鄧紅艷,赫蘭輝(.成都大學附屬醫(yī)院檢驗科 6008;.內蒙古自治區(qū)通遼市科爾沁區(qū)第四人民醫(yī)院檢驗科 08000)
糞便隱血試驗(FOBT)對消化道出血的診斷及消化道惡性腫瘤的篩查有重要參考價值。根據(jù)原理大致分為化學法和免疫法兩大類,其中化學法鄰聯(lián)甲苯胺法為1983年中華醫(yī)學會全國臨床檢驗方法學學術討論會推薦的方法,但易出現(xiàn)假陽性[1]。近年來發(fā)展的單克隆抗體免疫一步法得到了越來越廣泛的應用,有逐步完全取代化學法的趨勢[2]。本文對單克隆抗體法和聯(lián)苯胺法的糞便隱血試驗結果進行對比分析,現(xiàn)將結果報道如下。
1.1 標本來源 共收集患者糞便335份,其中腫瘤科115份、門診83份、消化內科42份、內分泌科37份、骨科21份、神經(jīng)內科19份、兒科18份。
1.2 試劑
1.2.1 化學法為珠海貝索公司提供的新一代匹拉米洞(Pyramidon)改良方法。
1.2.2 免疫法為萬華普曼生物工程有限公司提供的單克隆金標法。
1.3 統(tǒng)計學方法 本次試驗資料均為計數(shù)資料結果。
化學法與免疫法糞便隱血試驗結果比較見表1。
表1 各種標本顏色采用兩種方法糞便隱血試驗結果[n(%)]
貝索糞便隱血試劑盒是采用新一代匹拉米洞改良方法,解決了以前化學方法不穩(wěn)定、敏感度低、不易進行質量管理等問題。原理是利用匹拉米洞為呈色指示劑,在酸及過氧化氫溶液作用下,與血紅蛋白作用,產(chǎn)生紫藍→紫紅的顏色。Pyramidon在藥劑學上常被利用于鎮(zhèn)痛解熱口服制劑,因此它的安全性毋庸置疑。本試劑敏感度適中,每克糞便只要血紅蛋白的濃度達到500g就能檢查出來,操作簡便,并能對隱血含量做出半定量的結果,彌補了現(xiàn)有臨床糞便隱血試劑的不足和缺陷,對臨床醫(yī)生的正確診斷及追蹤和判斷治療效果有明顯的臨床價值。配有陽性對照物可進行質量控制,適合于上消化道出血臨床糞便隱血篩查及健康人群體檢。半定量糞隱血試驗有助于確定不同人群大腸癌的陽性檢出閾值,該產(chǎn)品已被中國大腸癌普查項目組選為指定專用試劑。免疫法采用抗人體血紅蛋白的單克隆抗體和多克隆抗體,特異性針對糞便樣品中的人血紅蛋白,經(jīng)試驗和臨床驗證,免疫法對豬、羊等動物血紅蛋白液檢測隱血均為陰性,對食用豬、羊等動物類血紅蛋白的糞便隱血進行測試,結果亦為陰性[3]。
由于具有過氧化物酶特性的食品、維生素C、過氧化物酶、各種動物的肉、血、肝臟富含葉綠素食品等均可對化學法產(chǎn)生干擾,造成假陽性,因此檢測前必須禁食肉類及相關藥品及食品3d。但是免疫法不受動物血紅蛋白的干擾,具有高度的特異性和準確性,能確診消化道是否有出血,且本試驗前不需禁食肉類及其他有過氧化物酶的藥品及食品,對患者來說更容易接受。
免疫法可測出樣本中微量的血紅蛋白(0.2μg/mL),這使單克隆法對人體無癥狀的消化道出血更敏感[4]。因此采用單克隆法檢測糞便隱血更有助于早期發(fā)現(xiàn)腫瘤性消化道出血,特別是早期結腸、直腸癌,糞便中帶有癌腫的微量出血是早期可以查出的惟一異常現(xiàn)象。
免疫膠體金法迄今尚少見假陽性的病例報道,故被世界衛(wèi)生組織和世界胃腸鏡檢查協(xié)會推薦做糞便隱血試驗的一種較為確定的方法[5-6]。但膠體金試驗也存在不足之處,消化道大出血患者大便往往呈柏油樣便或血便,此時用膠體金試紙檢測往往呈假陰性,因為試紙條所包被的抗體量是一定的,那么一旦超出檢測范圍就會出現(xiàn)假陰性[7]。這就是所謂的糞便隱血試驗的后帶現(xiàn)象,可以將標本進行一定倍數(shù)的稀釋后,再用膠體金法檢測,或聯(lián)合化學法同時檢測。另外,一部分上消化道出血或口腔出血的患者,由于血紅蛋白在消化道內存留的時間太長,被腸道內細菌分泌的酶所降解,使其免疫原性被破壞而失去與抗體結合的能力,可導致假陰性結果。還有少數(shù)糞便標本在含一定量蛋白時潛血呈陰性,當除去蛋白后結果呈陽性[8]。同其他檢測方法一樣,糞便隱血膠體金檢測不能對胃腸道出血性病變做出結論性診斷,只能作為篩查或輔助診斷用,對于陽性結果,應結合臨床進一步的檢查。
所以美國癌癥協(xié)會建議對50歲以上人群進行糞便隱血檢查[9-11]。如出現(xiàn)化學法陽性時則建議加做IFOBT,以幫助對消化道出血的定位,決定進一步需進行何種內鏡檢查[12]。
因此檢驗科應將化學法和免疫法聯(lián)合應用,以提高陽性的檢出率,避免漏檢,同時降低假陽性和假陰性結果。
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