鄧 卉

（四川省畜牧科學(xué)研究院飼料研究所，四川 成都 610066）

1 檢測指標(biāo)列舉

蛋雞血液指標(biāo)包括常規(guī)指標(biāo)和生化指標(biāo)。血液常規(guī)指標(biāo)主要包括白細(xì)胞計數(shù)（WBC）、紅細(xì)胞計數(shù)（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、血小板計數(shù)（PLT）等；生化指標(biāo)主要指谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸轉(zhuǎn)移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、總蛋白（TPRO）、白蛋白（ALB）、尿素氮（UN）、肌酐（CRE）、血糖（GLU）、總膽紅素（TBILI）等。

2 影響血液指標(biāo)測定結(jié)果的因素及解決措施

2.1 樣品采集前影響檢測結(jié)果的因素及處理方案

2.1.1 飲食因素 由于采血對象進(jìn)食會對許多血液指標(biāo)分析產(chǎn)生光學(xué)干擾作用，所以采集標(biāo)本前，實(shí)驗(yàn)人員需對試驗(yàn)蛋雞做下列處理工作：在雞只進(jìn)食12～16h后空腹靜脈采血，臨采血前禁止飲水。

2.1.2 生理因素 試驗(yàn)蛋雞在生理上具有個體差異性，每只雞的機(jī)體功能和代謝水平都不盡相同，并且由于生理波動性的存在，其不同時段的血液理化指標(biāo)值也存在著差異，這種差異是正常的、必然存在的?；谏鲜鲈?，實(shí)驗(yàn)人員需在采集血樣前觀察各蛋雞的健康和精神狀況，為蛋雞提供一個舒適的生活環(huán)境，保證蛋雞每天有規(guī)律的飲食作息，避免發(fā)生異常狀況。

2.1.3 抗凝劑使用量與采血量的比例關(guān)系 對于血常規(guī)檢測，采血樣本需加入抗凝劑，且樣本量與抗凝劑用量的比例要合適。血液比例過高時，容易出現(xiàn)微凝塊，可能阻塞血細(xì)胞分析儀，同時影響一些檢驗(yàn)結(jié)果；血液比例過低，抗凝劑相對過剩，會引起血細(xì)胞形態(tài)和體積的一些改變，也會導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確?；谏鲜鼍売?，采血前應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)所需的標(biāo)本量選擇適當(dāng)比例的抗凝劑加入采樣管并密封好，事先做好準(zhǔn)備工作，避免產(chǎn)生檢測誤差。

2.2 樣品采集過程中影響檢測結(jié)果的因素及應(yīng)對措施

2.2.1 標(biāo)本溶血 標(biāo)本溶血是血液采集過程中對檢測結(jié)果產(chǎn)生嚴(yán)重影響的一個因素，出現(xiàn)這種現(xiàn)象的主要原因有以下幾個方面：（1）靜脈穿刺困難導(dǎo)致抽血不順利，針頭在蛋雞皮下反復(fù)多次穿刺，過度損傷組織。（2）抽血時抽動注射器活塞過快、負(fù)壓過大致使血液快速通過針頭。（3）抽出的血液在注入試管時沒有卸下針頭，注入時細(xì)胞受擠壓而破裂溶血；注入時產(chǎn)生許多氣泡，血球因細(xì)胞表面張力或放置一段時間后干燥，造成血細(xì)胞破裂溶血；再次，注射器或容器中有氧化還原洗滌劑，也會使細(xì)胞出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。

標(biāo)本溶血引起檢測結(jié)果明顯異常的影響是多方面的：標(biāo)本溶血后，紅細(xì)胞明顯升高。當(dāng)紅細(xì)胞內(nèi)濃度低于血漿濃度，即比值＜1時，則溶血相當(dāng)于血清被稀釋，造成某些成分的檢測值降低。標(biāo)本溶血后，血細(xì)胞成分進(jìn)入血漿中所引起的化學(xué)反應(yīng)導(dǎo)致細(xì)胞中某些含量高的成分大量進(jìn)入血漿，致使相應(yīng)檢測項(xiàng)目的檢測值升高。標(biāo)本溶血后，血紅蛋白的顏色在531nm和555nm波長附近會使比色法、比濁法檢測的吸光特性和吸光度發(fā)生改變或使滴定法測定的滴定終點(diǎn)難以判斷而帶來誤差。

綜上所述，標(biāo)本溶血會很大程度地引起檢測結(jié)果異常，造成這種現(xiàn)象多是由采血人員的技術(shù)不熟練，操作不規(guī)范所致。因此，采血人員需提高自身專業(yè)技能水平，規(guī)范操作手法，謹(jǐn)記操作要領(lǐng)，加強(qiáng)實(shí)踐能力。

2.2.2 抗凝問題 蛋雞在采血時出于本能會拼命掙扎，這給采血帶來了一定困難，血液在針管中滯留過久會形成細(xì)小血絲，導(dǎo)致抗凝劑不能發(fā)揮作用。此外，采血人員在采血后需立即顛倒采血管5～10次，以確?？鼓齽┗靹?，發(fā)揮作用。

2.3 樣品采集后影響檢測結(jié)果的因素和解決措施

2.3.1 送檢時間 血液樣品采集后要及時送檢，尤其是雞舍溫度超過22℃時。因?yàn)檠簶?biāo)本放置時間過長會導(dǎo)致某些生化成分發(fā)生改變，如糖酵解使血糖濃度降低，周圍環(huán)境變化導(dǎo)致血液pH值變化、酶活性降低或喪失等。另外，樣品采集后試管必須加塞，管口向上、垂直放置，以減少管中內(nèi)容物的震動，防止樣品蒸發(fā)、污染和外濺等。

2.3.2 樣品檢測前的預(yù)處理工作 檢驗(yàn)人員接收樣品后要予以分類，準(zhǔn)備離心。加抗凝劑的血液標(biāo)本可以立即離心；加促凝劑的標(biāo)本可于采血后5～15mi盡早離心。離心標(biāo)本前如發(fā)現(xiàn)試管壁和管塞上有凝塊，請盡量避免使用小木棒或類似器材去剝離，否則容易導(dǎo)致溶血。

2.3.3 樣品檢測中出現(xiàn)的問題及解決辦法 此次試驗(yàn)蛋雞的血液樣品在檢測過程中遇到了以下一些問題，檢驗(yàn)人員采用科學(xué)有效的方法消除了干擾：

（1）血樣稀釋倍數(shù)不準(zhǔn)確，導(dǎo)致血細(xì)胞檢驗(yàn)計數(shù)出現(xiàn)問題。檢驗(yàn)人員在進(jìn)行血細(xì)胞檢驗(yàn)計數(shù)項(xiàng)目的操作時，人為地降低了血樣的稀釋倍數(shù)，導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。稀釋倍數(shù)過低，會形成細(xì)胞排隊通過傳感器的重合缺損；稀釋倍數(shù)過大，則會造成一定測定容量內(nèi)血細(xì)胞的數(shù)量過少，這也會嚴(yán)重影響血液細(xì)胞檢驗(yàn)的測量精度。

（2）樣品自身因素的影響。樣品本身存在的一些不可抗拒因素會對血細(xì)胞檢測結(jié)果造成影響。血小板受環(huán)境干擾會造成血小板計數(shù)假性增高或假性降低；核紅細(xì)胞增多會使白細(xì)胞計數(shù)假性增高；而淋巴細(xì)胞中可能存在體積稍小的嗜堿性粒細(xì)胞，使得淋巴細(xì)胞分類計數(shù)假性增高。檢測人員采用人工分類鏡檢可以有效避免上述影響。

（3）測定血糖（GLU）指標(biāo)，排除膽紅素的干擾采用氧化酶法測定GLU指標(biāo)時，由于膽紅素作為一種還原劑會與氧化反應(yīng)過程中過氧化氫（H2O2）分解產(chǎn)生的新生態(tài)氧發(fā)生反應(yīng)，從而使得新生態(tài)氧與氧化酶法反應(yīng)中的色原物質(zhì)結(jié)合減少，導(dǎo)致結(jié)果偏低為消除上述影響，檢測人員可以預(yù)先加入膽紅素氧化酶，將膽紅素氧化成較穩(wěn)定的氧化產(chǎn)物——膽褐素，避免膽紅素與新生態(tài)氧發(fā)生反應(yīng)。此方法取得了很好的效果。

3 結(jié)論

本試驗(yàn)不僅探究了雞采血、驗(yàn)血過程中會影響檢測結(jié)果的因素，而且針對這些影響因素提出了科學(xué)有效的解決方案，為提高禽類動物血液指標(biāo)檢測的準(zhǔn)確性提供了參考。今后可以進(jìn)行深入的理論研究，以便更深層次地完善禽類動物采血、驗(yàn)血操作規(guī)程。

參與文獻(xiàn)：

[1] 劉亞芝.淺談臨床血常規(guī)檢測質(zhì)量的影響及控制[J].中醫(yī)療，2011，（25）：185.

[2]劉忠實(shí).血液生化檢驗(yàn)中標(biāo)本誤差的成因及應(yīng)對措施討[J].中外醫(yī)療，2011，（3）：182.

[3] 張俊鳳，崔翠翠，肖琛.血液標(biāo)本采集與處理的質(zhì)量制[J].臨床輸血與檢驗(yàn)，2005，7（2）：145-146.

[4] 劉涌.關(guān)于提高血常規(guī)檢驗(yàn)質(zhì)量的方法探討[J].中國醫(yī)導(dǎo)報，2008，5（16）：171.