摘要：建立了高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（HPLCMSMS）檢測豬尿、牛尿和羊尿中苯乙醇胺A殘留的方法。尿液經(jīng)酶解、加入內(nèi)標(biāo)物、乙酸乙酯萃取、MCX固相萃取柱凈化后， 供HPLCMSMS檢測。采用電噴霧離子源正模式，在多反應(yīng)檢測（MRM）模式下分析，苯乙醇胺A定性離子對分別為mz 345150和345327，定量離子對為 mz 345327；苯乙醇胺A內(nèi)標(biāo)物定性離子對為mz 348330，定量離子對為mz 348330。苯乙醇胺A含量在0～50.0 靏L范圍內(nèi)的線性關(guān)系良好（R2=0.9990）； 檢出限為0.03 靏L，定量限為0.1 靏L。在豬尿、牛尿和羊尿中的回收率分別78.4%～82.9%， 85.7%～93.3%和79.8%～84.9%；相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.8%～4.2%， 1.6%～5.6%和2.9%～5.8%。

關(guān)鍵詞：苯乙醇胺A； 苯乙醇胺AD3；尿液； 高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（HPLCMSMS）

3.4定量分析

在空白豬尿、牛尿和羊尿中分別添加苯乙醇胺A標(biāo)準(zhǔn)工作液，使苯乙醇胺A含量分別達(dá)到0.1， 0.5， 1.0和2.0 靏L。分別比較了以純?nèi)軇?biāo)準(zhǔn)品（乙腈0.2%甲酸配制苯乙醇胺A標(biāo)準(zhǔn)品溶液）、空白基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品和內(nèi)標(biāo)物作為參照計算回收率的差異。實驗表明，豬尿的基質(zhì)效應(yīng)較小，牛尿和羊尿的基質(zhì)效應(yīng)較大，用純?nèi)軇?biāo)準(zhǔn)品和空白基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品計算樣品回收率差異很大，而采用加入苯乙醇胺A同位素內(nèi)標(biāo)物，按內(nèi)標(biāo)法計算的回收率比較穩(wěn)定（78.4%～93.3%）， 相對標(biāo)準(zhǔn)偏差較?。?.8%～5.8%）（表4）。因此，采用內(nèi)標(biāo)法定量測定動物尿液中苯乙醇胺A比較可靠。苯乙醇胺A標(biāo)準(zhǔn)品、苯乙醇胺A內(nèi)標(biāo)物、陽性豬尿特征離子質(zhì)量色譜圖如圖2和圖3所示。