涂 平

（河南省鄭州大學第一附屬醫(yī)院口腔科，鄭州450052）

Caspase-3蛋白在口腔白斑轉(zhuǎn)化為口腔鱗狀細胞癌中的作用

涂 平

（河南省鄭州大學第一附屬醫(yī)院口腔科，鄭州450052）

目的 研究Caspase-3蛋白在口腔正常黏膜、口腔白斑（OLK）和口腔鱗狀細胞癌中的表達，以了解Caspase-3在口腔癌前病變發(fā)生發(fā)展過程中的作用及臨床意義，為癌變潛能監(jiān)測提供診斷指標。方法 采用免疫組化技術(shù)SP法對標本進行Caspase-3蛋白染色，并計算它的陽性表達。結(jié)果 Caspase-3蛋白在口腔正常黏膜及不同病變的表達，經(jīng)統(tǒng)計學分析，隨著組織異常程度的增加，Livin蛋白陽性表達強度具有遞減的趨勢（P＜0.05）。結(jié)論 Caspase-3蛋白隨著組織異常程度的增加有逐漸下降的趨勢，提示Livin蛋白的低表達可能對OLK癌變的發(fā)展起重要作用。

Caspase-3；口腔白斑；口腔鱗狀細胞癌

1 材料與方法

1.1 材料 所有標本均選自鄭州大學醫(yī)學院一附院病理科1995～2006年存檔的蠟塊和口腔科活檢或手術(shù)切取的組織（經(jīng)10%福爾馬林固定，石蠟包埋）。選取12例單純增生型口腔白斑，38例異常增生型口腔白斑（其中輕度11例，中度13例，高度14例），37例口腔鱗狀細胞癌（其中Ⅰ級11例，Ⅱ級14例，Ⅲ級12例）。10例口腔正常黏膜作為對照組。共97例，其中男76例，女21例；年齡（56.84±6.32）歲；部位：頰（50例），舌（47例）。

1.2 方法 采用免疫組化技術(shù)SP法對所有標本進行Caspase-3蛋白染色，并計算它的陽性表達。

1.3 統(tǒng)計學方法 資料采用絕對數(shù)和相對數(shù)進行表示，使用SPSS13.0進行統(tǒng)計學處理。Livin的表達率的比較采用χ2檢驗或直接概率。

2 結(jié)果

caspase-3蛋白的陽性表達位于細胞質(zhì)／核，呈棕黃色顆粒，彌散分布。在正常黏膜組織和單純增生型OLK組織中，Caspase-3蛋白均高表達，在異常增生型OLK組織中Caspase-3蛋白的陽性表達明顯降低，表達率為63.16%；caspase-3蛋白在OSCC組織中低表達或表達于細胞質(zhì)中，其陽性表達率為43.24%，且主要為中等及弱陽性染色。經(jīng)χ2檢驗：單純增生型OLK組的陽性表達率與正常組比較無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），異常增生OLK組和鱗癌組與正常組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

按組織異常程度將組織分為八個級別，依次分別是正常黏膜、單純增生型OLK、輕度異常增生OLK、中度異常增生OLK、重度異常增生OLK、鱗癌Ⅰ級、鱗癌Ⅱ級、鱗癌Ⅲ級。Caspase-3蛋白表達陽性程度隨組織異常程度的增加而降低，rs=-0.349，P＜0.05，見表1。

表1 caspase-3蛋白在不同病變組織中的表達 （n，%）

3 討論

凋亡（apoptosis）是正常體細胞維持穩(wěn)定的重要保護機制之一，是調(diào)節(jié)機體組織平衡的重要機制，其過程受到嚴密的控制。基因異常改變細胞凋亡受抑制，最終導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生和演進［1］。Caspase蛋白酶家族（即含半胱氨酸的天冬氨酸特異性蛋白酶）是細胞凋亡的中心環(huán)節(jié)。

正常時Caspase均以無活性的酶前體的形式存在于細胞內(nèi)，并不具有生物學功能。Caspase在細胞凋亡中的作用主要有3個：①滅活阻止細胞凋亡的細胞內(nèi)物質(zhì)。②通過對細胞結(jié)構(gòu)的直接酶解而促進凋亡（如：核纖層蛋白的破壞）。③通過對一些細胞骨架調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白質(zhì)的酶解而改變細胞結(jié)構(gòu)，包括凝集素、FAK和由P21激活的激酶Ⅱ（PAK2），因這些蛋白分解失活而導(dǎo)致細胞凋亡。

在正常黏膜組織和單純增生型OLK組織中，Caspase-3蛋白均高表達，在異常增生型OLK組織中Caspase-3蛋白的陽性表達明顯降低，表達率為63.16%；Caspase-3蛋白在OSCC組織中低表達或表達于細胞質(zhì)中，其陽性表達率為43.24%，且主要為中等及弱陽性染色。經(jīng)X2檢驗，Caspase-3蛋白在各組織中陽性表達率的差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。在單純增生型OLK組的陽性表達率為83.33%，與正常組比較，無顯著性差異（P＞0.05）；與異常增生OLK組、鱗癌組比較，差異有顯著性（P＜0.05）。結(jié)果提示，當上皮出現(xiàn)增生，特別是出現(xiàn)重度異常增生時，Caspase表達加強來促進異常增生細胞凋亡，進而拮抗細胞的增殖，從而維持細胞數(shù)目的穩(wěn)定。但是相對于細胞增殖速度的增加，上皮異常增生中細胞的絕對凋亡率是降低的，異常增生細胞不斷累積，預(yù)示著重度上皮異常增生的高度危險性。鱗狀細胞癌一旦發(fā)生，此時Caspase-3的表達強度減弱，可能是此期Caspase-3的生物合成已受到某些因素影響，再不能正常發(fā)揮促進細胞凋亡的作用。Caspase-3表達強度在高分化組明顯高于低分化組，提示癌細胞分化程度高，細胞凋亡調(diào)控機制障礙程度輕，癌細胞增殖較弱，患者預(yù)后較好。Caspase-3的表達強度隨組織分化程度增高而增強，表明Caspase-3在癌組織中通過促進癌細胞凋亡而使惡性程度降低；從另一個角度看，Caspase-3是正常分化細胞所具有的，正常細胞向癌細胞轉(zhuǎn)化的過程中易失去某些表型，因而有理由認為Caspase-3隨著分化降低而表達減少，是腫瘤異常分化的結(jié)果。

OLK病因復(fù)雜、發(fā)病機制不明，在臨床上可無任何癥狀，因此治療重點應(yīng)是防止或減少其惡性轉(zhuǎn)變，治療方法包括藥物治療和非藥物治療（手術(shù)、激光、冷凍），中醫(yī)藥也可以作為OLK的可行性治療措施之一，如中藥復(fù)方冬菊對4NQO誘導(dǎo)的大鼠舌白斑癌變的中藥干預(yù)組cy-clin D1的陽性表達率明顯低于癌變模型組［2］。

因此，早期檢測Caspase-3有助于辨明口腔OLK是否發(fā)展成為OSCC，具有早期診斷的價值。

［1］Steller H.Mechanisms and genes of cellar suicide［J］．Science，1995，267（5263）：1445-1449．

［2］葛姝云，周曾同．中藥復(fù)方冬菊對鼠舌白斑癌變的阻斷作用［J］．上海交通大學學報（醫(yī)學版），2006，26（10）：1119-1121．

10.3969／j.issn.1672-2779.2013.05.035

1672-2779（2013）-05-0053-02

蘇 玲

2013-02-17）