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        陽(yáng)桃根中化學(xué)成分類型的試驗(yàn)研究

        2013-06-14 07:02:16溫慶偉鄭妮陳春霞梁杏梅黃仁彬
        中藥與臨床 2013年2期
        關(guān)鍵詞:萜類石油醚提取液

        溫慶偉,鄭妮,陳春霞,梁杏梅,黃仁彬

        陽(yáng)桃根為酢漿草科植物楊桃Averrhoa carambola L.的干燥根,分布于云南、廣東、廣西、福建及臺(tái)灣、馬來(lái)西亞、巴西、菲律賓等國(guó)家和地區(qū)[1]。廣西作為楊桃的主產(chǎn)地之一,資源相當(dāng)豐富。在民間,陽(yáng)桃根主要用于治療風(fēng)濕痹痛,骨節(jié)風(fēng),癱瘓不遂,慢性頭風(fēng),心胃氣痛,遺精,白帶等。到目前為止,對(duì)陽(yáng)桃根化學(xué)成分的了解較少,僅見報(bào)道它含有β-谷甾醇,羽扇豆醇和1,5-二羥基-6,7-二甲氧基-2-甲基蒽醌-3-O-β-吡喃葡萄糖苷[2~3]。陽(yáng)桃葉中主要含有脂肪酸類、脂肪烷烴類及萜類等揮發(fā)性成分,carambolaflvone, isositexin[4~5]。我們的前期藥理學(xué)研究表明:它的醇提取物、水提取物的多糖及其醇提液的三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇等萃取部位,均具有明顯降低動(dòng)物血糖水平的作用[6~7]。因此,進(jìn)行陽(yáng)桃根化學(xué)成分類型的試驗(yàn)研究,將會(huì)對(duì)了解它的物質(zhì)組成及確定其單體化合物分離、純化方法提供有力的依據(jù),也為今后明確它的降血糖藥效物質(zhì)奠定一些基礎(chǔ)。

        1 實(shí)驗(yàn)材料

        1.1 材料

        陽(yáng)桃根在2010年6月收集于廣西靈山縣。經(jīng)過(guò)廣西中醫(yī)藥研究院賴茂祥教授鑒定為酢漿草科植物楊桃Averrhoa carambola L.的干燥根。曬干,粉碎后,備用。

        石油醚(60~90℃)、95%乙醇、乙酸乙酯、甲醇、氫氧化鈉、醋酐、三氯甲烷、濃硫酸、溴酚藍(lán)、三氯化鐵、鐵氰化鉀、明膠、氯化鈉、碘化汞鉀、碘化鉍鉀、硅鎢酸、濃鹽酸、鎂粉、氫氧化鉀、三氯化鋁、濃氨水、硼酸、醋酸鎂、鹽酸羥胺、吡啶、亞硝酰鐵氰化鈉、3,5-二硝基苯甲酸、苦味酸、茚三酮、硫酸銅、氯化鈉、酒石酸鉀、α-萘酚均為國(guó)產(chǎn)分析純。精密試紙(0.5-5.0,上海三愛(ài)思試劑有限公司)。

        1.2 儀器

        CAMAG薄層色譜儀(瑞士);電子天平(余姚市金諾天平儀器有限公司)。

        2 方法與結(jié)果

        2.1 樣品溶液制備流程

        圖1 樣品溶液制備流程圖

        2.2 樣品溶液制備方法

        按2.1樣品溶液制備流程(見圖1)進(jìn)行樣品溶液的制備,具體方法如下。

        ⑴石油醚提取液

        取藥材粉末10 g,加石油醚(60~90 ℃)100 mL,索氏提取4小時(shí),濾渣揮去石油醚,備用;濾液放在表面皿上揮發(fā),殘留物進(jìn)行三萜類、甾體、揮發(fā)油與油脂等成分的檢查。

        ⑵乙醇提取液

        取步驟⑴濾渣,加95%乙醇100 mL,用水浴加熱回流提取2小時(shí),濾過(guò),濾渣備用;直接取部分濾液進(jìn)行酚類、鞣質(zhì)、有機(jī)酸等成分的檢查;將剩余濾液減壓濃縮至浸膏狀,置于蒸發(fā)皿中,加少量5%鹽酸攪拌萃取,得萃取液A;分取稀鹽酸溶解部分進(jìn)行生物堿的理化試驗(yàn)。萃取后的殘?jiān)譃閮刹糠郑?/p>

        一部分以少量乙醇(約10 mL)溶解,得溶液B,進(jìn)行黃酮、蒽醌、苷等類成分的檢查;另外一部分溶于少量乙酸乙酯(約15 mL)中,得溶液C,并轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,加5%NaOH 15 mL振搖,使酚性物質(zhì)、有機(jī)酸等溶入下層堿水溶液中,分取乙酸乙酯層,用蒸餾水洗掉堿性,進(jìn)行香豆素、萜類及萜類內(nèi)酯化合物等成分的檢查。

        ⑶水浸液

        取步驟⑵所得的濾渣,加水50 mL,50~60 ℃水浴加熱1小時(shí)左右,濾過(guò),濾液進(jìn)行糖類、皂苷、氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)等成分的檢查。

        2.3 結(jié)果

        取按2.2樣品溶液制備方法所制得的六種樣品溶液按文獻(xiàn)的方法[8~10],進(jìn)行試驗(yàn),結(jié)果見表1-3。

        表1 石油醚提取液化學(xué)反應(yīng)試驗(yàn)結(jié)果

        表2 乙醇提取液化學(xué)反應(yīng)試驗(yàn)結(jié)果

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        表3 水提取液化學(xué)反應(yīng)試驗(yàn)結(jié)果

        3 討論

        本研究的結(jié)果表明:陽(yáng)桃根中石油醚(60~90℃)提取液含有油脂、甾體或三萜類(可能是苷元),不含揮發(fā)油;乙醇提取液中含有酚類、有機(jī)酸、鞣質(zhì)、香豆素、萜類或萜類內(nèi)酯、甾體和三萜類成分,但生物堿、黃酮類成分反應(yīng)現(xiàn)象不明顯;水提取液中皂苷類成分反應(yīng)明顯,并含糖、多糖、苷類、氨基酸、多肽等,只有蛋白質(zhì)、多肽類化學(xué)成分反應(yīng)現(xiàn)象不明顯。由此可見,陽(yáng)桃根的化學(xué)成分基本與陽(yáng)桃葉的成分一致[11]。

        甾體、有機(jī)酸、酚類及多糖等少數(shù)幾類化學(xué)成分的反應(yīng)現(xiàn)象比較明顯,它們?cè)谠撝参镏械暮靠赡茌^高;而其他各類成分的反應(yīng)現(xiàn)象均不是十分顯著,含量可能很低。因此,在對(duì)這些單體化學(xué)物的富集、分離及純化時(shí),一定要注意選擇好色譜柱(或填料)、洗脫劑的類型,這樣才能達(dá)到更好的分離效果。

        [1] 江蘇新醫(yī)學(xué)院編.中藥大詞典上冊(cè)[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1996:977.

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        [5] Araho, D., Miyakoshi, M., Chou, W., et al.A new flavone C-glycoside from the leaves of Averrhoa carambol [J].Natural Medicines, 2005, 59 (3): 113.

        [6] 黃桂紅,黃仁彬.陽(yáng)桃根醇提物對(duì)糖尿病小鼠血糖及脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的影響[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2009, 20 (11): 2730.

        [7] 黃桂紅,黃純真,黃仁彬.陽(yáng)桃根多糖對(duì)糖尿病小鼠胰島素及胸、脾指數(shù)的影響[J].中國(guó)藥師, 2009, 12(7):848.

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        [11] 廖彭瑩,盧遠(yuǎn)飛,何俞勤,等.陽(yáng)桃葉的化學(xué)成分預(yù)試驗(yàn)研究[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2010,19(7):37.

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