邱昌文，顏秀娟，姜 瑩

（廣西壯族自治區(qū)南寧中心血站 530003）

對(duì)獻(xiàn)血者血液標(biāo)本ABO、Rh（D）及不規(guī)則抗體的血型篩檢是血站血液篩查實(shí)驗(yàn)室的一個(gè)重要項(xiàng)目。ABO血型、Rh（D）血型的鑒定要求100%準(zhǔn)確，這關(guān)系到輸血患者的生命安全［1］。ABO血型定型的方法有紙片法、試管離心法、U型微板法、梯形微板法、微柱凝膠法。傳統(tǒng)的手工平板法不僅效率低，而且易因人為因素產(chǎn)生血型誤定等嚴(yán)重后果。經(jīng)典的試管離心方法目前仍被認(rèn)為是最可信賴(lài)的ABO定型方法［2］，但操作復(fù)雜與紙片法一樣不適合血站系統(tǒng)大批量的檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化檢測(cè)不僅提高實(shí)驗(yàn)室的高通量檢測(cè)效率，而且可以減少人為操作錯(cuò)誤發(fā)生的機(jī)會(huì)，保證輸血安全。目前國(guó)內(nèi)血液篩查實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用全自動(dòng)血型檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行血型檢測(cè)，有的方法較先進(jìn)，但因儀器價(jià)格昂貴、耗材成本高［3－4］，一直未能得到推廣使用。因此，探討一種高通量、結(jié)果精確且價(jià)格適合的自動(dòng)化血型檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)于血站系統(tǒng)而言有重要意義。本站血液篩查實(shí)驗(yàn)室2008年引進(jìn)瑞士HAMILTON公司生產(chǎn)的全自動(dòng)血型分析儀STAR BG，現(xiàn)將應(yīng)用情況報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 自2011年1～12月118 128例經(jīng)乙二胺四乙酸二鉀抗凝的日常獻(xiàn)血者血液標(biāo)本，全血標(biāo)本試管以3 000 r／min離心10min。

1.2 儀器與試劑 HAMILTON STAR BG全自動(dòng)血型分析儀（瑞士 HAMILTON公司）、96孔 U型SBS微孔板（丹麥NUNC公司）、單克隆抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)血清（上海血液生物有限公司）、抗D標(biāo)準(zhǔn)血清（上海血液生物有限公司），標(biāo)準(zhǔn)A、B、O紅細(xì)胞懸液（血站自配），所有試劑經(jīng)本站確認(rèn)并在使用有效期內(nèi)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 利用全自動(dòng)加樣功能分別取自試管內(nèi)的血漿40μL和紅細(xì)胞懸液30μL（先吸200μL 0.9%NaCl，再吸6μL紅細(xì)胞在檢測(cè)微孔內(nèi)稀釋混勻分樣）分配至微孔板內(nèi)；然后分別加入單克隆抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)血清和抗D標(biāo)準(zhǔn)血清各40μL做正定型檢測(cè)及Rh（D）檢測(cè)，再分別加入2%～3%的A、B、O標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液各30μL做反定型檢測(cè)和鹽水法不規(guī)則抗體篩查；加樣結(jié)束后，血型儀孵育渦旋離心振蕩器自動(dòng)混合、離心及懸浮靜置微板，時(shí)間分別為120s、270s和240s，然后自動(dòng)傳輸96孔U型SBS微孔板至均勻發(fā)光底座上進(jìn)行6次拍照，軟件全自動(dòng)判讀及匯總ABO血型、Rh（D）血型和不規(guī)則抗體篩查結(jié)果；最后在局域網(wǎng)上發(fā)送報(bào)告。同時(shí)，采用瑞士生產(chǎn)的全自動(dòng)加樣儀（STAR）加樣進(jìn)行試管離心方法ABO反定型檢測(cè)比對(duì)；對(duì)血型分析儀結(jié)果顯示為“？”的標(biāo)本用試管法復(fù)查；對(duì)無(wú)法判斷血型結(jié)果和Rh（D）陰性的標(biāo)本送本站血型參比室進(jìn)行血清學(xué)或分子生物學(xué)檢測(cè)確認(rèn)。

2 結(jié) 果

118 128份日常獻(xiàn)血者樣本中，ABO血型檢測(cè)結(jié)果為“？”的有149例，一次判讀不可定型率（一次判讀不可定型標(biāo)本的數(shù)量與檢測(cè)標(biāo)本的數(shù)量比）為0.12%，以血清中相應(yīng)抗體較弱、含不規(guī)則抗體及冷抗體干擾較多見(jiàn)，需要用試管離心法復(fù)查進(jìn)行判定或送本站血型參比室進(jìn)行血清學(xué)或分子生物學(xué)檢測(cè)確認(rèn)，Bx 5例，ABx 2例，Ael 1例，ABO以外不規(guī)則抗體28例，冷自身抗體13例，ABO弱抗體100例。ABO血型一次判讀結(jié)果正確率（一次判讀可定型正確的標(biāo)本數(shù)量與一次判讀可定型標(biāo)本的數(shù)量比）為99.99%，有1例自動(dòng)化檢測(cè)系統(tǒng)將B3亞型伴抗-B抗體誤判為O型；全自動(dòng)血型儀檢測(cè)出Rh（D）陰性251例，經(jīng)本站輸血研究所確認(rèn)250例為Rh（D）陰性，1例為Du型，Rh（D）血型檢測(cè)自動(dòng)判讀定型正確率99.99%，Rh（D）血型檢測(cè)一次判讀不可定型率0%。

3 討 論

本組118 128份獻(xiàn)血者標(biāo)本采用STAR BG全自動(dòng)血型分析儀進(jìn)行ABO正反定型檢測(cè)，一次判讀不可定型率為0.12%，以獻(xiàn)血者血清中相應(yīng)抗體較弱、含不規(guī)則抗體及冷抗體干擾較多見(jiàn)，血型分析儀結(jié)果顯示為“？”，需要用試管離心法復(fù)查進(jìn)行判定或送本站血型參比室進(jìn)行血清學(xué)或分子生物學(xué)檢測(cè)確認(rèn)。本組研究中ABO血型一次判讀結(jié)果正確率為99.99%，高于國(guó)內(nèi)報(bào)道［5］，也高于國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道的98.8%［6］和98.5%［7］，其中有1例自動(dòng)化檢測(cè)系統(tǒng)將B3亞型伴抗-B抗體誤判為O型的血清學(xué)方法檢測(cè)結(jié)果，本例可能是由于紅細(xì)胞與抗B血清呈混合外觀凝集，而血清中又含有抗-B抗體，致使判讀失誤，查看血型圖像發(fā)現(xiàn)B細(xì)胞孔有弱凝集現(xiàn)象，說(shuō)明血型自動(dòng)化檢測(cè)系統(tǒng)，人工圖像確認(rèn)是關(guān)鍵。有149例標(biāo)本自動(dòng)化檢測(cè)系統(tǒng)無(wú)法一次作出判定，占0.12%，以血清中相應(yīng)抗體較弱、含不規(guī)則抗體及冷抗體干擾較多見(jiàn)［8］。因此，在實(shí)際工作中如果碰到ABO正反定型不符，應(yīng)用經(jīng)典常規(guī)方法復(fù)查確認(rèn)，以考慮是否有亞型、弱抗體、不規(guī)則抗體或假凝集等因素存在；Rh（D）血型檢測(cè)一次判讀不可定型率0%，Rh（D）血型檢測(cè)自動(dòng)判讀定型正確率99.99%。

STAR BG全自動(dòng)血型儀實(shí)現(xiàn)了血型檢測(cè)的自動(dòng)化，操作簡(jiǎn)便，降低了人為因素對(duì)實(shí)驗(yàn)造成的影響，凝集圖像直觀，結(jié)果可靠，方便人工核對(duì)。其對(duì)反應(yīng)所需微板無(wú)特殊要求，可一次性使用國(guó)產(chǎn)96孔U型板，避免重復(fù)洗板造成殘留血清纖維、灰塵或水珠影響結(jié)果判讀的現(xiàn)象，降低洗滌污染源對(duì)操作人員的危害等。而且采用微板法減少了抗-D、抗-A和抗-B的用量，具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益，適合血站對(duì)獻(xiàn)血者進(jìn)行批量化血型檢測(cè)。

在使用中如果發(fā)現(xiàn)ABO正反定型不符時(shí)，應(yīng)該用經(jīng)典的常規(guī)方法確認(rèn)，以考慮是否有亞型、弱抗體和假凝集等因素存在。脂血、溶血，以及弱的血型抗體會(huì)影響該方法反定型結(jié)果的判讀，故在工作中要盡量避免脂血和溶血樣品的發(fā)生。

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