蜍離體心臟與對(duì)照組相比，收縮幅度在15%時(shí)有顯著差異（p＜0.05），在25%時(shí)有極顯著差異（p＜0.01）。

3 討論

本研究表明低濃度芹菜浸出液能使蟾蜍離體心臟的心肌收縮力增強(qiáng)，高濃度的芹菜浸出液能使蟾蜍離體心臟的心肌收縮力減弱。由于形成血壓的基本因素是心臟射血和外周阻力。而本研究中高濃度的芹菜浸出液使心肌收縮力減弱，舒張血管，直接影響到心臟射血，使射血量減少，從而降低血壓。此結(jié)果符合唐粉芳等的研究，高濃度芹菜汁可降低RHR大鼠（腎血管性高血壓大鼠）的血壓，同時(shí)也能有效舒張血管[8]。早在1991年就有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)芹菜中的芹菜素（apigenin，是一種廣泛存在的植物黃酮）可舒張血管[9]。芹菜汁的這種舒張血管作用可能是其降壓功能的機(jī)制之一。而對(duì)芹菜素的研究結(jié)果表明，其舒張血管作用主要是通過抑制鈣離子內(nèi)流實(shí)現(xiàn)的[6]。Michael等[研究發(fā)現(xiàn)，芹菜的水溶性提取物中含有大量的黃酮類物質(zhì)，其主要成分為芹菜素和毛地黃黃酮（luteolin）[10]，芹菜的降壓和舒張血管作用是否與這些生物活性物質(zhì)相關(guān)還有待于今后進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

綜合本實(shí)驗(yàn)研究和文獻(xiàn)分析可知，當(dāng)芹菜為低濃度（2%、10%）時(shí)，對(duì)心搏幅度也就是心肌收縮力沒有顯著影響；當(dāng)芹菜為高濃度（15%、25%）時(shí)，對(duì)心肌收縮力有極顯著的影響，即降壓效果明顯。如果把15%和25%的濃度完全換算成芹菜的重量，那么人們?nèi)粘Ｊ秤玫那鄄艘呀?jīng)超出這個(gè)重量。但人們不是每天都攝食芹菜，所以，偶爾的攝食對(duì)正常人的血壓不會(huì)有太大的影響，而對(duì)于高血壓患者或者有高血壓傾向的人來說，堅(jiān)持每日進(jìn)食芹菜將有助于降低血壓。

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