柴立靜

（中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼陽(yáng)中心醫(yī)院眼科，遼寧 遼陽(yáng) 111000）

Fas-Ligand和p53在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)與臨床意義

柴立靜

（中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼陽(yáng)中心醫(yī)院眼科，遼寧 遼陽(yáng) 111000）

目的探究Fas-Ligand和p53在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)與臨床意義。方法用S-P 方法檢測(cè)38例視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤及8例正常視網(wǎng)膜組織中Fas、FasL 及p53 蛋白的表達(dá)。結(jié)果Fas-Ligand在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中和正常視網(wǎng)膜細(xì)胞中均為高表達(dá)，差異無(wú)顯著性(P＞0.05)；p53在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)較強(qiáng)，而在正常視網(wǎng)膜組織中的表達(dá)極弱，差異有極顯著性(P＜0.002)。結(jié)論Fas-Ligand在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中和正常視網(wǎng)膜細(xì)胞中均為高表達(dá)，這與其在腫瘤細(xì)胞中免疫逃逸機(jī)制具有相關(guān)性，p53在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)明顯高于正常視網(wǎng)膜組織，與其能夠抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)腫瘤成長(zhǎng)具有相關(guān)性。

Fas-Ligand和p53；視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤；表達(dá)與臨床意義

視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤是一種發(fā)生在兒童眼部的惡性腫瘤，其發(fā)生與Rb等位基因的缺失和失活具有直接聯(lián)系[1]。通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)Lm可以被多種腫瘤細(xì)胞用于表達(dá)，其對(duì)于毒性淋巴細(xì)胞的攻擊性具有顯著減弱作用，是腫瘤細(xì)胞逃避免疫細(xì)胞攻擊的新機(jī)制，在腫瘤的發(fā)展過(guò)程中具有重要作用。p53是一種癌基因產(chǎn)物，其具有抑制細(xì)胞凋亡的作用，在許多惡性腫瘤中具有高表達(dá)的特點(diǎn)。目前對(duì)于Fas-Ligand和p53在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)的相關(guān)報(bào)道還是比較少，本文對(duì)于Fas-Ligand和p53在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)與臨床意義進(jìn)行了探究，具體報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤35例，正常視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤10例，在標(biāo)本進(jìn)行處理前要先采用甲醛進(jìn)行固定和石蠟進(jìn)行包埋處理。

1.2 方法

對(duì)于石蠟標(biāo)本進(jìn)行切片處理，切片厚度為4μm，然后進(jìn)行脫蠟和水化處理，保證內(nèi)源性酶活性得到徹底消除，使用血清進(jìn)行封閉處理，放在檸檬酸鈉緩沖液中進(jìn)行微波修復(fù)，修復(fù)時(shí)間為5min 2次，在此過(guò)程中分別加入一抗Lm和p53，放在溫度為4℃的條件進(jìn)行過(guò)夜，然后加入生物素化的二抗，放在溫室中進(jìn)行孵育，孵育時(shí)間為15min左右，再加入酶復(fù)合物，放在溫室下進(jìn)行15min左右的孵育，DAB 顯色，蘇木素復(fù)染[2]。將圖像經(jīng)過(guò)彩色分析儀系統(tǒng)進(jìn)行處理。染色范圍分為0～4。0表示陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為0，1表示細(xì)胞數(shù)在1%～25%，2表示細(xì)胞數(shù)在26%～50%，3表示細(xì)胞數(shù)在51%～75%，4表示細(xì)胞數(shù)在76%～100%[3]。

陽(yáng)性對(duì)照：FasL 用睪丸組織，p53 用食管鱗癌組織，結(jié)果均陽(yáng)性?？瞻讓?duì)照：BPS代替一抗，結(jié)果均陰性。每次實(shí)驗(yàn)均設(shè)對(duì)照。1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

比較兩組之間表達(dá)的差異，用秩和檢驗(yàn)，取P＜0.05為差異有顯著性的標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié) 果

Fas-Ligand在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中和正常視網(wǎng)膜細(xì)胞中均為高表達(dá)，差異無(wú)顯著性(P＞0.05)；p53在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)較強(qiáng)，而在正常視網(wǎng)膜組織中的表達(dá)極弱，差異有極顯著性(P＜0.002)，具體情況見表1。

表1 Fasl 及p53 在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤及正常視網(wǎng)膜組織中的表達(dá)

3 討 論

凋亡是細(xì)胞死亡的一個(gè)過(guò)程，是機(jī)體對(duì)于自身穩(wěn)定性進(jìn)行調(diào)節(jié)的一種機(jī)制，其與腫瘤的發(fā)展具有密切聯(lián)系。FasL是誘導(dǎo)細(xì)胞實(shí)現(xiàn)凋亡的重要途徑之一，其在許多細(xì)胞中具有高表達(dá)性的特點(diǎn)。其可以通過(guò)誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞的凋亡，使腫瘤細(xì)胞逃避免疫系統(tǒng)的監(jiān)控。Fas-Ligand在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中和正常視網(wǎng)膜細(xì)胞中均為高表達(dá)，可以使視網(wǎng)膜母細(xì)胞逃避免疫系統(tǒng)的攻擊，使其在進(jìn)行失控性增長(zhǎng)時(shí)提供幫助，對(duì)于腫瘤的發(fā)展具有重要作用[4]。

p53在細(xì)胞周期中起到重要作用，一般性化學(xué)方法不能檢測(cè)到其存在性。其不能起到誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用，反而能夠促進(jìn)細(xì)胞的增生。從p53在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)明顯高于正常視網(wǎng)膜組織可以看出，其對(duì)于誘導(dǎo)細(xì)胞的凋亡具有重要阻礙作用，與腫瘤的發(fā)生具有關(guān)聯(lián)性。

綜上所述，F(xiàn)as-Ligand在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中和正常視網(wǎng)膜細(xì)胞中均為高表達(dá)，這與其在腫瘤細(xì)胞中免疫逃逸機(jī)制具有相關(guān)性，p53在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)明顯高于正常視網(wǎng)膜組織，與其能夠抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)腫瘤成長(zhǎng)具有相關(guān)性。

[1] Kawahara A,Kobayashi T,Nagata S.Inhibition of Fas-induced apoptosis by bcl-2 [J].Oncogene,1998,17(20)∶2549-2554.

[2] Thomas SG,Thomas B,Sharon M,et al.Fas ligand-induced apoptosis as a mechanism of immune privilege[J].Science,1995,270 (17)∶1189-1192.

[3] Kondo E,Yoshino T,Yamadori I,et al.Expression of bcl-2 protein and Fas antigen in non-Hodgkin's lymphomas[J].Am J Pathol, 1994,145(2)∶330-337.

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1671-8194（2013）13-0117-01