劉燁華 鄧玉菡 姜超辰（大連華信理化檢測中心有限公司，遼寧大連）

生物安全柜是一種負(fù)壓過濾排風(fēng)柜，是為保護操作者本人、實驗環(huán)境以及實驗樣品而設(shè)計的，使操作者避免暴露于操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物。是實驗室保障生物安全和環(huán)境安全的重要基礎(chǔ)，也是實驗室生物安全中一級防護屏障中最基本的安全防護設(shè)備。正確使用生物安全柜可以有效減少由于氣溶膠暴露所造成的實驗室感染以及培養(yǎng)物交叉污染。

一、原理及作用

生物安全柜一般是循環(huán)風(fēng)和排風(fēng)按一定比例設(shè)計。循環(huán)風(fēng)經(jīng)過濾后以垂直單向氣流方式流向操作區(qū)。保證操作區(qū)始終維持在好于潔凈度等級10～100級以上的程度，這樣操作人員在生物安全柜工作區(qū)的氣流分界區(qū)域附近進(jìn)行作業(yè)時，腔內(nèi)操作產(chǎn)生的污染氣溶膠會迅速徹底地進(jìn)入生物安全柜前后兩面的吸風(fēng)槽，使樣品之間不受相互的交叉污染。

生物安全柜運行時在它前面的玻璃移門下放有一個高度200mm的吸風(fēng)口。由于有30%的排風(fēng)，生物安全柜需源源不斷地吸入空氣。經(jīng)前面的吸風(fēng)槽將室內(nèi)空氣和部分下送氣流進(jìn)行充分混合進(jìn)入生物安全柜回風(fēng)道，使生物安全柜內(nèi)的污染氣溶膠始終不會通過人員的操作窗口向外界擴散。

總的來說，生物安全柜起到一個過濾和保護的作用。生物安全柜是為了生物實驗過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計的。有效地避免了實驗室感染以及培養(yǎng)物的交叉污染。

二、生物安全柜的選擇

根據(jù)生物安全防護水平的差異，生物安全柜可分為一級、二級和三級。其中一級生物安全柜由于只保護工作人員與環(huán)境而不保護樣品，目前已經(jīng)很少使用。二級生物安全柜是目前應(yīng)用最廣的柜型。按照中國國家食品藥品監(jiān)督管理局在2005年7月頒布的生物安全柜標(biāo)準(zhǔn)YY0569-2005中的規(guī)定二級生物安全柜依照入口氣流速度、排氣方式和循環(huán)方式可分為4個級別：A1型、A2型、B1型和B2型。所有二級生物安全柜都可以提供人員、環(huán)境、樣品的保護，二級生物安全柜適用于絕大多數(shù)生物實驗。三級生物安全柜的柜體完全氣密，樣品通過雙門的傳遞箱進(jìn)出安全柜以確保不受污染，工作人員通過連接在柜體的手套進(jìn)行操作，俗稱“手套箱”。適用于高風(fēng)險的生物實驗。

總之，實驗對象為已知的，所有特性都已清楚并已證明不會致病的微生物檢測或者生物制藥、電子光學(xué)儀器檢測等選用超凈工作臺；未知樣本或檢測致病性、傳染性微生物樣本時應(yīng)選用生物安全柜。

三、生物安全柜與超凈工作臺的區(qū)別

生物安全柜一般是用于致病菌，操作區(qū)域是負(fù)壓，簡單說是往處抽風(fēng)的。生物安全柜能夠完全保護工作人員、受試樣品并防止交叉污染的發(fā)生。未知樣本或檢測致病性、傳染性微生物樣本時應(yīng)選用生物安全柜。目前生物安全柜廣泛應(yīng)用于醫(yī)療衛(wèi)生、疾病預(yù)防與控制、食品衛(wèi)生、生物制藥及各類生物實驗室等領(lǐng)域。

超凈臺是做一般對人體沒有直接傷害的常規(guī)細(xì)菌的操作實驗，正壓送風(fēng)，吹向樣品以及實驗人員的風(fēng)是經(jīng)過過濾器過濾，達(dá)到局部百級。超凈臺就相當(dāng)于一個縮小了的無菌室 （無菌空間）。超凈工作臺只保護操作對象而不保護工作人員和實驗室環(huán)境。它的優(yōu)點是操作簡單自如，預(yù)備時間短，開機十分鐘以上即可操作，基本上可隨時使用。在實驗對象為已知的，所有特性都已清楚并已證明不會致病的微生物檢測或者生物制藥、電子光學(xué)儀器檢測等選用超凈工作臺。在工廠化生產(chǎn)中，接種工作量很大，需要經(jīng)常長久地工作時，超凈臺是很理想的設(shè)備。具體區(qū)別如下：

表 生物安全柜和超凈工作臺的區(qū)別

四、生物安全柜在環(huán)境監(jiān)測中的應(yīng)用

目前環(huán)境監(jiān)測領(lǐng)域中微生物實驗室大多使用超凈工作臺，但由于環(huán)境監(jiān)測樣本的特殊性，生物安全柜必將逐步取代超凈工作臺。

環(huán)境中的常見致病微生物包括病毒、立克次體、細(xì)菌、真菌、寄生蟲等，這些致病微生物廣泛的存在于水體、大氣、固體廢棄物當(dāng)中，很多以水溶膠的形式被人吸收感染致病。其中空氣中的病原微生物包括流感病毒、軍團菌、結(jié)核桿菌等等；水中病原微生物一般不是水體固有，大多來源于人和動物糞便污染，但致病微生物在自然水體中可存活一段時間（如志賀氏菌在污水、污泥中存活時間可接近一年）；土壤中的病原微生物很多是環(huán)境正常菌，也有特殊的如副溶血弧菌、鏈球菌等。這些病原微生物廣泛的存在于環(huán)境中，使得環(huán)境監(jiān)測樣本可能富含一種或多種致病微生物。環(huán)境—微生物檢測樣本的來源不僅僅是潔凈的飲用水和地下水，還包括廢水、生活污水、海水等，也使得樣本中有可能富含致病微生物。與此同時，污染物排放過程中對環(huán)境正常菌的誘導(dǎo)變異，使得環(huán)境監(jiān)測樣本中有可能出現(xiàn)特殊變異的致病菌。所以為了有效地保證環(huán)境檢測人員的自身安全和實驗環(huán)境安全，環(huán)境監(jiān)測—微生物實驗室應(yīng)該配備生物安全柜。

參考資料：

【1】生物安全柜（YY05692005）(2005.7.18)國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布 醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（YY）