仝品芬，陸彩霞，江勤芳，孫曉梅，，高家紅，匡德宣，代解杰，，

(1、中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院/北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所樹鼩種質(zhì)資源中心;2、云南省重大傳染病疫苗研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明 650118)

樹鼩由于其體型小，容易飼養(yǎng)，解剖學(xué)、生理生化特征較嚙齒類動(dòng)物更近似于人類，已廣泛應(yīng)用于多種人類疾病動(dòng)物模型的研究，在神經(jīng)生物學(xué)，生殖生物學(xué)和社會(huì)心理學(xué)等方面的研究具有鮮明的特色［1］。

在樹鼩生理特征研究方面，有文獻(xiàn)報(bào)道了樹鼩的心電圖特征［2］、血液學(xué)及生化指標(biāo)［3］、主要臟器重量及臟器系數(shù)［4］、腦發(fā)育情況［5］、胃腸道排空時(shí)間［6］等方面的情況，獲得了樹鼩基本的一些生命特征指標(biāo)，但作為重要生命體征的心率和血壓測(cè)定方法及其正常參考值鮮見報(bào)道。本研究采用智能無創(chuàng)血壓計(jì)，對(duì)野生樹鼩、人工飼養(yǎng)的成年樹鼩以及6月齡內(nèi)的青幼年樹鼩心率和血壓進(jìn)行測(cè)定，以建立相應(yīng)的測(cè)量方法，了解樹鼩相關(guān)生理學(xué)數(shù)據(jù)參考值范圍，并進(jìn)一步比較了三組樹鼩心率和血壓的變化情況。

1 材料和方法

1.1 動(dòng)物

均來源于本所樹鼩種質(zhì)資源中心。野生成年組60只，雌雄各半，體重大于130 g，檢疫3個(gè)月后雌雄分開，飼養(yǎng)于(3600×3600×2000)mm不銹鋼大籠中。普通級(jí) F1自繁成年組60，(雌雄各半，體重大于130 g，年齡大于7個(gè)月，和 F1代自繁青幼年組60只，雌雄各半，體重(120～130)g，年齡為5～6個(gè)，雌雄分開，飼養(yǎng)于(400×380×355)mm的實(shí)驗(yàn)樹鼩專用籠具內(nèi)。所有動(dòng)物飼料為自制的全價(jià)配合飼料，每日定時(shí)早晚各飼喂一餐，并補(bǔ)給適量的水果和面包蟲，自由飲水，室內(nèi)每日晝夜光照10 h:14 h，溫度(16～25)℃，相對(duì)濕度為30% ～65%。普通級(jí)樹鼩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證:SCXK(滇)2013－0001，SYXK(滇)2013－0001。

1.2 儀器

智能無創(chuàng)血壓計(jì)(鼠儀，型號(hào) BP－98A)由北京軟隆科技有限責(zé)任公司(Softron Beijing Incorporated Softron)生產(chǎn)，主機(jī)為血壓計(jì)，附件有中號(hào)大鼠鼠網(wǎng)BP98－NTM(45－70 L)，中號(hào)大鼠網(wǎng)袋 BP98－PKM，中號(hào)大鼠加壓感應(yīng)器 BP98－RCM，中號(hào)大鼠加壓感應(yīng)器橡膠膜BP98－RCFM以及小型打印機(jī)。

1.3 測(cè)量方法

1.3.1 動(dòng)物的準(zhǔn)備:操作人員需佩戴兩層手套，內(nèi)層為醫(yī)用乳膠手套，外層為帆布手套。將樹鼩頭部朝前裝入大鼠鼠網(wǎng)，套上網(wǎng)袋，尾部留在外面，固定好網(wǎng)袋后用電推剪從離尾尖2/3處向尾根部剃干凈尾部毛發(fā)，暴露尾根部長約4 cm的皮膚。

1.3.2 動(dòng)物心率、血壓測(cè)定:將樹鼩的尾巴放入具有橡膠膜的加壓感應(yīng)器中，待樹鼩安靜5 min后，按下血壓計(jì)開始鍵自動(dòng)測(cè)量，測(cè)量完成后在主機(jī)顯示屏上顯示心率和血壓測(cè)量數(shù)據(jù)。每只動(dòng)物間隔5 min后再次測(cè)量，一共3次，取平均值作為最終測(cè)量值。平均動(dòng)脈壓以(收縮壓 +2×舒張壓)/3由無創(chuàng)血壓計(jì)自動(dòng)進(jìn)行計(jì)算給出。

1.4 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)方法

測(cè)量值數(shù)據(jù)用 SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示心率和血壓的平均值及變動(dòng)范圍，組間差異比較采用雙側(cè) t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有顯著性，P＜0.01為差異具有極顯著。參考值范圍以平均值±1.96×標(biāo)準(zhǔn)差(±1.96s)表示。

2 結(jié)果

三組動(dòng)物的心率和血壓測(cè)定值結(jié)果見表1，從表中可看出三組樹鼩分性別以及按來源或年齡合并統(tǒng)計(jì)的心率、收縮壓、舒張壓和平均動(dòng)脈壓參考值變動(dòng)范圍情況。三組動(dòng)物心率和血壓值的統(tǒng)計(jì)分析比較結(jié)果見表2。

表1 三組樹鼩的心率和血壓測(cè)定結(jié)果Tab.1 Results of HR and blood pressure measurement in the three tee srew goups

表2 三組動(dòng)物心率和血壓值的統(tǒng)計(jì)分析比較結(jié)果Tab.2 The Statistical analysis comparison results of HR and BP measurement in the three goups of tree shrew

從表1和表2中綜合不同來源和年齡組來看，心率除野生和自繁成年樹鼩間差異有顯著性外(P＜0.05)，其余兩組間差異無顯著性(P ＞0.05)。自繁成年樹鼩收縮壓、舒張壓和平均動(dòng)脈壓均明顯低于F1代青幼年樹鼩并且差異有極顯著性(P＜0.01)，野生成年樹鼩收縮壓和平均動(dòng)脈壓與青幼年樹鼩相比較低，且差異有顯著性(P＜0.05)，而舒張壓沒有顯著區(qū)別。野生成年樹鼩和自繁成年樹鼩相比，收縮壓、舒張壓和平均動(dòng)脈壓差異均無顯著性。

從組內(nèi)不同性別來看野生成年樹鼩雌性心率比雄性快約19 BPM(4.8%)，而自繁成年雌樹鼩的心率則是比雄的低約40 BPM(10.8%)，但差異均尚無顯著性(P＞0.05)。青幼年樹鼩雌雄性心率則比較接近，雌性僅略低于雄性。

自繁成年樹鼩雄性心率、收縮壓、舒張壓和平均動(dòng)脈壓都比雌性高，除心率外其它測(cè)量值均有顯著差異(P＜0.05)。自繁青幼年樹鼩四項(xiàng)指標(biāo)雄性都比雌性高，但二者間差異無顯著性(P＞0.05)。野生成年樹鼩血壓值除收縮壓雌雄性基本相同外，其余均是雄性略低于雌性。

從組間相同性別來看，所有雄性動(dòng)物心率數(shù)值均比較接近，差異無顯著性。野生和自繁成年樹鼩收縮壓、舒張壓和平均動(dòng)脈壓差異無顯著性(P＞0.05)，自繁成年樹鼩和自繁青幼年樹鼩之間差異存在顯著性(P＜0.05)，而野生成年樹鼩和自繁青幼年樹鼩之間差異則極其顯著(P＜0.01)。

不同組間雌性動(dòng)物的情況則相對(duì)復(fù)雜一些。心率野生和自繁成年樹鼩差異極其顯著(P＜0.01)，但兩組與自繁F1代青幼年樹鼩之間差異無顯著性(P＞0.05)。血壓測(cè)量值方面野生和自繁成年樹鼩收縮壓和平均動(dòng)脈壓差異無顯著性(P＞0.05)，而舒張壓差異具有顯著性(P ＜0.05);野生成年樹鼩和自繁青幼年樹鼩相比僅收縮壓差異有顯著性(P＜0.05);自繁成年樹鼩和自繁 F1代青幼年樹鼩收縮壓、舒張壓和平均動(dòng)脈壓均差異有極其顯著性(P ＜0.01)。

3 討論

不區(qū)分性別時(shí)自繁成年樹鼩收縮壓、舒張壓和平均動(dòng)脈壓均明顯低于自繁青幼年樹鼩并且差異有極顯著性(P＜0.01)，野生成年樹鼩收縮壓和平均動(dòng)脈壓與自繁青幼年樹鼩相比較低，且差異有顯著性(P＜0.05)，僅舒張壓沒有顯著區(qū)別。野生成年樹鼩和自繁成年樹鼩相比，收縮壓、舒張壓和平均動(dòng)脈壓均差異無顯著性(P＞0.05)。這表明青幼年樹鼩與成年樹鼩存在明顯區(qū)別，而隨著年齡的增長，雖經(jīng)歷不同的成長環(huán)境至成年期時(shí)樹鼩血壓值之間的差異已不具有顯著性。

同組間不同性別比較發(fā)現(xiàn)，野生樹鼩雌雄心率和各血壓值均差異無顯著性(P＞0.05)，自繁成年樹鼩雌雄間除心率外血壓均差異有顯著性(P＜0.05)。自繁的青幼年樹鼩雌雄間心率和各血壓值均差異無顯著性(P＞0.05)，人類兒童期6歲前的血壓隨著年齡和體重的增長不斷升高，但性別間差異也無顯著性，這方面樹鼩和人類的情況類似［7］。

自繁成年樹鼩雄性除心率外、收縮壓、舒張壓和平均動(dòng)脈壓都比雌性高，且差異有顯著性(P＜0.05)。自繁青幼年樹鼩四項(xiàng)指標(biāo)雌雄性間均差異無顯著性(P＞0.05)，表明:隨著年齡的增長，性別間的差異逐漸顯露并被固定了下來。

野生動(dòng)物的馴化過程中，通常可觀察到雄性動(dòng)物膽子較大，進(jìn)攻性強(qiáng)，而雌性與雄性相比表現(xiàn)得比較膽小，對(duì)環(huán)境改變較敏感，適應(yīng)期較長的特點(diǎn)，這可能是野生雌性樹鼩心率高于雄性的原因，而人工繁殖飼養(yǎng)長大的樹鼩適應(yīng)期已經(jīng)很長，雌樹鼩的表現(xiàn)更為“穩(wěn)定”，顯現(xiàn)出更為“文靜”的一面，因而心率反而更低。野生樹鼩心率高于自繁成年樹鼩并且有顯著差異，顯示出馴化過程對(duì)動(dòng)物的影響，反應(yīng)了動(dòng)物在不同環(huán)境中的適應(yīng)能力，同時(shí)也體現(xiàn)了不同性別的動(dòng)物先天具有的差別和后天適應(yīng)能力上也具有的差異。

各組所有雄性動(dòng)物心率數(shù)值均比較接近，無顯著差異。野生和自繁成年樹鼩收縮壓、舒張壓和平均動(dòng)脈壓差異無顯著性(P＞0.05)，自繁成年樹鼩和自繁青幼年樹鼩之間差異存在顯著性(P＜0.05)，而野生成年樹鼩和自繁青幼年樹鼩之間差異極其顯著(P＜0.01)。這說明樹鼩雄性動(dòng)物心率和血壓值間不存在相關(guān)關(guān)系，青幼年樹鼩血壓值則明顯高于成年樹鼩。

雌性動(dòng)物的情況相對(duì)復(fù)雜。心率數(shù)值野生和自繁成年樹鼩差異極其顯著，可能與生存飼養(yǎng)環(huán)境完全不同有著密切的關(guān)系。但兩組與自繁青幼年樹鼩之間差異無顯著性(P＞0.05)。血壓測(cè)量值方面野生成年樹鼩和自繁成年樹鼩收縮壓和平均動(dòng)脈壓差異無顯著性(P＞0.05)，而舒張壓差異具有顯著性(P＜0.05);野生成年樹鼩和自繁青幼年樹鼩相比則是收縮壓差異有顯著性(P＜0.05)，舒張壓和平均動(dòng)脈壓差異無顯著性(P＞0.05);自繁成年樹鼩和自繁青幼年樹鼩收縮壓、舒張壓和平均動(dòng)脈壓均差異有極其顯著性，說明相同人工飼養(yǎng)環(huán)境下青幼年樹鼩與成年樹鼩血壓值完全不同極可能是年齡上的差異造成的。

鄧江等［8］利用BESN－II多通道動(dòng)物系統(tǒng)對(duì)大鼠進(jìn)行血壓測(cè)量，并與直接頸動(dòng)脈插管測(cè)壓法進(jìn)行數(shù)值及其他相關(guān)因素的比較，結(jié)果兩種測(cè)壓方法在數(shù)值上差異沒有顯著性，尾動(dòng)脈無創(chuàng)測(cè)壓法更為簡便、高效、穩(wěn)定性好、靈敏度高。本文雖然未進(jìn)行有創(chuàng)血壓的測(cè)量比較，但無創(chuàng)血壓的測(cè)定也顯示了以上這些優(yōu)點(diǎn)。

樹鼩是比較容易受到光線和聲音刺激的動(dòng)物，而智能無創(chuàng)血壓計(jì)能為測(cè)量樹鼩血壓創(chuàng)造一個(gè)光線適宜和無噪音的低干擾環(huán)境，運(yùn)用紅外線傳感技術(shù)精確地探測(cè)脈搏振動(dòng)波，準(zhǔn)確測(cè)量樹鼩的心率、收縮壓和舒張壓，通過計(jì)算機(jī)計(jì)算得到平均動(dòng)脈壓，測(cè)量的重復(fù)再現(xiàn)率很高，樹鼩也容易適應(yīng)，因此，比較適宜進(jìn)行實(shí)驗(yàn)處理后長期的或動(dòng)態(tài)性的監(jiān)測(cè)，該測(cè)量方法具有一定的優(yōu)越性。

另外，在對(duì)動(dòng)物心率和血壓測(cè)量時(shí)，整個(gè)測(cè)量過程具有簡單、方便、易行、安全的特點(diǎn)，動(dòng)物無需麻醉，能比較準(zhǔn)確地反映其清醒生理狀態(tài)。測(cè)量后進(jìn)行3 d跟蹤觀察，樹鼩的飲水、進(jìn)食、活動(dòng)和精神狀況均良好。長期跟蹤成年樹鼩交配繁殖，能正常懷孕、生產(chǎn)，表明我們所采用的血壓測(cè)定方法對(duì)動(dòng)物沒有不良影響。

本文同時(shí)給出了三組不同飼養(yǎng)狀態(tài)下樹鼩心率、收縮壓、舒張壓和平均動(dòng)脈壓分性別和雌雄合計(jì)時(shí)的參考值范圍，為選用樹鼩進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)測(cè)量這些生理值提供了有價(jià)值的參考。

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