袁盛勇，孔 瓊，李 珣，沈登榮，陳 斌，田學(xué)軍

(1.紅河學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，云南蒙自 661100;2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護學(xué)院昆明 650201)

榕母管薊馬Gynaikothrips ficorum屬于纓翅目Thysanoptera 管薊馬科Phlaeothripidae，是危害榕樹的一種重要害蟲之一，在我國主要分布于云南、福建、廣東、海南、江西、廣西等省區(qū)(楊希，1994)。榕母管薊馬在云南省的危害日益加重(梁貴紅等，2007)，云南蒙自地區(qū)危害最為嚴(yán)重，榕母管薊馬主要危害新梢及其嫩葉，導(dǎo)致嫩葉卷曲形成“餃子狀”蟲癭，最終樹葉變硬枯死。云南榕母管薊馬不同地理種群的遺傳分化研究發(fā)現(xiàn)蒙自種群與云南其它地理種群存在明顯差異(張利娟等，2012)。目前對榕母管薊馬的田間防治主要以化學(xué)防治為主，配合栽培管理合理修剪和自然天敵防治為輔的防治方法(趙國富，2008)。白僵菌寄主范圍廣，能夠侵染鱗翅目Lepidoptera、鞘翅目 Coleoptera、膜翅目 Hymenoptera、同翅目Homoptera、雙翅目Diptera 等15個目，149科的700余種昆蟲及蜱螨目的6科、10余種螨和蜱(蒲蟄龍，1997)。球孢白僵菌Beauveria bassiana常用于防治森林白蟻(柯云玲等，2011)、棕尾別麻蠅Boettcherisca peregrine(王松田等，2009)、斜紋夜蛾P(guān)rodenia litura(Fabricius)(羅成等，2011)、玉米螟Ostrinia furnacalis Guenée(張振鐸等，2010)、松褐天牛Monochamus alternatus(丁德貴等，2007)、火紅蟻Solenopsis invicta(楊佳后等，2009)、蠐螬Holotrichia parallela(林華峰等，2006)、桔小實蠅Bactrocera dorsalis(Hendel)(潘志萍等，2008)和西花薊馬 Frankliniella occidentalis(袁盛勇等，2010)等農(nóng)林害蟲。目前未見球孢白僵菌對榕母管薊馬的報道，本實驗利用球孢白僵菌開展榕母管薊馬成蟲和若蟲的致病性研究，為利用該菌防治榕母管薊馬提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 供試菌種

球孢白僵菌MZ050724 菌株保存于紅河學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院昆蟲病原體實驗室。

1.1.2 供試蟲源

實驗用榕母管薊馬成蟲和若蟲采自紅河學(xué)院校園內(nèi)小葉榕樹葉內(nèi)。

1.2 試驗方法

1.2.1 菌株的擴繁和分生孢子液配制

采用PPDA 培養(yǎng)基，菌種接種于培養(yǎng)皿中并用封口膜封好，置于26℃相對濕度為85%的人工氣候箱內(nèi)，培養(yǎng)10～15 d 后供實驗用，取培養(yǎng)10～15 d 的菌塊放入燒杯中用無菌水+兩滴0.05%吐溫－20，過濾除去菌絲和雜質(zhì)，稀釋成測定致病性所需的分生孢子液濃度。

1.2.2 五個菌株對榕母管薊馬成蟲和幼蟲的室內(nèi)致病性研究

配制4.5×105、4.5×106、4.5×107和4.5×108個/mL 4個處理濃度，成蟲和若蟲的每個處理濃度各重復(fù)3次，每個重復(fù)挑取榕母管薊馬成蟲和若蟲各30頭(成蟲和若蟲分開單獨接種)，并用0.05%吐溫－20+無菌水作為對照。在培養(yǎng)皿中放濾紙保濕，采用噴霧法接種，在濾紙、榕樹葉和榕母管薊馬成蟲和若蟲蟲體上噴灑配制好的分生孢子液，用保鮮膜封口，飼養(yǎng)于26℃下的人工氣候箱中，每24 h 觀察記錄死蟲數(shù)，連續(xù)觀察8 d。

1.3 數(shù)據(jù)分析方法

應(yīng)用SPSS13.0 統(tǒng)計軟件分別對劑量和時間作線性回歸分析，建立直線回歸模型，分別計算劑量效應(yīng)LC50和時間效應(yīng)LT50。

2 結(jié)果與分析

2.1 球孢白僵菌對榕母管薊馬成蟲的致病性

球孢白僵菌MZ050724 菌株對榕母管薊馬成蟲的致病性測定結(jié)果如表1 所示，第2 d 出現(xiàn)成蟲死亡，各處理濃度下第8 d 的致病性最強，4.5×105～4.5×108個/mL 下的累計校正死亡率分別是56.52%，68.57%，74.75%和88.56%，說明孢子濃度越高，死亡率越高，致病性相應(yīng)增強;如表3 所示，其致死中時間LT50分別7.5 d，6.39 d，5.17 d和4.52 d，隨著分生孢子濃度的增加，致死中時間LT50逐漸縮短。如表2 所示，第5～8 d的致死中濃度LC50分別是3.6041×108個/mL，3.5816×107個/mL，3.2289×106個/mL和2.2417×105個/mL，說明隨著接種后時間推移，致死中濃度LC50逐漸減小。

表1 球孢白僵菌分生孢子不同濃度對榕母管薊馬成蟲的致病性Table1 Pathogenicity of Beauveria bassiana to adult of Gynaikothrips ficorum different concentrations

表2 球孢白僵菌分生孢子對榕母管薊馬成蟲的致死中濃度Table 2 LC50of Beauveria bassiana against adult of Gynaikothrips ficorum

表3 球孢白僵菌分生孢子對榕母管薊馬成蟲的致死中時間Table 3 LT50of Beauveria bassiana against adult of Gynaikothrips ficorum

2.2 球孢白僵菌對榕母管薊馬若蟲的致病性

球孢白僵菌MZ050724 菌株對榕母管薊馬若蟲進行致病性測定結(jié)果如表4，表5和表6 所示，第2 d 若蟲出現(xiàn)死亡，在4.5×108個/mL 下的累計校正死亡率為16.40%，隨著接種后時間的延長，第8 d 時4.5×105～4.5×108個/mL 下的累計死亡率均達(dá)到最大，其分別為53.01%，65.24%，71.85%和83.46%。在4.5×105～4.5×108個/mL 下的致死中時間LT50依次是7.78 d，6.64 d，5.35 d和4.85 d，隨著濃度增加，致死中時間逐漸縮短。接種后從第5～8 d 該菌對若蟲的致死中濃度LC50逐漸減小，分別是3.7836×108個/mL，3.9153×107個/mL，3.4586×106個/mL和2.9441×105個/mL。

表4 球孢白僵菌分生孢子不同濃度對榕母管薊馬若蟲的致病性測定Table4 Pathogenicity of Beauveria bassiana to larvae of Gynaikothrips ficorum different concentrations

表5 球孢白僵菌分生孢子對榕母管薊馬若蟲的致死中濃度Table 5 LC50of Beauveria bassiana against larvae of Gynaikothrips ficorum

表6 球孢白僵菌分生孢子對榕母管薊馬若蟲的致死中時間Table 6 LT50of Beauveria bassiana against larvae of Gynaikothrips ficorum

3 結(jié)論與討論

球孢白僵菌MZ050724 菌株對榕母管薊馬成蟲和若蟲有較強的致病性，累計校正死亡率均大于80%以上，該菌對成蟲的致病性比若蟲的強。袁盛勇等(2010)報道蠟蚧輪枝菌MZ041024 菌株對棕櫚薊馬若蟲的毒力效果相對強于對成蟲的毒力效果，袁盛勇等(2010)報道蠟蚧輪枝菌MZ041024 菌株對西花薊馬的毒力若蟲強于成蟲，以上結(jié)論與球孢白僵菌MZ050724 菌株對榕母管薊馬致病性成蟲強于若蟲的結(jié)論不一致。高濃度比低濃度致病力強，說明了高濃度的球孢白僵菌孢子對于成功侵染榕母管薊馬的成蟲和若蟲的成功率至關(guān)重要，因為高濃度的孢子提高了單位昆蟲體表球孢白僵菌的孢子數(shù)，增加了球孢白僵菌孢子侵染榕母管薊馬成蟲和若蟲體表形成附著孢的幾率，提高了球孢白僵菌的致病力。從實驗結(jié)果看，該菌對成蟲的致病性要強于對若蟲的致病性，這可能主要原因是在接種后若蟲出現(xiàn)蛻皮，在球孢白僵菌分生孢子菌絲還未侵入表皮時，幼蟲蛻皮而使分生孢子離開蟲體，導(dǎo)致致病性下降。從成蟲與若蟲的致死中濃度LC50和致死中時間LT50來看該菌株的分生孢子作為防治榕母管薊馬的有效成分時，孢子濃度越高，殺蟲速度越快，殺蟲數(shù)量越多。但本實驗數(shù)據(jù)綜合表明，防治分生孢子濃度選擇在108個/mL 最好。因此，球孢白僵菌MZ050724 菌株很有可能將成為防治榕母管薊馬的一種重要的生物防治手段。

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