■魏金濤 楊雪海 趙 娜 李紹章 郭萬正 黃少文 嚴(yán)念東 張 巍

（湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，湖北武漢 430064）

豆粕是飼料加工及畜禽養(yǎng)殖中應(yīng)用十分廣泛的蛋白質(zhì)飼料原料，但是豆粕中含有大量的抗?fàn)I養(yǎng)因子，諸如胰蛋白酶抑制因子、大豆抗原蛋白、寡糖等，限制了其在幼齡動(dòng)物中的使用。微生物發(fā)酵可以降低或消除豆粕中部分抗?fàn)I養(yǎng)因子，如大分子蛋白被降解為小分子蛋白、植酸磷被降解為無機(jī)磷，提高了豆粕的營養(yǎng)價(jià)值。酶解也是改善豆粕蛋白質(zhì)特性的一種很好的方法，大豆蛋白酶解物具有比大豆蛋白相同組成氨基酸更豐富的加工特性、營養(yǎng)特性和生理功能。陳美珍等（2002）研究認(rèn)為，大豆蛋白酶解物對Fenton體系產(chǎn)生的羥自由基有清除作用。潘翠玲等（2006）利用大豆蛋白酶解物替代動(dòng)物蛋白飼喂21日齡斷奶仔豬發(fā)現(xiàn)，大豆蛋白酶解物能克服早期斷乳應(yīng)激引起的仔豬食欲下降、腹瀉和生長遲滯等不良現(xiàn)象，對早期斷乳仔豬臟器的生長有一定的促進(jìn)作用，而且對早期斷乳應(yīng)激引起的內(nèi)分泌紊亂也有一定的調(diào)節(jié)和改善作用。但是，單純發(fā)酵耗時(shí)長、損耗大、效率低；單純酶解雖然耗時(shí)短、損耗小、效率高，但是雜菌增殖難以控制，在酶解過程中加入益生菌發(fā)酵可以有效地抑制大腸桿菌等雜菌的增殖。本試驗(yàn)即將木瓜蛋白酶和不同益生菌進(jìn)行復(fù)合對豆粕進(jìn)行酶解和發(fā)酵，研究豆粕的酶解發(fā)酵物對仔豬的生產(chǎn)性能、血液生化指標(biāo)及抗氧化性能的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)在武漢市金鷹牧業(yè)有限公司一廠進(jìn)行。選擇健康閹公豬[(15.15±0.32)kg]24頭，隨機(jī)分為4組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭豬，每頭豬單欄飼養(yǎng)。

1.2 豆粕酶解發(fā)酵物的制備

取塑料桶3個(gè)，每個(gè)桶中均加入800 g粉碎過1.5 mm篩片的豆粕和木瓜蛋白酶（按300 U/g添加），分別按2×108cfu/g接種量接種酵母菌（試驗(yàn)1組）、植物乳桿菌（試驗(yàn)2組）和酵母菌和植物乳桿菌（試驗(yàn)3組）后加入37℃溫水2.8 kg，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中酶解發(fā)酵24 h，備用。飼喂用的豆粕酶解發(fā)酵物均需提前1 d進(jìn)行制備，每天7：00和15：00各制備1次。

1.3 試驗(yàn)日糧

對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組日糧用豆粕酶解發(fā)酵物同比例替代基礎(chǔ)日糧中豆粕的10%，基礎(chǔ)日糧的配方及營養(yǎng)水平見表1。

3個(gè)試驗(yàn)組飼料飼喂前均添加自來水做成濕拌料，精確計(jì)算水的添加量，保證加入的水占配合飼料的25.9%。

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)豬預(yù)飼7 d后空腹稱重后正式開始試驗(yàn)，每天7：30和15：30準(zhǔn)時(shí)飼喂，自由采食、自由飲水，當(dāng)日飼喂，當(dāng)日用完，第2 d早上喂料前先清理料槽中的剩料。正式試驗(yàn)期28 d，28 d后空腹稱重。稱重時(shí)從每組中挑選3頭平均大小的仔豬進(jìn)行前腔靜脈采血。采血后立刻離心(2 000 r/min、離心10 min)，分離的血清儲存于-20℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5 試驗(yàn)方法

常規(guī)營養(yǎng)成分含量參照張麗英方法進(jìn)行。

血清尿素氮、白蛋白、球蛋白、總蛋白濃度及堿性磷酸酶、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶活性等生化指標(biāo)，總抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量等血清抗氧化性能指標(biāo)采用南京建成生物工程研究所試劑盒測定，按照試劑盒說明書嚴(yán)格操作。

表1 試驗(yàn)日糧配方及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，并進(jìn)行Duncan's法多重比較。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 不同豆粕酶解發(fā)酵物對仔豬生長性能的影響（見表2）

從表2可以看出，飼喂添加10%不同豆粕酶解發(fā)酵物的仔豬平均日增重和對照組相比分別顯著提高了 7.46%、9.29%和10.58%（P＜0.05）。平均日采食量方面，飼喂添加酵母菌和木瓜蛋白酶進(jìn)行酶解發(fā)酵的豆粕酶解發(fā)酵物組(試驗(yàn)1組)和對照組相比提高了4.88%，但差異不顯著（P＞0.05）；飼喂添加乳酸菌和木瓜蛋白酶進(jìn)行酶解發(fā)酵的豆粕酶解發(fā)酵物仔豬(試驗(yàn)2組)，飼喂添加乳酸菌、酵母菌和木瓜蛋白酶進(jìn)行酶解發(fā)酵的豆粕酶解發(fā)酵物仔豬（試驗(yàn)3組）平均日采食量分別比對照組顯著提高了7.15%和8.52%（P＜0.05）。

2.2 不同豆粕酶解發(fā)酵物對仔豬血液生化指標(biāo)的影響（見表3）

表3 不同豆粕酶解發(fā)酵物對仔豬血液生化指標(biāo)的影響

從表3可以看出，血液生化指標(biāo)方面，飼喂添加10%豆粕酶解發(fā)酵物的仔豬血清總蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮的含量均和對照組相比沒有顯著性差異（P＞0.05）；血清堿性磷酸酶和丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶活性方面，飼喂乳酸菌、酵母菌和木瓜蛋白酶同時(shí)進(jìn)行酶解發(fā)酵的豆粕酶解發(fā)酵物組(試驗(yàn)3組)顯著高于對照組和酵母菌、木瓜蛋白酶酶解發(fā)酵組(試驗(yàn)1組)（P＜0.05），丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶活性高于乳酸菌、木瓜蛋白酶酶解發(fā)酵組(試驗(yàn)2組)，而堿性磷酸酶活性低于乳酸菌、木瓜蛋白酶酶解發(fā)酵組（試驗(yàn)2組），但是沒有顯著性差異（P＞0.05）。

2.3 不同豆粕酶解發(fā)酵物對仔豬抗氧化性能的影響

試驗(yàn)測定了仔豬血清中超氧化物歧化酶（SOD）酶活、丙二醛（MDA）含量和總抗氧化能力（T-AOC），結(jié)果見表4。從表4可以看出，飼喂豆粕酶解發(fā)酵物仔豬血清中所測的抗氧化能力指標(biāo)均顯著優(yōu)于對照組（P＜0.05），但是飼喂3種豆粕酶解發(fā)酵物仔豬血清中抗氧化能力沒有顯著性差異（P＞0.05）。

表4 不同豆粕酶解發(fā)酵物對仔豬抗氧化性能的影響

3 討論

3.1 豆粕酶解發(fā)酵物對仔豬生長性能的影響

豆粕中蛋白質(zhì)分子較大，結(jié)構(gòu)緊密，而且還含有β-伴大豆球蛋白等抗?fàn)I養(yǎng)因子，將豆粕用微生物及蛋白酶進(jìn)行酶解或發(fā)酵均可以改變其中營養(yǎng)物質(zhì)的物理和化學(xué)結(jié)構(gòu)，大豆蛋白的抗原性可以得到有效的消除，大分子的大豆蛋白降解為小分子蛋白、小肽及游離氨基酸；同時(shí)，還可以減少或者消除豆粕中的脲酶、植酸磷等抗?fàn)I養(yǎng)因子，從而提高飼料轉(zhuǎn)化率。Kiers等(2003)認(rèn)為仔豬的消化酶系統(tǒng)尚未發(fā)育完全，對于植物蛋白質(zhì)的消化能力弱，而發(fā)酵豆粕中含有豐富的植物源蛋白多肽，易于幼齡動(dòng)物消化吸收。飼喂發(fā)酵豆粕后可顯著提高仔豬的生產(chǎn)性能。劉欣等（2007）用微生物發(fā)酵豆粕替代斷奶仔豬飼糧中的普通豆粕后發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵豆粕對改善斷奶仔豬消化道的應(yīng)激反應(yīng)有良好作用，且適口性良好，飼喂微生物發(fā)酵豆粕使仔豬料重比顯著降低了5.56%。章世元等（2009）用發(fā)酵豆粕替代仔豬飼料中的豆粕后發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)仔豬的生長性能顯著提高。蔡國林等（2008）用酵母菌和乳酸菌混合發(fā)酵豆粕飼喂肉豬，結(jié)果表明，發(fā)酵豆粕可以改善肉豬平均增重、料重比。本試驗(yàn)使用3種不同豆粕酶解發(fā)酵物等比例代替豆粕飼喂仔豬，仔豬的平均日增重、平均日采食量和料肉比等生長性能均得到了一定程度的改善，和前人研究結(jié)論一致。但本試驗(yàn)沒有進(jìn)行梯度試驗(yàn)，下一步工作應(yīng)對豆粕酶解發(fā)酵物在仔豬日糧中適宜的添加量進(jìn)行系統(tǒng)的研究。

3.2 豆粕酶解發(fā)酵物對仔豬血液生化指標(biāo)的影響

血清中尿素氮的水平反映了血液中氨基酸合成蛋白質(zhì)效率的高低，血清尿素氮降低反映了動(dòng)物蛋白質(zhì)合成代謝增強(qiáng)，反之則減弱。血清堿性磷酸酶作為具有遺傳標(biāo)記的同工酶，其活性高低可以反映動(dòng)物的生長速度和生產(chǎn)性能，其活性與豬的平均日增重、鈣磷的利用率均呈正相關(guān)。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼喂豆粕酶解發(fā)酵物的仔豬血清尿素氮含量有所降低，而堿性磷酸酶活性和對照組相比有一定程度提高，說明仔豬飼喂豆粕酶解發(fā)酵物后有著較好的生長速度，這一點(diǎn)也證實(shí)了豆粕酶解發(fā)酵物對仔豬的生長性能具有提高作用。

3.3 豆粕酶解發(fā)酵物對仔豬血液抗氧化能力的影響

機(jī)體防御體系的抗氧化能力的強(qiáng)弱與健康程度存在著密切的聯(lián)系，該防御體系（包括SOD、GSH-Px、CAT等）各成分之間相互起到了協(xié)同的作用，以及代償作用與依賴作用。該防御體系能使Fe3+還原成Fe2+，后者可與菲林類物質(zhì)形成穩(wěn)固的絡(luò)合物，通過比色可測出其總抗氧化能力（TAOC）的高低。SOD能清除超氧陰離子自由基，保護(hù)細(xì)胞免受傷害。機(jī)體通過酶系統(tǒng)與非酶系統(tǒng)產(chǎn)生氧自由基，后者能攻擊生物膜中的不飽和脂肪酸，引發(fā)脂質(zhì)過氧化作用，并因此形成脂質(zhì)過氧化物，如MDA（丙二醛）。MDA濃度的高低又間接反映了機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼喂豆粕酶解發(fā)酵物仔豬血清中SOD、T-AOC活性顯著高于飼喂豆粕的對照組，而MDA含量顯著低于飼喂豆粕的對照組，說明豆粕酶解發(fā)酵物具有提高仔豬機(jī)體抗氧化能力的作用。

4 結(jié)論

豆粕酶解發(fā)酵物對仔豬具有較好的促生長、抗氧化的作用，可以作為仔豬良好植物性蛋白質(zhì)飼料原料應(yīng)用。

（參考文獻(xiàn)19篇，刊略，需者可函索）