馮 金，孟慶艷，胡宏波 (廣西柳州市柳鐵中心醫(yī)院檢驗科，廣西 柳州 545007)

D－二聚體(D－dimer，D－D)是交聯(lián)纖維蛋白在纖溶酶水解后所形成的特異性降解產(chǎn)物，是體內(nèi)高凝狀態(tài)和繼發(fā)纖溶亢進的分子標志物。隨著研究的進展，D－二聚體已經(jīng)逐漸被認為是確診深靜脈血栓(DVT)、肺栓塞(PE)、彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)等疾病的關(guān)鍵指標［1－3］;此外，D二聚體還被認為是評估惡性腫瘤、心腦血管疾病和肝臟疾病等多種疾病的病情，療效及預(yù)后的可靠指標［4－6］。D－二聚體的測定應(yīng)用于臨床，對多種疾病的診斷、療效觀察、預(yù)后判斷具有廣泛的應(yīng)用價值。目前檢測的方法很多，主要有膠乳凝集法、免疫比濁法、酶聯(lián)免疫吸附法和免疫滲濾法等。近年來，筆者對免疫比濁法和膠乳凝集法兩種D－二聚體的檢測方法進行了比較，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料:標本均來自2012年在我院住院患者和健康體檢者，其中患病組150例，男89例，女61例，平均年齡(57±10.9)歲，為在我院神經(jīng)內(nèi)科住院的患者。健康體檢組50例，其中男35例，女15例，平均年齡(55±6.24)歲，均證實無創(chuàng)傷、血栓性疾病、肝病、無心腦血管疾病和腫瘤等。

1.2 方法:真空采血管(含枸櫞酸鈉溶液抗凝劑)采集患者清晨空腹靜脈血。3 000 r/min離心15 min，分離乏血小板血漿待測。并在2 h內(nèi)完成檢測。免疫比濁法測定D－二聚體含量時采用SYSMEX CA7000全自動凝血儀，所使用試劑質(zhì)控品和標準品均為siemens Dade(德靈)血凝試劑。嚴格按照儀器操作規(guī)程進行操作，測定的正常參考值為0～500 mg/L，超出500 mg/L判定為陽性結(jié)果。膠乳凝集法測定D－二聚體含量時所采用的試劑購自天津美德太平洋，嚴格按照膠乳凝集法操作手冊中操作步驟進行，測定的正常參考結(jié)果為陰性，即無肉眼可見的顆粒形成。

1.3 統(tǒng)計學分析;采用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗，P＜0.01為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

免疫比濁法和膠乳凝集法分別檢測患者及健康體檢者D－二聚體檢出率，結(jié)果如表1和表2所示，健康體檢者兩種方法檢測均未出現(xiàn)陽性結(jié)果，在150例患者中，免疫比濁法所檢測的陽性率為84%，顯著高于膠乳凝集法的陽性檢測率(34.6%)，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。

表1 健康體檢者血漿D－二聚體兩種方法檢測陰性率和陽性率比較(n=50)

表2 患者血漿D－二聚體兩種方法檢測陰性率和陽性率比較(n= 150)

3 討論

D－二聚體的檢測在國內(nèi)已開展多年，為血栓性疾病的診斷治療、纖溶活性的鑒別以及腫瘤患者的治療、觀察、預(yù)后等都提供了重要的參考價值［7－8］。

D－二聚體的檢測方法可分為半定量和定量。半定量檢測方法中比較常用的方法是乳膠凝集法，其原理是被檢血漿中D－二聚體與包被在乳膠顆粒上的單抗相作用，產(chǎn)生絮狀沉淀反應(yīng)。乳膠凝集法由于其簡單的操作方法，不需要復(fù)雜的儀器，適用于床邊檢測(POCT)，適合臨床上個體檢測;此外，由于乳膠凝集法快速、經(jīng)濟，該方法在各個基層醫(yī)院中得到廣泛推廣。免疫比濁法是定量方法中較常用的方法之一。其工作原理是:標本中D－二聚體與包被有高特異性D－二聚體單克隆抗體的乳膠顆粒結(jié)合后，乳膠顆粒發(fā)生凝集，在405 nm波長下檢測透射光強度的變化，凝集程度與標本中D－二聚體的含量成正比。免疫比濁法由于其準確、快速、簡便的特點，尤其通常是由自動化儀器完成檢測，具有更高的靈敏度與精密度，避免了人工加樣的偶然誤差，在臨床上也得到廣泛應(yīng)用。

根據(jù)上述試驗結(jié)果，D－二聚體的兩種檢測方法——乳膠凝集法和免疫比濁法均有良好的陰性預(yù)期值，但兩者的敏感性存在很大差異。經(jīng)χ2檢驗分析比較，兩種檢測方法的結(jié)果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)免疫比濁法的敏感性顯著高于乳膠凝集法。在本研究中，筆者發(fā)現(xiàn)，只有在含量＞5 000 mg/L的標本(采用免疫比濁法檢測)，乳膠凝集法才呈現(xiàn)陽性結(jié)果，因此，乳膠凝集法的陽性預(yù)期值不佳。反觀使用SYSMEX CA7000免疫比濁法檢測D－二聚體，該法能夠?qū)吮局械腄－二聚體進行準確快速的定量，具有良好的陰性預(yù)期值和陽性預(yù)期值。此外，在陽性結(jié)果的判斷上，乳膠凝集法往往存在主觀差異，且無法給出具體的數(shù)值，因此乳膠凝集法檢測標本中的D－二聚體雖然對排除和診斷DIC、深靜脈血栓、肺栓塞有一定幫助，但無法給臨床醫(yī)生提供治療效果的依據(jù)及病情的監(jiān)測。而免疫比濁法使用方便、操作簡單，可適用于各種生化分析儀，并可實現(xiàn)定量測定，為疾病的治療、觀察、預(yù)后等都提供了重要的參考價值。

綜上所述，筆者認為，免疫比濁法準確、快速、簡便，具有較高的靈敏度，并可實現(xiàn)定量測定，滿足了臨床急診需要，值得在各大中型醫(yī)院中推廣使用。

［1］ 黃榮寧，陳顯源，林 英，等.D二聚體、血氣分析測定在慢性阻塞性肺疾病中的價值探討［J］.海南醫(yī)學，2012，23(1): 82.

［2］ Rumpf TH，Krizmaric M，Grmec S，etal.Capnometry in suspected pulmonary embolism with positive D－dimer in the field［J］.Crit Care，2009，13(6):R196.

［3］ Madzhuga AV，Somonova OV，Elizarova AL，etal.The clinical value of D－dimer in the diagnosis and treatment of thromboembolic complications and DIC syndrome in cancer patients［J］.Anesteziol Reanimatol，2005，(5):55.

［4］ Oya M，Akiyama Y，Okuyama T，et al.High preoperative plasma D－dimer level is associated with advanced tumor stage and short survival after curative resection in patients with colorectal cancer［J］.Jpn JClin Oncol，2001，31(8):388.

［5］ Suega K，Bakta IM.Correlation between clinical stage of solid tumor and D dimer as amarker of coagulation activation［J］.Acta Med Indones，2011，43(3):162.

［6］ 卡米拉，朱 琳，許蓮芬，等.十種病種D二聚體檢測結(jié)果的分析［J］.海南醫(yī)學，2004，15(12):116.

［7］ Malato A，Saccullo G，Iorio A，et al.Residual vein thrombosis and D－dimer for optimizing duration of anticoagulation in idiopathic deep vein thrombosis［J］.Curr Pharm Des，2010，16(31): 3483.

［8］ 余 杏，姚 敏，魏曉斌，等.血漿D二聚體在臨床疾病診斷中的應(yīng)用［J］.海南醫(yī)學，2012，23(6):129.