代貴江 楊淑芹 于 濤

HPLC測定咳爾康口服液鹽酸麻黃堿的含量※

代貴江 楊淑芹 于 濤

目的建立測試咳爾康口服液中鹽酸麻黃堿含量的高效液相方法，并對此方法進行系統(tǒng)的方法學驗證，以確保應用該方法測試的結果準確、可靠。方法采用色譜柱：Agilent TC-C18柱（4.6×250mm，5μm，Agilent，美國），流動相：甲醇-0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液（以磷酸調至PH2.5）（5：95），檢測波長為210nm。結果鹽酸麻黃堿在2.048mg?L-～500mg?L-1范圍內線性關系良好，得到線性回歸方程為Y=1.0818X＋0.0011，相關系數(shù)為0.9993（n=7）；低、中、高濃度的精密度RSD值分別為0.27%、0.76%、0.53%；重復性RSD為0.67%；平均加樣回收率為99.31%，RSD為0.90%；供試品溶液室溫放置8h穩(wěn)定。結論本方法測定咳爾康口服液鹽酸麻黃堿的含量準確、可靠，操作簡單、用時短，可用于咳爾康口服液中鹽酸麻黃堿的含量測定。

咳爾康口服液；鹽酸麻黃堿；含量測定

咳爾康口服液是由甘草、陳皮、白術、茯苓、半夏、紫苑等混合研制而成的純中藥復方制劑[1]。諸藥合用可化痰止咳、燥濕健脾，具有良好的止咳、祛痰、平喘作用，還可驅除機體邪毒，改善患者體質。為了更好地控制咳爾康口服液的質量，確保其療效，筆者建立了一種實用、準確、可靠的HPLC檢測方法，用于檢測該制劑中有效成分鹽酸麻黃堿的含量，經過方法學驗證，該方法回收率、準確度及重現(xiàn)性均為良好，具體敘述如下。

1 實驗材料

1.1 儀器與設備Agilent 1200型高效液相色譜儀（配有脫氣機、自動進樣器、恒溫箱、液相色譜泵、柱溫箱及熒光檢測器），由Chemstation化學工作站系統(tǒng)控制（Agilent，德國）；METTLER TOLEDO AB135-S型十萬分之一天平（METTLER，瑞士）；XW-80A渦旋混合器（上海青浦滬西分析儀器廠）；TGL16M臺式高速冷凍離心機（長沙英泰儀器有限公司）；AHL-2001-P痕量型分析型超純水機（艾科浦，重慶頤洋企業(yè)發(fā)展有限公司）。

1.2 試藥與材料鹽酸麻黃堿對照品：由中國藥品生物制品檢定研究所提供，批號：1241-200001；咳爾康口服液：由黑龍江仁合堂藥業(yè)有限公司提供，批號：121015、121016、121017、121018、121019、 121022、121023、121024、121025、121026；磷酸二氫鉀：汕頭市西隴化工廠有限公司，分析純，批號：090307；磷酸：天津科密歐化學試劑有限公司，分析純，批號：110215；甲醇：美國Tedia公司，色譜純，批號：1202257；純水：自制去離子超純水。

2 方法

2.1 色譜條件色譜柱：Agilent TC-C18柱（4.6 ×250mm，5μm，Agilent，美國）；保護柱：Gemini C18（4×3.0 mm，10μm，Phenomenex，美國）；流動相：甲醇-0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液（以磷酸調至PH2.5）（5：95）；流速：1ml?min-1；柱溫：30℃；進樣量：20μl。檢測波長210nm[2]。

2.2 溶液的配制

2.2.1 對照品溶液的配制精密稱取鹽酸麻黃堿對照品10mg，置于10ml容量瓶中，加適量流動相溶解后，再用流動相稀釋至刻度線，搖勻，即得濃度為1g?L-1的鹽酸麻黃堿對照品儲備溶液，置于4℃冰箱保存。

2.2.2 供試品溶液的配制精密移取咳爾康口服液5ml，置于大孔樹脂柱上（內徑為15mm，填量為20g，填料為AB-8型大孔樹脂），用10ml水洗脫至無色，再用50%乙醇溶液15ml洗脫，收集洗脫液，40℃條件下微弱氮氣流揮干乙醇。以流動相復溶，復溶液轉移至10ml容量瓶中，用流動相定容至刻度，搖勻，即得供試品溶液。進樣前用0.22μm的微孔濾膜過濾后進樣。

2.2.3 陰性對照液制備缺少鹽酸麻黃堿的口服制劑作為陰性對照液（處方同咳爾康口服液），再按“2.2.2供試品溶液的配制”項下方法配制陰性樣品溶液。

2.3 系統(tǒng)適用性與特異性考察分別取對照品溶液、陰性對照液、供試品溶液適量，進樣20μl至色譜系統(tǒng)分析。觀察三份溶液中鹽酸麻黃堿的色譜峰情況。

2.4 線性關系考察精密移取濃度為1g?L-1的鹽酸麻黃堿對照品儲備溶液適量，用流動相逐級稀釋為500、200、80、32、12.8、5.12、2.048mg?L-1等7個濃度級別的系列鹽酸麻黃堿對照品工作溶液，進樣20μl至色譜系統(tǒng)分析，記錄各濃度的峰面積。

2.5 精密度考察配制低、中、高濃度（5.12、32、400mg?L-1）的鹽酸麻黃堿對照品工作溶液，每個濃度平行配制5份，分別進樣20μl至色譜系統(tǒng)分析，記錄峰面積。

2.6 重復性考察取一個批次的供試品，按照“2.2.2供試品溶液的配制”項下方法配制供試品溶液，平行配制6份，進樣20μl至色譜系統(tǒng)分析，記錄峰面積。

2.7 加樣回收率考察取同一份供試品溶液，已知其鹽酸麻黃堿含量為15.02mg?L-1，精密移取1ml，平行制備5份，分別加入同體積濃度為32mg?L-1的鹽酸麻黃堿對照品工作溶液，混勻，進樣20μl至色譜系統(tǒng)分析，記錄峰面積。

2.8 穩(wěn)定性考察取同一份供試品溶液，分別在室溫下放置0、2、4、6、8h后測定，記錄色譜峰。

2.9 樣品含量測定將待測樣品按上述“2.2.2樣品溶液的配制”項下方法配制，取上述配制好的樣品溶液，進樣20μl到色譜系統(tǒng)，記錄鹽酸麻黃堿的色譜圖，代入該批次標準曲線中，采用外標法計算咳爾康口服液中鹽酸麻黃堿的含量。

3 結果

3.1 系統(tǒng)適用性與特異性該色譜系統(tǒng)條件下，鹽酸麻黃堿的保留時間為10.8min，理論塔板數(shù)及分離度良好。陰性對照液中無干擾峰干擾測定，對照液與供試液中鹽酸麻黃堿的保留時間一致，該方法特異性良好，不干擾測定。色譜圖情況如圖1所示。

3.2 線性關系鹽酸麻黃堿在2.048～500mg?L-1范圍內線性關系良好，以鹽酸麻黃堿色譜峰面積為縱坐標，以系列對照品工作溶液濃度為橫坐標，進行線性回歸，得到線性回歸方程為Y=1.0818X+ 0.0011，相關系數(shù)為0.9993（n=7）。見圖2。

圖1 陰性對照液（A）、對照品溶液（B）、供試品溶液（C）的色譜圖

圖2 線性方程

3.3 精密度低、中、高濃度（5.12、32、400mg?L-1）的鹽酸麻黃堿的精密度良好，RSD分別為0.27%、0.76%、0.53%。詳見表1。

表1 鹽酸麻黃堿的精密度

3.4 重復性該方法測試鹽酸麻黃堿的重現(xiàn)性良好，RSD值為0.67%。詳見表2。

3.5 加樣回收率本實驗所得平均加樣回收率為99.31%，RSD為0.90%。詳見表3。

3.6 穩(wěn)定性供試品溶液在室溫下放置8h后穩(wěn)定。

表2 測試鹽酸麻黃堿的重現(xiàn)性

表3 平均加樣回收率(mg?L-1,%)

3.7 樣品含量測定結果測得不同批次供試品鹽酸麻黃堿的含量如表4所示。

表4 鹽酸麻黃堿的含量測定結果(mg?L-1)

4 討論

近年來，我國中藥口服液的研究較為廣泛，種類及用量明顯增加?？葼柨悼诜菏窃跍珓┗A上改進而得的口服液體制劑，服用方便、藥物吸收好、起效快、療效好，然而中藥口服液有效成分的檢測及分析還有待進一步加強研究[3]。本文研究的是HPLC方法測定咳爾康口服液中鹽酸麻黃堿的含量。結合藥典中鹽酸麻黃堿項下的含量測定方法，本文做了適當?shù)姆椒ǜ倪M，并對此方法進行系統(tǒng)的方法學驗證。本方法測定咳爾康口服液鹽酸麻黃堿的含量準確、可靠，操作簡單、用時短，可用于咳爾康口服液中鹽酸麻黃堿的含量測定。

[1] 鞏麗虹,李孟全,程艷,等.咳爾康口服液質量標準研究[J].醫(yī)學信息(上旬刊),2011,24(5)：2548-2549.

[2] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(2010年版第一部)[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社,2010：301.

[3] 石秀梅,胡俊俊,李孟全,等.咳爾康口服液中鹽酸麻黃堿含量的測定[J].中華中醫(yī)藥學刊,2010,28(8)：1649-1650.

R927.2

A

1673-5846(2013)04-0209-03

牡丹江醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院藥劑科，黑龍江牡丹江 157009

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