田玉玲，雷力民（.廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院檢驗科，廣西南寧 5300；2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西南寧 53000）

珠蛋白生成障礙性貧血（下稱地貧）是一組由于生成血紅蛋白（Hb）的珠蛋白肽鏈的結(jié)構(gòu)異常或合成肽鏈速率的改變，而引起血紅蛋白功能異常所致的疾病，是世界上最常見和發(fā)病率最高的一種遺傳性血紅蛋白病。雖然地貧的基因診斷已被應(yīng)用于臨床，成為大醫(yī)院診斷地貧的金標(biāo)準(zhǔn)，但是由于其操作復(fù)雜，設(shè)備要求高，費用昂貴等原因，還難于在基層常規(guī)使用，基層醫(yī)院仍以血紅蛋白電泳篩查為主。全自動瓊脂糖凝膠電泳系統(tǒng)通過與健康人的血紅蛋白圖譜進(jìn)行比較，可發(fā)現(xiàn)異常血紅蛋白區(qū)帶如：HbH，HbE，HbBart s，HbS，HbD和 HbC等異常血紅蛋白。由于其分辨率高、掃描定量準(zhǔn)確，地貧的檢出率和準(zhǔn)確度將大大提高，對地貧具有較高的診斷價值。本文就2010年1月至2011年12月本院938例門診進(jìn)行婚前檢查及產(chǎn)前檢查人員的血紅蛋白電泳的結(jié)果進(jìn)行分析，報道如下。

1 材料與方法

1.1 檢測對象 2010年1月至2011年12月本院門診進(jìn)行婚前檢查及產(chǎn)前檢查人員938例，年齡在23歲至35歲之間，其中男136例，占14.5%；女802例，占85.5%。

1.2 儀器與方法

1.2.1 儀器與試劑 法國Sebia公司生產(chǎn)的Hydrasys全自動血紅蛋白電泳儀，掃描儀為EPSON1640SU型，試劑為Sebia公司提供的配套試劑。

1.2.2 方法 采用乙二胺四乙酸二鉀（EDTA－K2）抗凝血標(biāo)本，用生理鹽水洗滌3次，吸取10μL紅細(xì)胞加入150μL的溶血素中搖勻，取10μL溶血液注入加樣孔，由儀器自動點樣、電泳、染色、脫色及烘干。通過自動掃描儀分析Hb各組分含量。

1.2.3 正常參考值[1]成人男女 HbA2為2.0%～3.5%，并且沒有出現(xiàn)異常血紅蛋白帶。如HbA2≤2.0%，出現(xiàn)異常血紅蛋白帶（HbH、HbBart′s），判為α地貧表型陽性；如 HbA2＞3.5%或出現(xiàn)異常血紅蛋白帶（HbF＞2.0%），則判為β地貧表型陽性。輕型β－地貧HbA2 3.5%～8%，HbF正?；蜉p度增加（不超過5%）；中間型β－地貧 HbF 5%～30%；重型β－地貧HbF 30%～90%[2]。若出現(xiàn)其他異常血紅蛋白區(qū)帶則判為異常血紅蛋白病。

2 結(jié) 果

938例血紅蛋白電泳結(jié)果中檢出246例異常Hb，檢出率為26.22%，包括α地貧表型陽性共計35例，檢出率3.73%，占血紅蛋白病的14.6%，其中 HbA2≤2.0%，出現(xiàn) HbH 的33例；檢出HbA2正常，出現(xiàn)HbH的2例。β地貧表型陽性206例，檢出率21.9%，占血紅蛋白病的83.7%%，在 HbA2＞3.5%206例合并HbF＞2.0%71例。檢出其他異常血紅蛋白病5例，檢出率0.53%，占血紅蛋白病的2.03%，其中HbE組3例，HbG組1例，HbD組1例。見表1。

表1 246例血紅蛋白病檢出結(jié)果統(tǒng)計

3 討 論

廣西是地貧高發(fā)區(qū)，婚前、產(chǎn)前人群進(jìn)行地貧檢查、篩查顯得尤為重要。地貧是一組由于控制血紅蛋白肽鏈mRAN的量缺乏，使蛋白鏈合成部分受抑或完全抑制而引起的遺傳性溶血性貧血，分為α－地貧和β－地貧。本組檢出α－地貧35例HbH病，有貧血、肝脾腫大，應(yīng)對婚前、產(chǎn)前人群及早作產(chǎn)前檢查，可避免重型α地貧（Hbart′s胎兒水腫綜合征）患兒的出生。α－地貧標(biāo)準(zhǔn)型和靜止型患兒在出生后3～6個月HbBart′s區(qū)帶消失，實際上，在出生半年后用電泳法檢出的只有HbH病。HbH病表現(xiàn)為血紅蛋白電泳中出現(xiàn)HbH區(qū)帶或HbH＋Hb－Bart′s區(qū)帶。

β－地貧是由于β鏈合成的減少表現(xiàn)為HbA2增高，輕型β地貧HbF有時增高，中間型和重型β地貧HbF明顯增高。全自動電泳系統(tǒng)對HbA2的分辨清晰，區(qū)帶集中；同時對HF的分辨率也大大提高，高于一般醋酸纖維薄膜電泳，對HbF含量的敏感性，可基本代替HF堿變性試驗，使Hb分析更簡便，快捷[3]。本組檢出β－地貧206例，對其中13例重型β－地貧的家系成員進(jìn)行電泳及β地貧基因分析，10例首證者為重型β地貧，另2例首證者為重型β地貧合并HbE，他們的父母雙方的HbA2定量在3.5%～5.0%范圍，因此，對于夫婦雙方均有HbA2升高者，要注意其子代可能有25%為重型β地貧，及早產(chǎn)前診斷，以避免產(chǎn)出中、重型地貧患兒。

目前，地貧的實驗室檢查手段以血細(xì)胞分析、血紅蛋白電泳和基因診斷為主。血細(xì)胞分析用于篩查，進(jìn)一步進(jìn)行血紅蛋白電泳，結(jié)果異常者才進(jìn)行基因診斷以便確診，但分子生物學(xué)技術(shù)要求條件高方法煩瑣，尚不能廣泛應(yīng)用于各級醫(yī)院特別是基層醫(yī)院。因此，血紅蛋白電泳在地貧的篩查中起到非常重要的作用。根據(jù)相關(guān)的報道，血紅蛋白電泳篩查出的α、β地貧與地貧基因診斷符合率：α地貧表型陽性符合率60.5%，β地貧表型陽性符合率80%，HbH病符合率100%[4]?？梢杂行У睾Y查出高危夫婦（夫婦是同型地貧者），同時還可篩查出各種異常血紅蛋白，如 HbBart′s、HbH、HbE、HbJ、HbG、HbCS等。其他異常Hb雖然數(shù)量較少，但仍不可忽視。本組病例共檢出5例異常Hb患者，包括有3例血紅蛋白電泳呈現(xiàn)HbA2高值，居21.3%～29.2%之間。由于人類的δ基因表達(dá)有限，其HbA2值一般不超過6%～8%，因此，這3例陽性標(biāo)本所測“HbA2”值應(yīng)考慮為合并有HbE的量，進(jìn)而推測這3例陽性標(biāo)本疑屬 HbE/β－地 貧[5]。HbE/β－地 貧 患 者 父 母 分 別 攜 帶 有HbE及β－地貧基因，臨床上可無癥狀或僅有輕度貧血，做基因分析后明確其診斷。2例疑屬HbG及HbD，其血紅蛋白電泳各呈現(xiàn)一條異常區(qū)帶，位于HbA和HbA2之間。它們均是由于珠蛋白基因發(fā)生點突變，β－珠蛋白鏈上某種氨基酸被另一氨基酸取代，使血紅蛋白的性質(zhì)和功能發(fā)生變化而引起的疾病。本組資料顯示，地貧在我省檢出率較高，938例受檢者中即檢出246例，檢出率為26.16%。其中β－地貧檢出率最高，為206例，檢出率為21.9%，其次為α－地貧，35例，檢出率為3.73%，其他異常血紅蛋白病5例，占的0.53%。

綜上所述，血紅蛋白病，尤其是地貧是本地區(qū)常見的遺傳性疾病，目前除干細(xì)胞移植外，尚無其他有效的根治方法。本文通過對938例樣本的檢測，證明了運用血紅蛋白電泳是研究和分析異常血紅蛋白的有效方法，是診斷血紅蛋白分子病不可缺少的檢測手段。瓊脂糖凝膠血紅蛋白電泳法是最為簡便的電泳方法，適用于臨床應(yīng)用，是血紅蛋白病及早檢出的必備條件。血紅蛋白電泳檢測方法的普及是降低此類疾病發(fā)病率的重要措施。應(yīng)普及市、縣級基層醫(yī)院血紅蛋白電泳技術(shù)的應(yīng)用，積極開展有關(guān)血紅蛋白病的宣傳教育和人群篩查，強化婚前檢查和產(chǎn)前檢查，對降低本地區(qū)血紅蛋白病的發(fā)病率、提高人口素質(zhì)、減輕社會、家庭的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)均有著極為重要的意義。

[1] 王小芳.全自動血紅蛋白電泳在地中海貧血篩查中的應(yīng)用價值[J] 齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2009，30（23）：2923－2924.

[2] 張之南，沈悌.血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)[M].3版.北京：科學(xué)出版社，2007：8.

[3] 段山，李洪義，陳爭，等.中國南方α－地中海貧血基因突變型研究[J].中國實驗血液學(xué)雜志，2003，11（1）：54－60.

[4] 黎彩鵬，陳泳言.血紅蛋白電泳檢測數(shù)據(jù)的進(jìn)一步統(tǒng)計分析[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志，2007，5（15）：39－40.

[5] 馬驕，李毅，謝淵，等.貴州省江口縣土家族β－地中海貧血血液學(xué)篩查[J].貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2005，（30）2：114－115.