劉曉雯

（河南省漯河市郾城區(qū)人民醫(yī)院，河南 漯河 462300）

便潛血試驗(yàn)酶聯(lián)法與聯(lián)苯胺法做對(duì)比分析

劉曉雯

（河南省漯河市郾城區(qū)人民醫(yī)院，河南 漯河 462300）

目的 探討便潛血試驗(yàn)酶聯(lián)法與聯(lián)苯胺法結(jié)果。方法 本次醫(yī)學(xué)研究選擇我院2010年1月至2012年1月之間收治的60例便潛血試驗(yàn)患者為觀察對(duì)象，所有患者均同時(shí)接受酶聯(lián)法與聯(lián)苯胺法檢測(cè)，對(duì)比兩種方法臨床檢查結(jié)果。結(jié)果 聯(lián)苯胺法便潛血試驗(yàn)陽性檢出率為40%，酶聯(lián)法為23.4%；聯(lián)苯胺法對(duì)于動(dòng)物和人的血紅蛋白檢測(cè)結(jié)果均為陽性，酶聯(lián)法僅對(duì)人類檢測(cè)結(jié)果為陽性，兩種方法試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。結(jié)論 由本次臨床研究結(jié)果可知，聯(lián)苯胺法便潛血試驗(yàn)，盡管敏感性較好，但假陽性率較高，且特異性較差；而酶聯(lián)法可作為人類便潛血試驗(yàn)首選方法，因而具有較高的臨床推廣和應(yīng)用價(jià)值。

便潛血試驗(yàn)；酶聯(lián)法；聯(lián)苯胺法

便潛血試驗(yàn)是的是肉眼無法見到血色，消化道出血量較少，顯微鏡檢查無法發(fā)現(xiàn)，且僅含有少量被破壞紅細(xì)胞的一種出血癥狀。便潛血試驗(yàn)是臨床上較為常用的消化道出血臨床檢查依據(jù)。便潛血檢查的方法較多，但最為常用的主要包括免疫方法和化學(xué)方法兩類，其中，前者具有不收還原性藥物和飲食結(jié)構(gòu)影響和限制等顯著優(yōu)勢(shì)，而后者則會(huì)受到較多因素的影響，因而假陽性檢出率較高，特異性較差。酶聯(lián)法是近年來出現(xiàn)的一種便潛血臨床試驗(yàn)方法，該方法具有不受飲食和藥物因素影響，操作方法便捷、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)單、快速等顯著優(yōu)勢(shì)，因而受到了臨床醫(yī)學(xué)工作者和醫(yī)學(xué)理論研究人員的一種認(rèn)可。本次臨床研究對(duì)便潛血試驗(yàn)酶聯(lián)法與聯(lián)苯胺法的檢查結(jié)果進(jìn)行了分析，現(xiàn)將本次臨床研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 試劑

聯(lián)苯胺法便潛血試驗(yàn)，選用3%的過氧化氫溶液和聯(lián)苯胺冰醋酸溶液10g/U作為試驗(yàn)試劑；酶聯(lián)法便潛血試驗(yàn)，選用萬華牌速而準(zhǔn)便潛血條形試紙（萬華普曼工程有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：98020303）作為試驗(yàn)器材。

1.2 方法

依據(jù)《臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)》的相關(guān)規(guī)定，嚴(yán)格執(zhí)行聯(lián)苯胺法便潛血試驗(yàn)。酶聯(lián)法便潛血試驗(yàn)方法為：依據(jù)說明書嚴(yán)格執(zhí)行操作，糞便液混合搖勻后，將其滴入測(cè)試窗口內(nèi)，靜置5min，對(duì)反應(yīng)區(qū)變化情況進(jìn)行觀察。若反應(yīng)線和控制線均未出現(xiàn)，則視為無效，需要重新進(jìn)行試驗(yàn)；若僅顯示處控制線，則確定為陰性；若同時(shí)出現(xiàn)反應(yīng)線和控制線，則確定為陽性。

1.3 標(biāo)本來源

本次醫(yī)學(xué)研究選擇我院2010年1月至2012年1月之間收治的60例便潛血試驗(yàn)患者為觀察對(duì)象，所有患者均同時(shí)接受酶聯(lián)法與聯(lián)苯胺法檢測(cè)。同時(shí)，從魚、雞、羊、豬四種動(dòng)物中獲取用于特異性試驗(yàn)的血紅蛋白。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS17.0軟件對(duì)本次醫(yī)學(xué)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。使用（）表示計(jì)量資料，使用單因素方差分析法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行比較分析，使用χ2檢驗(yàn)方法對(duì)計(jì)數(shù)資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，若P＜0.05，則表示數(shù)據(jù)之間差異具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 敏感性對(duì)比

酶聯(lián)法便潛血試驗(yàn)共有14例患者為陽性，約占23.4%，聯(lián)苯胺法便潛血共有24例患者為陽性，約占40%。聯(lián)苯胺法和酶聯(lián)法便潛血試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。如表1所示。

表1 聯(lián)苯胺法和酶聯(lián)法便潛血試驗(yàn)靈敏性對(duì)比分析[n/%]

2.2 特異性對(duì)比

分別對(duì)四種動(dòng)物和人類的血蛋白液的肌肉組織和血液樣品進(jìn)行聯(lián)苯胺法和酶聯(lián)法檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果證實(shí)，人血紅蛋白液聯(lián)苯胺法和酶聯(lián)法檢測(cè)結(jié)果均為陽性，而魚、雞、羊、豬4種動(dòng)物的聯(lián)苯胺法檢測(cè)結(jié)果為陰性，酶聯(lián)法檢測(cè)結(jié)果為陽性。4種動(dòng)物血液辨別血紅蛋白液分別接受聯(lián)苯胺法和酶聯(lián)法便潛血試驗(yàn)，如表2所示。

2.3 抗干擾試驗(yàn)

將維生素C加入濃度為的3.0g/mL血紅蛋白液中，從而配置成維生素C濃度分別為5.0 mg/mL和2.5mg/mL的兩種血紅蛋白液試驗(yàn)樣品。分別通過酶聯(lián)法和聯(lián)苯胺法對(duì)兩種濃度不同血紅蛋白液試驗(yàn)樣品進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果證實(shí)，聯(lián)苯胺法檢測(cè)結(jié)果會(huì)受到大劑量維生素C的影響，產(chǎn)生反應(yīng)抑制作用，從而降低Hb含量，并提高假陽性檢出率；而酶聯(lián)法檢測(cè)結(jié)果則全部為陰性，不會(huì)受到維生素C劑量的影響。

表2 聯(lián)苯胺法與酶聯(lián)法便潛血試驗(yàn)特異性對(duì)比分析[n/%]

3 討 論

便潛血試驗(yàn)檢測(cè)的主要化學(xué)依據(jù)在于：血紅蛋白與過氧化物酶的基本作用相近，能夠?qū)^氧化氫氧化某些色原顯色產(chǎn)生催化作用。聯(lián)苯胺無色孔雀綠是臨床上較為常用的色原。聯(lián)苯胺法就是以上述作用原理為基礎(chǔ)上，通過聯(lián)苯胺為色原，進(jìn)行便潛血試驗(yàn)的一種技術(shù)[1]。酶聯(lián)法是針對(duì)便潛血試驗(yàn)的特異性特點(diǎn)而逐漸發(fā)展成熟起來的一種免疫學(xué)檢測(cè)方法，其主要作用原理在于以克隆抗體和單克隆為基礎(chǔ)上，僅僅針對(duì)人體糞便樣品中血紅蛋白的特異性檢測(cè)，而不針對(duì)其他種類血紅蛋白，因而使用酶聯(lián)法進(jìn)行便潛血試驗(yàn)時(shí)，只有在糞便樣品中含有血紅蛋白時(shí)，其便潛血試驗(yàn)結(jié)果才能夠顯示為陽性，而其他試驗(yàn)結(jié)果均為陰性[2]。臨床醫(yī)學(xué)研究結(jié)果表明，消化道癌癥患者便潛血檢測(cè)陽性率通常在95%以上，而消化道潰瘍患者便潛血檢測(cè)的陽性率應(yīng)在40%～70%，糞便中的微量血紅蛋白檢測(cè)對(duì)于消化道潰瘍和消化道腫塊等胃腸系統(tǒng)出血性疾病的早期診斷和治療過程中具有十分重要的意義。

通過聯(lián)苯胺法進(jìn)行糞便隱血測(cè)試會(huì)在一定程度上受到多種復(fù)雜因素的影響，通常情況下，要求首檢人間在檢測(cè)前3d內(nèi)要避免食用維生素C、含有過氧化物酶類的新鮮蔬菜（包括木耳、油菜、芹菜、韭菜、菠菜、西紅柿和胡蘿卜等）以及動(dòng)物肉類，但是，這一要求通常無法進(jìn)行準(zhǔn)確的界定和嚴(yán)格顯示。由此可見，使用聯(lián)苯胺法進(jìn)行便潛血測(cè)定仍然存在一定的限制，具有中高敏感性、假陽性檢出率較高且特異性較差，因而不能進(jìn)行0.18～2g/mL的微量出血測(cè)試，而這一觀點(diǎn)在本次臨床研究中也得到了可靠的證明。糞便潛血測(cè)試在消化系統(tǒng)腫瘤和消化道出血的臨床檢查和診斷過程中具有較高的應(yīng)用價(jià)值和參考意義，這就需要試驗(yàn)具有操作簡(jiǎn)便，特異性和靈敏度高的優(yōu)勢(shì)，且試驗(yàn)過程中應(yīng)選擇對(duì)操作人員無明顯危害的檢測(cè)試劑。由本次臨床研究結(jié)果可知，試驗(yàn)酶聯(lián)法進(jìn)行便潛血測(cè)試，具有較高的準(zhǔn)確性、特異性和靈敏程度，且檢測(cè)結(jié)果與臨床診斷的符合率較高，不會(huì)受到食物和藥物因素的影響。

由本次臨床研究結(jié)果可知，聯(lián)苯胺法便潛血試驗(yàn)靈敏度能夠達(dá)到100%，特異性為83.3%，陽性檢出率為40%；酶聯(lián)法便潛血試驗(yàn)靈敏度為93.8%，特異性為100%，陽性檢出率為23.4%?？梢?，聯(lián)苯胺法便潛血試驗(yàn)技術(shù)，盡管操作較為簡(jiǎn)單，且靈敏性較高，但假陽性率較高，特異性較差，同時(shí)，聯(lián)苯胺法還具有一定的致癌危險(xiǎn)，因而臨床應(yīng)用價(jià)值有限。而酶聯(lián)法則具有較強(qiáng)的特異性，結(jié)果更加易于判讀，且檢驗(yàn)結(jié)果獲得速度較快，操作簡(jiǎn)單易行，靈敏性和特異性較強(qiáng)，同時(shí)，不會(huì)受到某些藥物、維生素C和鐵劑等物質(zhì)的影響，因而具有較高的臨床推廣和應(yīng)用價(jià)值[3]。

[1] 盧克友.糞便隱血試驗(yàn)單克隆抗體法與聯(lián)苯胺法的比較[J].福建醫(yī)藥雜志,2008,30(2):109-110.

[2] 何淑霞,張冬青.便潛血單克隆抗體法與聯(lián)苯胺法特異性比較[J].寧夏醫(yī)學(xué)雜志,2001,23(8):472-473.

[3] 石晶,張麗霞,于素云.糞便潛血單克隆抗體一步實(shí)驗(yàn)法[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,2009,22(3):192-193.

R446.13+3

B

1671-8194（2013）35-0145-02