覃軍，盧斌

（1.廣西興業(yè)縣動物疫病預(yù)防控制中心，廣西興業(yè)537800；2.廣西興業(yè)縣石南鎮(zhèn)水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)站，廣西興業(yè)537800）

（一）發(fā)病情況 2012年8月25日，廣西興業(yè)縣陳某的養(yǎng)雞戶，飼養(yǎng)肉雞2 500羽，免疫程序按常規(guī)進(jìn)行，在50日齡發(fā)病，每天均有雞死亡，發(fā)病率高達(dá)15.3%以上，死亡率則為3.18%，病程歷時7 d。病雞以精神沉郁、食欲減退、腹瀉、死亡為主要特征，起初該養(yǎng)殖戶判斷為球蟲病，根據(jù)經(jīng)驗用磺胺藥治療，發(fā)現(xiàn)無法控制疫病，后拿到獸醫(yī)站診斷，經(jīng)臨床診斷、病理剖檢及實驗室檢驗，診斷為H9N2亞型禽流感并發(fā)大腸桿菌病。

（二）臨床癥狀 發(fā)病雞群采食量明顯減少，飲水增多，飲水時不斷從口角甩出粘液；精神沉郁，羽毛蓬亂，垂頭縮頸；鼻腔分泌物增多，流鼻液，鼻竇腫脹；眼結(jié)膜充血，流淚；頭部水腫，雞冠和肉垂淤血，呈紫黑色，一側(cè)或兩側(cè)肉垂增厚、變硬，觸之熱感增加；腿上無毛處有紫色出血斑。雞群發(fā)病后的當(dāng)天或第二天即表現(xiàn)出嚴(yán)重程度不一的呼吸道癥狀，有的表現(xiàn)為呼嚕、咳嗽，呼吸 音，有的呼吸困難，張口伸頸，每次呼吸時均發(fā)出尖叫聲；有的呼吸道癥狀較輕，僅在夜間安靜時能聽到。病雞腹瀉，拉水樣稀糞，常帶有未消化完全的飼料，有的拉灰綠色或黃綠色稀糞。

（三）剖檢病變 氣管出血，有粘液，個別支氣管堵塞，胸、腹氣囊混濁、增厚，呈白色或淡黃色干酪樣，心肌出血，胰腺邊緣出血，脾臟白色小壞死點，盲腸淋巴結(jié)出血，腎臟出血，個別的雞只腺胃乳頭出血及肌胃角質(zhì)層下有出血，有的臟器表面有白色纖維素性滲出物。

（四）診斷

1.病料采集。因病雞死后時間過長，腸內(nèi)的大腸桿菌可通過腸壁侵入腹腔擴散到其他組織，故應(yīng)從新鮮病料中采樣。死亡的雞胚和有臍炎的病雞卵黃囊是最好的病料，有纖維素沉著的心包囊和肝臟，被感染關(guān)節(jié)的液體或膿汁及干酪物，輸卵管內(nèi)、有腹膜炎的腹腔內(nèi)、氣囊內(nèi)和眼內(nèi)的干酪物等都是較好的病料。

2.細(xì)菌分離。鉤取上述病料，于普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或麥康凱、遠(yuǎn)騰氏等鑒別培養(yǎng)基上劃線分離培養(yǎng)，獲得單個存在的菌落，供進(jìn)一步試驗用。

3.細(xì)菌鑒定。在瓊脂平板上，37℃培養(yǎng)24 h，菌落邊緣整齊，隆起，灰白色，直徑1～3 mm，在肉湯中均勻混濁生長。菌落在麥康凱培養(yǎng)基上呈紅色，在伊紅美藍(lán)平板上呈黑紅色帶有金屬光澤，在遠(yuǎn)騰氏平板上呈紅色。大腸桿菌可在上述的鑒別培養(yǎng)基上做初步鑒定，然后進(jìn)一步做生化試驗。分離菌產(chǎn)生靛基質(zhì)，在檸檬酸鹽培養(yǎng)基上不生長，能發(fā)酵葡萄糖、乳糖、甘露醇，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則確定為大腸桿菌。

4.抗體檢測。雞群在8日齡接種過H9N2滅活苗，發(fā)病階段采血，經(jīng)H9N2亞型血凝抑制抗體檢測，抗體效價在1:8～1:128。

5.PCR檢測。雞群采集氣管棉拭子和泄殖腔棉拭子，分別做NDPCR和H9N2 PCR檢測，ND核酸擴增陰性，H9N2核酸擴增陽性。

6.確診。結(jié)合發(fā)病情況、臨床癥狀、剖檢病變及實驗室檢測，確診為H9N2亞型禽流感與大腸桿菌病混合感染。

（五）防治措施

1.所有雞群不論發(fā)病與否，均全部緊急接種H9N2亞型禽流感疫苗，注射劑量為0.5 ml/羽。

2.用恩諾沙星或環(huán)丙沙星飲水、混料或肌肉注射。每毫升5%恩諾沙星或5%環(huán)丙沙星溶液加水l kg（每千克飲水中含藥約50 mg），讓其自飲，連續(xù)3～5 d；用2 %的環(huán)丙沙星預(yù)混劑250 g均勻拌入100 kg飼料中（即含原藥5 g），飼喂1～3 d。肌肉注射，每千克體重注射0.1～0.2 ml恩諾沙星或環(huán)丙沙星注射液。

3.加強飼養(yǎng)管理。要注意雞舍通風(fēng)換氣，雞舍溫、濕度適宜，增強雞體抵抗力。要盡可能減少各種應(yīng)激因素的刺激。要及時清理雞糞，進(jìn)行帶雞消毒，每日1次，連續(xù)消毒1周；對用具、食槽、水槽、接觸病雞的人員、污染場地嚴(yán)格消毒，病死雞做深埋處理。

經(jīng)采取以上措施，在注射疫苗后5 d內(nèi)，雞群的發(fā)病數(shù)、死亡數(shù)與注射疫苗前基本一致，從第6天開始，發(fā)病數(shù)逐漸減少，第12天后，除個別雞死亡外，雞群病情基本穩(wěn)定，沒再出現(xiàn)新的發(fā)病死亡病例。