史玲莉（綜述），閆冀煥（審校）

（河北省出入境檢驗檢疫局保健中心檢驗科，河北石家莊 050000）

免疫學方法診斷結核病的研究進展

史玲莉（綜述），閆冀煥（審校）

（河北省出入境檢驗檢疫局保健中心檢驗科，河北石家莊 050000）

結核；免疫學試驗；診斷；綜述文獻

結核病是當今世界由單一致病菌引起的病死率最高的疾病。我國有130萬人感染結核，其中有約11.2萬人為耐多藥，僅次于印度的患病和耐多藥人數［1］。目前臨床上對結核病的診斷主要以接觸史、癥狀體征、結核菌素皮試、影像學、分泌物培養(yǎng)、抗酸染色等作為臨床確診或排除的標準，存在漏檢率高、與其他疾病難于區(qū)分等問題。因此，利用可靠、快捷、簡便的免疫學檢測方法來加強結核病的診斷和防控，已經成為共識。本文就臨床上常用的結核免疫檢測試劑的原理、應用效果和研究進展進行了比較和闡述，并對免疫學檢測的影響因素進行分析。

1 結核菌素試驗

結核菌素試驗是常用的結核診斷和輔助診斷方法，其原理是Ⅳ型超敏反應，目前有4種結核菌素，即舊結核菌素、純化蛋白衍生物（purified protein derivative，PPD）、卡介苗結素和非結核分枝桿菌結素。

1.1 利用PPD檢測：PPD是一種粗糙未明確成分的結核分枝桿菌抗原的混合物，PPD試驗是將結核菌和結核蛋白作為抗原注入人體內來測定機體對結核桿菌是否能引起變態(tài)反應的一種皮膚試驗。外周血的CD4+T淋巴細胞與腫瘤壞死因子γ（tumor necrosis factor alpha，TNF-γ）及白細胞介素10（interleukin-10，IL-10）均參與了結核菌感染的免疫病理過程。PPD注入皮內后與已感染結核菌人體的特異免疫細胞相互作用，釋放一系列淋巴因子，使巨噬細胞活化，產生免疫變態(tài)反應，導致注射局部產生紅腫硬結，硬結大小與反應的強度和結核菌感染的程度呈正比。

國內有試劑盒廠家將PPD作為靶抗原制備成ELISA檢測試劑盒（如伊利康酶免試劑盒），但由于其成分復雜，不可避免會存在假陽性的問題。張民軍等［2］對脂阿拉伯甘露糖、分泌性蛋白抗原、純化卡介苗蛋白和人型PPD抗原進行比較后，證實PPDIgG是4種靶特異結核抗體中特異性最低的。但作為最早運用于血清學試驗的靶抗原，PPD抗原制備技術完善，成本低廉，因此在國產結核抗體試驗盒中得到了廣泛采用。

除了不同廠家PPD純度的不同會影響檢測結果外，機體的變態(tài)反應、病情輕重也會影響檢測結果，而且曾經被結核分枝桿菌感染而治愈的人群也會出現陽性表現，加上其測量為人為測量，測量方法以及方式等不同也造成一定的人為誤差，而且由于其受卡介苗以及免疫抑制劑的干擾，也可造成假陽性的存在。變態(tài)反應前期，PPD試驗可為陰性；應用糖皮質激素等免疫抑制劑者、營養(yǎng)不良以及麻疹、百日咳患者，結核菌素反應可暫時消失；PPD試驗反應強度與外周血淋巴細胞減少相關，老年人免疫功能受損或存在免疫抑制現象，嚴重結核病和各種危重患者，導致部分活動性結核也可表現為陰性。Jackson-Sillah等［3］對肺結核患者運用結核抗體檢查的研究中發(fā)現，22％患者出現假陰性，其中有近2/3患者為61～83歲的老年患者，試驗組有34例患者出現結核抗體假陰性，其中33例患者為老年患者；這部分老年患者的免疫系統(tǒng)較陽性患者更差，體液免疫和細胞免疫功能都很低。張曉希等［4］研究結果，在老年肺結核菌陽患者中陽性率為66％，特異度為50％。

因此，在排除以上影響因素的情況下，PPD試驗陰性，常規(guī)可排除結核感染。PPD實驗的強陽性結果有絕對的診斷意義，此時血中結核抗體的陽性率在結核病患者中也相當高。PPD試驗陽性，提示結核菌感染，需結合臨床表現、痰液細菌學檢驗和X線檢查等進行分析，進一步確診或排除。

1.2 利用BCG蛋白檢測：目前使用該抗原作為包被抗原的試劑盒主要是法國VEDA LAB公司出品的TB-CHECK-1試劑盒，該試劑盒采用一步免疫層析法，采用有色標記的抗人免疫球蛋白來特異性地檢測結核分枝桿菌抗體，若樣本中含有抗BCG抗體，可先與有色物標記的抗人免疫球蛋白結合形成抗原抗體復合物，該復合物再與固定于陽性反應區(qū)（T）處的BCG蛋白結合，產生一條玫瑰色線條。若樣本中沒有抗結核抗體，反應混合物經T流向質控區(qū)（C），在C區(qū)形成一條玫瑰色線條，表明試劑有效。該試劑主要檢測IgG和IgA抗體，高濃度的IgM抗體也可被檢出。而接種過疫苗的人體試驗不起反應。根據試劑盒說明書，其整體靈敏度為86％（133/154），而特異度為92.8％（220/237），痰涂陽性患者靈敏度為86％（129/150），痰涂陰性患者靈敏度為78％（18/23）對活動性肺結核的靈敏度為87％（113/130），對活動性非結核分枝桿菌靈敏度為83％（20/24）。周衛(wèi)敏等［5］采用此方法對431例肺結核患者進行檢測，陽性率為47.10％，其中菌陽肺結核185例，陽性率為51.35％，菌陰肺結核246例，陽性率為43.90％，遠遠低于說明書的靈敏度。這可能與國內人群普遍接種BCG疫苗有關。

2 基于細胞免疫為主的試驗

2.1 γ干擾素釋放試驗（interferon gamma release assays，IGRAs）：IGRAs的原理即首次感染結核桿菌后產生的記憶T淋巴細胞將在人體內長期存在，當再次受到結核桿菌相關抗原刺激后，這些記憶T淋巴細胞迅速增殖成為效應T淋巴細胞。這些效應T淋巴細胞分泌γ干擾素和其他一些細胞因子來刺激T淋巴細胞增殖并可以激活巨噬細胞。由于這個過程是針對特異結核分枝桿菌免疫原得到反應，因此可以通過測定T細胞γ干擾素釋放反應來檢查患者是否受到結核分枝桿菌感染。IGRAs的結果通過檢測代表結核分枝桿菌的抗原反應后釋放γ干擾素的量來判斷。由于IGRAs技術使用的抗原是結核分枝桿菌RD1和RD16區(qū)編碼的蛋白，這些蛋白在卡介苗中缺失，所以IGRAs能夠較好地區(qū)別BCG接種和結核分枝桿菌感染，從而使IGRAs可以用于檢測結核感染。

2005年，美國CDC批準使用QFT-G方法干擾素定量金標試驗（QuantiFERON Gold Test）檢測結核分枝桿菌感染，2010年美國FDA又批準了2種新的IGRAs方法輔助診斷潛伏結核分枝桿菌感染和活動性結核病的方法，包括QFT-GIT（QuantiFERON-TB Gold In-tube test）和T細胞斑點檢測結核試驗SPOT試驗（the T-SPOT.TB test）。目前該方法已經列入美國、歐洲等地結核病診療指南，以協(xié)助診斷結核感染的存在。QFT-G和QFT-GIT由澳大利亞Cellestis公司開發(fā)研制，利用全血作為樣本，用酶聯免疫技術檢測早期分泌靶抗原6（early secreted antigenic target 6，ESAT-6）、培養(yǎng)分泌蛋白（culture filtrate protein 10，CFP10）和TB7 3種抗原刺激γ干擾素的釋放。而T-SPOT則是由英國Oxford Immunotec公司開發(fā)的使用外周血單核細胞來完成檢測的，利用酶聯免疫斑點技術檢測ESAT-6和CFP10 2種抗原刺激γ干擾素的釋放。有研究［6-7］顯示，在活動性肺結核培養(yǎng)陽性的病例中，QFT-GIT的靈敏度為81％，特異度為99％，而T-SPOT的總靈敏度為91％，總特異度為86％。國內使用較多的是英國Oxford Immunotec公司生產的T-SPOT試劑，靈敏度和特異度與國外有較好的一致性。陳奎霖［8］對295例肺結核進行T-SPOT檢測，陽性率為82.0％，85例健康人中，特異度為91.8％；190例涂陰肺結核中，陽性率為75.8％。曾誼等［9］用T-SPOT檢測菌陽肺結核組陽性率為89.1％，特異度為95.0％。趙靜等［10］對83例肺結核患者進行T-SPOT檢測，陽性率為83.1％，其中菌陽肺結核43例，陽性率為93.0％，菌陰肺結核40例，陽性率為72.5％，健康對照50例，特異度為94.0％，同時證實T-SPOT檢測結核性胸膜炎和結核性腦膜炎2種肺外結核中也有較高的實用價值，尤其是結核性胸膜炎。項杰等［11］在40例結核病患者中進行T-SPOT檢測陽性率80.0％，在60例非結核呼吸道患者和健康對照組中檢測其特異性為98.3％。但也有國外報道［12］在經痰培養(yǎng)或肺組織活檢確診的結核病患者中，T-SPOT的靈敏度為92％，但特異度僅為47％。

總體來講，基于細胞免疫為主的γ干擾素釋放試驗作為臨床輔助診斷手段，雖然樣本來源不同，樣本量大小不同，不同的實驗組檢測的靈敏度和特異度均有所不同，但相對于涂片和培養(yǎng)等方法而言，大大提高了檢測的靈敏度，不失為一種有效的臨床檢測輔助手段。但IGRAs檢測的結果也會受多種因素的影響，如年齡、營養(yǎng)不良、癌癥化療和結核-艾滋病共感染等。最主要的是，其使用費用較高，限制了其在我國臨床的使用，且其實驗周期超過24h，實驗操作相對繁瑣，也不適合口岸快速通關和臨床檢測。

2.2 T細胞亞群的測定（determination of T cell subgroup，OKT）：OKT方法有流式細胞儀法和抗堿性磷酸酶法。據農初師［13］報道，肺結核病患者外周血中的CD3、CD4T細胞亞群數量下降，尤其是CD4顯著下降，但是CD8增加，CD4/CD8比值下降。由于T細胞亞群測定非特異性，在結核病的診斷上作用不太大，目前國內也只用于動態(tài)觀察結核患者的治療效果和患者預后。

3 基于體液免疫為主的試驗

用于體液檢測的免疫方法主要是斑點免疫金滲透技術（膠體金法）、ELISA技術、免疫印跡法和基因芯片技術。不論采取哪種方法，其原理都是患者體內特異性抗體與試劑盒所包被的抗原能夠特異性結合，而后通過一定的顯色方法獲得檢測結果。其檢測的靈敏度和特異度主要取決于各種方法所包被的結核特異性抗原的種類。

目前結核分枝桿菌是引起結核病的致病菌，其全基因組序列分析已于1998年完成其基因組編碼了大約1 000種蛋白，但大多數的蛋白功能卻不明確。

3.1 以細胞壁抗原為主的檢測方法

3.1.1 脂阿拉伯甘露聚糖抗原（lipoarabinomannan，LAM）：LAM抗原是分枝桿菌菌壁表面抗原。其核心骨架為甘露聚糖，側鏈為甘露糖、阿拉伯糖單位，分子以磷脂酰肌醇錨定在胞質膜上，是糖基磷酸肌醇糖脂家族中的一員。至少有2類LAM，即araLAM和manLAM，分別來自于結核分枝桿菌H37Ra株和H37Rv Erdman株。LAM具有高免疫原性，能誘發(fā)速發(fā)皮膚反應、血清學反應、被動皮膚過敏反應，但不能誘發(fā)遲發(fā)皮膚反應。

目前檢測市場上有很多檢測試劑盒是以LAM作為包被抗原或與38KD和16KD聯合作為包被抗原的檢測產品。國內使用較多的包括上海奧普生物技術有限公司生產的TB-DOT診斷試劑。TB-DOT采用斑點免疫膠體金滲透技術，將結核分枝桿菌特異性抗原分離純化，點樣并固化在硝酸纖維素膜上，膜上包裹的LAM抗原捕獲人血清樣品中結核分支桿菌抗體，被捕獲的結核IgG抗體可用葡萄球菌A蛋白（SPA）膠體金綴合物標記呈色（SPA能與IgG特異性結合）形成紅色斑點，根據是否出現紅色斑點即可判斷陰、陽結果，從而判斷是否存在結核分枝桿菌抗體。李光明等［14］對50例單純性結核性胸膜炎和62例肺結核并胸膜炎患者進行檢測后發(fā)現，檢測單純性結核性胸膜炎血清陽性率為76.0％，檢測胸腔積液的陽性率為96.0％。檢測肺結核并胸膜炎血清陽性率為83.9％，檢測胸腔積液的陽性率為87.1％。周衛(wèi)敏等［5］對431例肺結核患者進行檢測，陽性率為65.43％，其中菌陽肺結核185例，陽性率為69.19，％菌陰肺結核246例，陽性率為62.60％。趙靜等［10］對83例肺結核患者進行檢測，陽性率為75.9％，其中菌陽肺結核43例，陽性率為79.1％，菌陰肺結核40例，陽性率為72.5％，健康對照50例，特異度為70％。陽幼榮等［15］對113例確診結核患者（69例肺結核、肺外結核44例）檢測，陽性率為80.53％，非結核疾病組53例的陽性率為30.19％，健康組50例特異度為90％。

相對于其他抗原而言，LAM抗原的特異性相對較差，這主要是因為用來檢測患者LAM抗體的LAM抗原多是直接從結核分枝桿菌培養(yǎng)物中純化而得的，由于LAM非還原端帽化結構的存在，而這一結構也存在于分枝桿菌的阿拉伯半乳聚糖中，這可能導致環(huán)境中的非致病分枝桿菌感染人體產生的抗體由這部分抗原表位激發(fā)進而構成抗體診斷出現假陽性的重要來源。

3.1.2 結核菌糖類脂抗原（tuberculous glycolipid，TBGL）：TBGL抗原是分枝桿菌胞壁上的糖脂類物質，具有菌屬特異性，是從H37Rv菌株分離純化而成。Maekura等［16］用在結核分枝桿菌H37Rv純化的海藻糖-6，6-二霉菌酸酯（索狀因子）作為抗原來診斷抗結核分枝桿菌免疫球蛋白，結果顯示糖脂類是血清學診斷中有效的抗原。隨后，Maekura等［16］在TDM中混入更多的親水性糖脂，構建了一種新的結核糖脂類抗原，并利用這種抗原成功建立了一個高靈敏度的結核血清學試劑盒，并由日本協(xié)和醫(yī)藥株式會社生產為成品ELISA試劑盒。通過ELISA方法檢測，血清TBGL抗體對活動性肺結核患者的靈敏感度為80％，肺外結核則為83.3％，特異度為96.6％［15］。

3.1.3 基因工程表達純化的結核分枝桿菌特異度蛋白（tuberculosis-specific antigen，TB-SA）：加拿大多倫多大學劉軍教授在研究中發(fā)現了一種結核分枝桿菌特異性較高的結核分枝桿菌特異度蛋白（tuberculosis-specific antigen，TB-SA），成都永安制藥有限公司利用該抗原研制的ELISA檢測試劑盒通過了國家藥監(jiān)局的批準。李光明等［14］利用該試劑檢測單純性結核性胸膜炎血清陽性率為72.0％，檢測胸腔積液的陽性率為90.0％。檢測肺結核并胸膜炎血清陽性率為80.6％，檢測胸腔積液的陽性率為83.9％。魯啟超等［17］將該試劑用于成人結核病的診斷中，測得靈敏度為71.9％，特異度為91.9％。周衛(wèi)敏等［5］對431例肺結核患者進行檢測，陽性率為87.24％，其中菌陽肺結核185例，陽性率為89.19％，菌陰肺結核246例，陽性率為85.77％. 3.2 以肺表面活性物質相關蛋白A（pulmonary surfactant associated protein A，SP-A）為主的檢測方法：肺結核主要通過飛沫傳播，肺表面活性物質相關蛋白是飛沫的主要組成成分。而肺表面活性物質相關蛋白主要分布于支氣管表面和肺泡氣液界面上，其中含量最多的是SP-A。它是一種親水性蛋白，在肺泡上皮細胞合成與分泌，在肺的先天性免疫應答中有重要作用，同時可增加及減少炎性介質的釋放。表面活性蛋白僅占表面活性物質組成的10％，擔負著宿主呼吸系統(tǒng)防御功能，其中SP-A占總量的50％左右，SP-A在結核桿菌素質免疫調節(jié)中扮演重要角色，通過正調節(jié)巨噬細胞甘露糖受體SP-A可提高人類巨噬細胞吞噬結核分枝桿菌的能力。但該指標在結核病的診斷上存在一定缺陷，抗結核治療對SP-A的影響較大，且其他疾病可能會導致該指標存在假陽性和假陰性的情況。SP-A在人類不同疾病中表達的水平是不一致的，如在艾滋病、矽肺、肺泡蛋白沉積癥的肺泡灌洗液中SP-A水平是升高的，而在細菌性肺炎、肺纖維化和囊性肺纖維化中表達是降低的。由于肺結核患者肺內受累情況不同，結核菌感染的肺段與非受累的肺段SP-A的表達不同，不排除由于痰液稀釋可能導致測定痰液中SP-A低表達的可能性。Gold等［18］研究，在局麻下進行纖維支氣管鏡檢查獲取肺泡灌洗液，同時抗結核治療1周及1個月后復查肺泡灌洗液，肺泡灌洗液樣本來源于通過X線確診的病變肺段及沒有病變受累的肺段，結果顯示肺結核病變受累肺段的肺泡灌洗液中SP-A的水平是降低的，抗結核治療后相應肺段的SP-A水平升高，而未受累肺結核的肺段的SP-A水平差異無統(tǒng)計學意義。遲晶宇等［19］研究表明血清SP-A可作為反映肺泡毛細血管膜屏障功能損傷早期而敏感的外周血標志物，檢測其水平有助于肺結核的診斷。

3.3 以多種抗原的混合為基礎的檢測：除以上抗原外，人們還發(fā)現了大量分泌蛋白，如Ag85復合物、38KDa蛋白、A60抗原、16KDa蛋白、14KDa抗原、31KDa抗原、MTB81（88kDa抗原）和BCG缺失抗原，如MPT64、ESAT-6、CFP-10、MTB48、KatG抗原、U1蛋白等。利用多種抗原的組合來提高結核病檢測的靈敏度，并提出了結核感染的“條形碼”理論，即在結核病特定的階段表現為特定抗原的存在或缺失。這一理論揭示了現有的結核免疫學診斷發(fā)展過程的一個缺陷，即用單一抗原來標記結核病的特定的階段。上海榮盛生物科技有限公司利用致病性結核分枝桿菌3種（38KD、ESAT-6和CFP10）和4種（MPT64 Mtb68 Mtb6.8和Mtb16.3）特異抗原優(yōu)勢肽段制作的ELISA試劑盒，用以捕獲人血清或血漿中可能存在的結核抗體。王瑛等［20］實驗證實其靈敏度70.4％（254/361），其特異度84.9％（245/288）。痰涂片陽性和培養(yǎng)陽性患者組中，陽性率分別為74.1％和81.8％，菌陰肺結核組陽性率為70.4％，特異度為84.9％。

蛋白芯片技術的應用為多抗原的使用提供了一個新的平臺。它利用微陣列技術將純化的結核菌抗原固相于同一膜片上，使抗原抗體反應在固相膜上快速進行，再以免疫金作為標記物在膜上顯色，然后通過加入芯片識別系統(tǒng)進行結果分析。夏季等［21］利用該技術同時檢測LAM、38KD、16KD、CFP10、ESAT-6抗體，130例臨床標本顯示，以任一抗體檢測陽性診斷為結核病陽性，則診斷結核病的靈敏度為92.0％，特異度為77.5％，正確率為83.1％。但該方法尚沒有通過認可。

在芯片的結果判斷上，2項抗體檢測陽性作為結核病診斷標準的診斷試驗確診患有結核病的價值較高，而以1項抗體陽性作為診斷標準的診斷試驗否定患有結核病的價值較高。

雖然生物芯片技術可以對結核分枝桿菌進行快速準確的檢測，但是其對設備以及操作技術的要求較高，限制了其在結核普查和流行病學中的應用，然而在耐藥菌種檢測中具有極大的優(yōu)勢［22］。

4 免疫學檢測結核病的影響因素分析

免疫學檢測結核的方法因其經濟、簡便、快速等優(yōu)點備受檢驗檢疫等部門的關注。但在使用該方法的過程中，還應關注造成其假陽性和假陰性的原因，以便綜合評判，作出準確的結論。影響其檢測結果的主要因素包括以下幾點。

4.1 造成假陽性結果的因素

4.1.1 我國感染現狀：我國屬于結核病感染高危險國家，感染例數多，患病人數多，新發(fā)患者多，死亡病例多，農村患者多，耐藥患者多。相對于低結核發(fā)病國家，很多人存在自然結核菌感染的情況，在體內存在一定的低水平抗體。據統(tǒng)計，目前現有的結核患者只占結核感染人群的10％左右。

4.1.2 鳥分枝桿菌復合體（mycobacteriumavium complex，MAC）的感染：用鳥分枝桿菌致敏素進行皮膚遲發(fā)反應進行評估認為，7％～12％的成年人已經是MAC的亞臨床感染者。而用抗體檢測，所用的抗原很有可能與MAC的抗原有同源性，從而導致假陽性反應。

4.2 造成假陰性結果的因素

4.2.1 免疫水平的影響：不同人群機體的免疫水平存在差異，患者處于臨床感染的初期，體內抗體水平較低，未達到檢測的最低量，尚處于“窗口期”，易產生抗體陰性。Yoshinari等［23］等報道，感染結核后1～2個月才能檢測到IgG，而這與國內報道的有一定的區(qū)別，但究竟“窗口期”是多長時間，尚無定論。

4.2.2 重癥患者：一些重癥肺結核患者（如HIV等）雖然痰結核菌陽性，但由于免疫功能相對較弱，或用藥后抑制了免疫功能，抗體檢測容易出現陰性，但經過治療，全身情況好轉后，抗體可以陽轉。

4.2.3 老年人：老年人機體功能退行性病變，免疫系統(tǒng)功能紊亂，細胞免疫下降，一旦感染結核分枝桿菌或陳舊病灶復發(fā)，往往病情重，進展快，易出現干酪樣壞死性空洞或纖維厚壁空洞，甚至發(fā)展為難治性肺結核。而其免疫學反應卻易出現假陰性反應。

4.3 其他影響因素

4.3.1 不同地區(qū)人群對檢測結果的影響：人類白細胞抗原組成不同，不同人群對來源于East-6和CFP10的蛋白的多肽抗原的識別存在較大差異。

4.3.2 治療的階段性對檢測的影響：白廣紅等［24］研究證明結核病患者受16KD、38KD、LAM3種抗原刺激產生的3種特異性抗體與患者感染結核菌的嚴重程度有著較強的正相關關系。當患者受到結核菌嚴重感染時，結核抗體水平會增高；當結核患者受到治療時，結合抗體水平會下降。如抗酸染色陽性的菌陽患者，結核生物蛋白芯片檢測的陽性率達86.4％（184/213），經過治療的住院患者，結核生物蛋白芯片檢測的陽性率為51.3％，抗體水平下降。

劉尚武等［25］報道，未治療的結核患者，EAST-6、LAM和38KDa高于對照組，治療后，EAST-6、Rv2626c降低，而38KDa、LAM水平增高。治療8個月后，相比發(fā)病較輕的患者，中等程度和嚴重程度的患者具有較高的ESAT-6、FdxA和38KDa。而陳舊性結核的患者抗TBGL抗體和抗LAM的陽性水平明顯高于無陳舊性結核的患者。

4.3.3 肺結核的侵犯范圍和損傷程度：肺結核的范圍越廣泛，IgG抗體的水平越高（P＜0.01），纖維空洞性結核中IgG和IgA抗體的水平最高，空洞只與抗38+16KDaIgG抗體水平有關（P＜0.01），而干酪性肺結核中IgA抗體的水平最高。雙側損害的患者，8個月后，38KD、LAM高于單側的肺損害。這一發(fā)現一方面提示這些關聯抗原特異性地受到抗結核治療的影響，同時也提示部分血清學標志可以用來預測治療后果。

4.3.4 糖尿病的影響：糖尿病先于結核病占70％～85％。一般認為，糖尿病患者血糖過高，組織內含糖量也高，有利于結核桿菌的生長繁殖，并且，高血糖導致白細胞吞噬能力下降，機體殺菌能力降低，有利于結核桿菌的存活，而同時，活動性結核病能促使糖代謝進一步紊亂。糖尿病患者尤其是2型糖尿病患者血清ADA明顯升高。

4.3.5 年齡的影響：抗38KD［26］和LAM的IgG和IgM抗體水平與年齡之間的關系是獨立且相反的，在兒童期，抗體水平較低，在老齡期，抗體水平高。

4.3.6 檢測方法的影響：除抗原的選擇外，CUTOFF值的設定等也會影響檢測結果。

4.3.7 結核菌L型的存在

綜上所述，隨著結核分枝桿菌特異性抗原的進一步純化，促進了結核病免疫學診斷的發(fā)展。但是結核分枝桿菌的抗原多而復雜且分枝桿菌的體液免疫反應與HLAⅡ類抗原的表型密切相關，眾多的結核分枝桿菌特異性抗原在結核診斷中如何應用尚無定論；并且不同患者的免疫細胞識別細菌的抗原不同，其反應性有所不同，單獨一種抗原不能被所有結核患者的免疫細胞所識別；再加上眾多因素導致了免疫學實驗假陽性、假陰性的存在。因此，相關蛋白抗原的融合表達或幾種抗原的聯合應用是今后結核診斷的發(fā)展方向。

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（本文編輯：劉斯靜）

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A

1007-3205（2013）11-1475-06

2012-11-20；

2013-03-27

史玲莉（1977-），女，河北保定人，河北省出入境檢驗檢疫局保健中心主管技師，醫(yī)學學士，從事衛(wèi)生檢疫研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2013.11.047