黃 帥 胡福良

（浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，杭州 310058）

近年來(lái)，蜂膠的化學(xué)成分成為國(guó)內(nèi)外蜂膠研究的熱點(diǎn)。蜂膠的化學(xué)成分極為復(fù)雜，含有20余類(lèi)、400多種天然成分，包含黃酮類(lèi)化合物、酚酸類(lèi)化合物、醛酮類(lèi)化合物及萜類(lèi)化合物、維生素、多種氨基酸、木脂素以及脂肪酸等天然成分?？茖W(xué)家們研究發(fā)現(xiàn)，蜂膠的化學(xué)組成受蜂種、采膠季節(jié)、氣候條件、膠源植物以及儲(chǔ)存時(shí)間等多種因素的影響而呈現(xiàn)出一定的差異性。在眾多影響因素中，膠源植物是決定蜂膠化學(xué)成分最主要的因素。因此，對(duì)蜂膠植物來(lái)源的調(diào)查分析是研究蜂膠化學(xué)成分的基礎(chǔ)和前提。

從1956年Meyev發(fā)現(xiàn)蜂膠的來(lái)源與形成機(jī)制后，科學(xué)家們就通過(guò)觀察蜜蜂采膠行為和蜂膠中膠源植物碎片形態(tài)以及比較蜂膠與植物的共同化學(xué)成分等方法來(lái)鑒別蜂膠的植物來(lái)源。由于溫帶、亞熱帶和熱帶地區(qū)氣候的不同，造成植物分布的不同，因此蜂膠膠源植物的來(lái)源也有很大差異。溫帶地區(qū)的主要膠源植物為楊屬植物、樺樹(shù)、豚草、桉樹(shù)等；亞熱帶地中海地區(qū)蜂膠的化學(xué)成分與溫帶地區(qū)蜂膠的化學(xué)成分存在差異，但膠源植物仍然是以楊屬植物為主，還有桉樹(shù)等其他膠源植物；熱帶地區(qū)氣候復(fù)雜，植物種類(lèi)繁多，所以膠源植物的種類(lèi)也存在多樣性，主要包括楊屬、克魯西亞屬、南洋杉屬、桉屬、酒神菊屬等植物。隨著研究的不斷深入以及現(xiàn)代分析技術(shù)的發(fā)展，蜂膠中的新成分不斷被鑒定出來(lái)，更多的膠源植物被人們所發(fā)現(xiàn)。2008年，Daugsch等人通過(guò)觀察蜜蜂的采膠行為，對(duì)比蜂膠和植物分泌物的HPLC、TLC圖譜發(fā)現(xiàn)巴西紅蜂膠的膠源植物為Dalbergia ecastophyllum。近日，澳大利亞悉尼大學(xué)藥學(xué)系的Van H.Tran等人在《植物化學(xué)》雜志發(fā)表了題為“蜜蜂從金合歡樹(shù)采集高黃酮含量的蜂膠”的論文，發(fā)現(xiàn)金合歡樹(shù)（Acacia paradoxa）是一種新的膠源植物，并且鑒定出5,7-dihydroxy-6-methoxy-2,3-dihydroflavonol-3-acetate（5,7-二羥基-6-甲氧基-2,3-二氫黃酮醇-3-乙酸乙酯）是一種新的蜂膠成分。

Van H.Tran等人在澳大利亞的袋鼠島收集金合歡樹(shù)的莖和果實(shí)上的植物分泌物，從采集金合歡樹(shù)樹(shù)脂的蜜蜂后腿上收集蜂膠，并且每?jī)商鞆膶?shí)驗(yàn)蜂箱中的采膠器上收集新鮮的蜂膠。分別取植物莖分泌物0.2 g、植物果實(shí)分泌物0.5 g、蜜蜂腿上的蜂膠0.01 g以及蜂箱中的蜂膠0.5 g。在室溫的條件下，用乙酸乙酯提取15 min，過(guò)濾提取液后進(jìn)行核磁共振氫譜檢測(cè)分析其主要化學(xué)成分；選用乙酸乙酯在常溫的條件下提取蜂膠中的查爾酮和黃酮類(lèi)化合物，并運(yùn)用正相高效液相色譜儀將其分離純化，利用核磁共振技術(shù)鑒定其化學(xué)結(jié)構(gòu)；最后利用高效液相色譜法對(duì)蜂膠中檢測(cè)出的化合物進(jìn)行定量分析。

通過(guò)對(duì)金合歡樹(shù)樹(shù)干和果實(shí)的分泌物以及蜂箱中、采集蜂腿上的蜂膠核磁共振檢測(cè)所得的氫譜進(jìn)行分析比較，他們發(fā)現(xiàn)在以上四種樣品中含有相同的化學(xué)成分并且含量幾乎相同。分析核磁共振以及質(zhì)譜檢測(cè)所得光譜學(xué)圖譜，他們第一次鑒定出金合歡樹(shù)的特征性化學(xué)成分，分別為：2',3',4'-trimethoxychalcone、2'-hydroxy-3',4'-dimethoxychalcone、2',4'-dihydroxy-3'-methoxychalcone、5,7-dihydroxy-2,3-dihydroflavonol-3-acetate 和 5,7-dihydroxy-6-methoxy-2,3- dihydroflavonol-3-acetate。并且發(fā)現(xiàn) 5,7-dihydroxy-6-methoxy-2,3-dihydroflavonol-3-acetate是一種新的蜂膠成分。根據(jù)相關(guān)報(bào)道表明，2',3',4'-trimethoxychalcone具有抗瘧疾和抗利什曼蟲(chóng)的生物活性；2'-hydroxy-3',4'-dimethoxychalcone對(duì)埃利希氏腹水癌細(xì)胞和道爾頓淋巴瘤細(xì)胞具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性作用，通過(guò)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)它可以延長(zhǎng)患埃利希氏腹水瘤小鼠的壽命。2',4'-dihydroxy-3'-methoxychalcone具有廣泛的生物活性，它不僅可以對(duì)腫瘤細(xì)胞和癌細(xì)胞有細(xì)胞毒性的作用，而且還具有較強(qiáng)的抗炎癥、抑菌、抗氧化等活性。同樣，5,7-dihydroxy-2,3-dihydroflavonol-3-acetate和5,7-dihydroxy-6-methoxy-2,3-dihydroflavonol-3-acetate具有廣泛的生物活性，后者具有較強(qiáng)的抗氧化性與其6位上的甲氧基取代基有著密切的關(guān)系。

通過(guò)對(duì)產(chǎn)自澳大利亞袋鼠島不同地理區(qū)域的47個(gè)蜂場(chǎng)的229個(gè)蜂膠樣品進(jìn)行核磁共振檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，其中有來(lái)自6個(gè)蜂場(chǎng)的15個(gè)樣品中含有80%以上金合歡樹(shù)樹(shù)脂的化學(xué)成分，還有10個(gè)樣品中含有50%～80%的金合歡樹(shù)樹(shù)脂的化學(xué)成分。并且他們發(fā)現(xiàn)在這6個(gè)蜂場(chǎng)附近有大量的金合歡樹(shù)。以上結(jié)果共同證實(shí)了金合歡樹(shù)是一種膠源植物。蜜蜂會(huì)將采集到的植物樹(shù)脂等分泌物與其上顎腺、蠟腺等分泌物混合而形成蜂膠，同時(shí)在蜜蜂生產(chǎn)蜂膠的過(guò)程中，植物樹(shù)脂等分泌物也會(huì)發(fā)生一定的生物轉(zhuǎn)換。近年來(lái)科學(xué)家們研究發(fā)現(xiàn)，在蜜蜂的唾液中含有多種酶，可以水解植物樹(shù)脂中的一些化學(xué)物質(zhì)，例如在蜜蜂唾液中含有β-葡萄糖苷酶，可以水解樹(shù)脂中的水楊苷。在本實(shí)驗(yàn)中，Van H.Tran等人發(fā)現(xiàn)金合歡樹(shù)樹(shù)脂中的5種特征性成分仍然大量存在于蜂膠中，并沒(méi)有發(fā)生相應(yīng)的生物轉(zhuǎn)化，其原因是金合歡樹(shù)樹(shù)脂中的化學(xué)成分不溶于水，所以在形成蜂膠的過(guò)程中，并不會(huì)被蜜蜂唾液中的酶水解，而大量存在于蜂膠中。

該研究通過(guò)高效液相色譜和核磁共振的方法發(fā)現(xiàn)一種新的膠源植物，不僅豐富了蜂膠膠源植物的種類(lèi)，而且為解決蜂膠標(biāo)準(zhǔn)化問(wèn)題提供了有價(jià)值的理論依據(jù)。隨著人們對(duì)蜂膠研究的不斷深入，越來(lái)越多的膠源植物被發(fā)現(xiàn)，這不僅對(duì)蜂膠的質(zhì)量控制和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化有著極大的幫助，而且有利于研發(fā)新的蜂膠產(chǎn)品。與此同時(shí)，膠源植物的確定可以為養(yǎng)蜂者選擇合適的養(yǎng)蜂地點(diǎn)提供理論依據(jù)，從而提高蜂膠的質(zhì)量和產(chǎn)量。但是，本實(shí)驗(yàn)僅僅對(duì)金合歡樹(shù)的樹(shù)脂和蜂膠中的共有成分進(jìn)行了對(duì)比分析，并未對(duì)其所含差異成分進(jìn)行研究。蜜蜂在生產(chǎn)蜂膠的過(guò)程中，樹(shù)膠中的一些物質(zhì)將會(huì)發(fā)生生物轉(zhuǎn)化，只有對(duì)兩者的差異成分進(jìn)行對(duì)比研究，探究其轉(zhuǎn)化機(jī)理，才能更加全面地了解蜜蜂生產(chǎn)蜂膠的機(jī)理。