尚海濱

（河南創(chuàng)新藥業(yè)有限公司，河南安陽(yáng)456150）

1 問(wèn)題的提出

在中藥制劑生產(chǎn)中，如何滅菌是一大難題。為解決中藥材、中藥飲片、中藥藥粉的滅菌技術(shù)難題，我公司原來(lái)采用乙醇?xì)怏w殺菌法，但是該方法生產(chǎn)效率低、生產(chǎn)周期長(zhǎng)、能源用量大、費(fèi)工費(fèi)時(shí)。后來(lái)，我公司在GMP認(rèn)證技改階段，對(duì)某醫(yī)療器械廠所生產(chǎn)的壓力蒸汽滅菌系統(tǒng)進(jìn)行了驗(yàn)證。通過(guò)對(duì)壓力蒸汽滅菌技術(shù)的反復(fù)操作論證，成功解決了中藥材、飲片、中藥藥粉等物料的滅菌問(wèn)題。壓力蒸汽滅菌法和乙醇?jí)毫φ羝麥缇ㄔ贕MP認(rèn)證工作和日常生產(chǎn)工作中發(fā)揮了重要作用。

2 幾種滅菌方法的對(duì)比

2.1 中藥材、中藥飲片用乙醇?xì)怏w殺菌法和壓力蒸汽滅菌法生產(chǎn)情況對(duì)比

中藥材、中藥飲片用乙醇?xì)怏w殺菌法和壓力蒸汽滅菌法生產(chǎn)情況的對(duì)比如表1所示。

通過(guò)對(duì)比得出：中藥材、中藥飲片乙醇?xì)怏w殺菌法生產(chǎn)效率低、升溫時(shí)間長(zhǎng)、滅菌時(shí)間長(zhǎng)，滅菌后需要晾置3～4天才能使用，否則微生物限度易超標(biāo)，在實(shí)際生產(chǎn)中生產(chǎn)周期長(zhǎng)，需要5～7天，能源用量大，費(fèi)工費(fèi)時(shí)。相反，壓力蒸汽滅菌法生產(chǎn)效率高，生產(chǎn)成本低，節(jié)約能源，省工省時(shí)。

2.2 中藥藥粉用乙醇?xì)怏w殺菌法和乙醇?jí)毫φ羝麥缇ㄉa(chǎn)情況對(duì)比

中藥藥粉用乙醇?xì)怏w殺菌法和乙醇?jí)毫φ羝麥缇ㄉa(chǎn)情況對(duì)比如表2所示。

通過(guò)對(duì)比得出：乙醇?xì)怏w殺菌法不適用于中藥藥粉的滅菌，原因是粉末顆粒細(xì)密、堆積密度大，造成氣體穿透力下降，導(dǎo)致滅菌效果不穩(wěn)定，藥粉微生物限度指標(biāo)不合格。相反，乙醇?jí)毫φ羝麥缇ㄟm用于中藥藥粉的滅菌，生產(chǎn)效率高，生產(chǎn)成本低，節(jié)約能源，省工省時(shí)。

3 對(duì)滅菌操作方法中升溫過(guò)程的重點(diǎn)改進(jìn)

我公司對(duì)原設(shè)備使用說(shuō)明的滅菌操作方法中的升溫過(guò)程做了重點(diǎn)改進(jìn)。

表1 中藥材、中藥飲片用乙醇?xì)怏w殺菌法和壓力蒸汽滅菌法生產(chǎn)情況對(duì)比

表2 中藥藥粉用乙醇?xì)怏w殺菌法和乙醇?jí)毫φ羝麥缇ㄉa(chǎn)情況對(duì)比

3.1 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

滅菌后的藥材符合下述條件，則表明中藥材滅菌工藝驗(yàn)證合格。

（1）滅菌后和滅菌前的含量測(cè)定比較不能超過(guò)0.1%。

（2）需達(dá)到的微生物限度合格標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌數(shù)不得超過(guò)10000 cfu/g、霉菌和酵母菌總數(shù)不得超過(guò)100 cfu/g、不得檢出大腸埃希菌、大腸菌群＜100 cfu/g。

（3）水分≤6%的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

3.2 原設(shè)備使用說(shuō)明中的滅菌操作法

原設(shè)備使用說(shuō)明中的滅菌操作法的升溫過(guò)程：蒸汽進(jìn)入柜內(nèi)后，溫度及壓力指針開始上升，同時(shí)打開排氣閥，將冷空氣和凝結(jié)水排放2～3min后關(guān)閉截止閥，由疏水器工作；待滅菌柜內(nèi)壓力和溫度達(dá)到滅菌要求時(shí)，旋動(dòng)壓力調(diào)節(jié)閥，使其保持恒定至規(guī)定的滅菌時(shí)間。

連續(xù)運(yùn)行3次實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行9次檢測(cè)。原設(shè)備的使用說(shuō)明的操作法中大黃中藥材071013滅菌檢測(cè)結(jié)果如表3所示。

結(jié)果：檢測(cè)結(jié)果均為不合格。分析造成不合格的原因：（1）柜內(nèi)冷空氣和凝結(jié)水排放2～3 min后關(guān)閉，由疏水器工作，可能柜內(nèi)冷空氣未完全排除或產(chǎn)生新的凝結(jié)水；（2）疏水器滅菌工作時(shí)，柜內(nèi)間歇式排出凝結(jié)水和部分蒸汽，蒸汽不呈流通狀態(tài)，穿透力降低。

3.3 改進(jìn)后的壓力蒸汽滅菌操作法

改進(jìn)后的壓力蒸汽滅菌操作法的升溫過(guò)程：當(dāng)夾層壓力表指針達(dá)到滅菌所需壓力時(shí)，將蒸汽控制閥移至滅菌位置，蒸汽即進(jìn)入柜內(nèi)。當(dāng)柜內(nèi)壓力表達(dá)到滅菌時(shí)所需壓力的一半時(shí)，打開排氣閥門（開啟程度為一周至一周半）。將柜內(nèi)冷空氣和凝結(jié)水在壓力作用下由下部排氣閥快速排出。此時(shí)柜內(nèi)溫度應(yīng)下降5～10℃，下降后的溫度為柜內(nèi)真實(shí)溫度，待滅菌柜內(nèi)溫度和壓力達(dá)到工藝規(guī)定的滅菌要求時(shí)，旋動(dòng)壓力調(diào)節(jié)閥，使其保持恒定至滅菌結(jié)束。滅菌時(shí)間內(nèi)蒸汽呈流通狀態(tài)，徐徐不斷經(jīng)排氣口排出。

3.3.1 改進(jìn)后的壓力蒸汽滅菌法實(shí)驗(yàn)

按《J W—13型熱壓蒸汽滅菌器》改進(jìn)后的壓力蒸汽滅菌法，選取生產(chǎn)用量最大的中藥材大黃進(jìn)行滅菌，依據(jù)壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡進(jìn)行耐熱抗力試驗(yàn)，可以科學(xué)地反映壓力蒸汽滅菌的溫度、溫度持續(xù)時(shí)間、蒸汽的飽和度等多項(xiàng)參數(shù)驗(yàn)證。連續(xù)3次進(jìn)行化學(xué)指示卡實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行9次重現(xiàn)性試驗(yàn)，確認(rèn)滅菌過(guò)程的重現(xiàn)性，以證明改進(jìn)創(chuàng)新后的壓力蒸汽滅菌法安全有效，適用于中藥制劑在生產(chǎn)中的應(yīng)用。

表3 原設(shè)備使用說(shuō)明的操作法中大黃中藥材071013滅菌檢測(cè)結(jié)果

3.3.2 結(jié)果判定

壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡經(jīng)過(guò)一個(gè)滅菌周期后，化學(xué)指示卡的指示色塊由淺黃色變?yōu)闃?biāo)準(zhǔn)色塊的灰黑色或黑色，可判定該次滅菌處理成功?；瘜W(xué)指示卡變色不均勻時(shí)，可判定該次滅菌處理失敗。

3.3.3 壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡試驗(yàn)

將該藥材置于滅菌車內(nèi)的烘盤中，攤料厚度為≤5cm，以利于蒸汽的均勻穿透，達(dá)到均衡滅菌的目的。打開蒸汽閥門，當(dāng)溫度達(dá)到115℃時(shí)開始計(jì)時(shí)，滅菌時(shí)間30min，干燥20 min，干燥溫度60～80℃。滅菌操作結(jié)束后，改進(jìn)創(chuàng)新后的操作法的大黃中藥材071013滅菌壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡試驗(yàn)結(jié)果如表4所示。從滅菌車上層（卡位標(biāo)號(hào)1、2）、中層（卡位標(biāo)號(hào)3、4）、下層（卡位標(biāo)號(hào)5、6）不同部位的料盤中和排氣孔冷點(diǎn)處層（卡位標(biāo)號(hào)7），取出壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡。連續(xù)運(yùn)行3次實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行9次檢測(cè)。觀察其變化，為驗(yàn)證滅菌操作方法提供依據(jù)。

3.3.4 大黃的滅菌效果和滅菌有效成分對(duì)比

選取中藥品種用量最大的中藥材大黃進(jìn)行滅菌效果和滅菌有效成分對(duì)比，連續(xù)運(yùn)行3次實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行9次檢測(cè)。大黃中藥材071013滅菌檢測(cè)結(jié)果、滅菌鑒別檢測(cè)結(jié)果分別如表5、表6所示。

結(jié)果：按改進(jìn)后的壓力蒸汽滅菌法，經(jīng)過(guò)對(duì)凈制后的大黃中藥材進(jìn)行滅菌對(duì)比，中藥材滅菌后的有效成分、微生物限度檢測(cè)結(jié)果和薄層鑒別符合企業(yè)內(nèi)控和中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)要求。

3.3.5 黃連的滅菌效果和滅菌有效成分對(duì)比

選取代表性中藥材黃連進(jìn)行滅菌效果和滅菌有效成分對(duì)比，連續(xù)運(yùn)行3次實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行9次檢測(cè)，黃連中藥材070908滅菌檢測(cè)結(jié)果、滅菌鑒別檢測(cè)結(jié)果分別如表7、表8所示。

結(jié)果：按改進(jìn)后的壓力蒸汽滅菌法，經(jīng)過(guò)對(duì)凈制后的黃連中藥材進(jìn)行滅菌對(duì)比，中藥材滅菌后的有效成分、微生物限度檢測(cè)結(jié)果和薄層鑒別符合企業(yè)內(nèi)控和中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)要求。

3.3.6 石膏的滅菌效果和滅菌有效成分對(duì)比

選取代表性中藥材石膏進(jìn)行滅菌效果和滅菌有效成分對(duì)比如表9所示。連續(xù)運(yùn)行3次實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行9次檢測(cè)。

結(jié)果：按改進(jìn)后的壓力蒸汽滅菌法，經(jīng)過(guò)對(duì)凈制后的石膏進(jìn)行滅菌對(duì)比，其中藥材滅菌檢測(cè)結(jié)果符合企業(yè)內(nèi)控和中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)要求。

表4 改進(jìn)創(chuàng)新后的操作法的大黃中藥材071013滅菌壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果：經(jīng)過(guò)壓力蒸汽滅菌法，化學(xué)指示卡連續(xù)運(yùn)行3次實(shí)驗(yàn)，9次重現(xiàn)性試驗(yàn)，指示卡顏色均深于標(biāo)準(zhǔn)色塊的顏色。證明改進(jìn)創(chuàng)新完善后的操作法能達(dá)到滅菌目的。

3.3.7 中藥飲片的滅菌效果對(duì)比

在選取中藥飲片進(jìn)行滅菌效果的對(duì)比中，茯苓中藥飲片080704滅菌檢測(cè)結(jié)果如表10所示。

表7 黃連中藥材070908滅菌檢測(cè)結(jié)果

表5 大黃中藥材071013滅菌檢測(cè)結(jié)果

表6 大黃中藥材071013滅菌鑒別檢測(cè)結(jié)果

續(xù)表

表8 黃連批號(hào)中藥材070908滅菌鑒別檢測(cè)結(jié)果

表9 中藥材石膏070910進(jìn)行滅菌效果和滅菌有效成分對(duì)比

表10 茯苓中藥飲片080704滅菌檢測(cè)結(jié)果

結(jié)果：按改進(jìn)后的壓力蒸汽滅菌法，經(jīng)過(guò)對(duì)茯苓中藥飲片進(jìn)行滅菌對(duì)比，滅菌微生物限度檢測(cè)結(jié)果符合企業(yè)內(nèi)控和中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)要求。

3.4 中藥藥粉乙醇?jí)毫φ羝麥缇?/h3>

針對(duì)質(zhì)地堅(jiān)硬的中藥材，壓力蒸汽不易穿透，乙醇不易滲入，如三七需粉碎成60～80目藥粉，同時(shí)中藥藥粉表面積要遠(yuǎn)大于凈制后的中藥材、中藥飲片，故中藥藥粉滅菌時(shí)，壓力蒸汽仍然不易穿透；借鑒乙醇?xì)怏w殺菌法，利用乙醇消毒殺菌機(jī)理，采用75%乙醇潤(rùn)濕滲入中藥藥粉，放入滅菌盤，為使藥粉內(nèi)部充分吸收乙醇，需晾置潤(rùn)透4 h后，再按壓力蒸汽滅菌法操作，滅菌后再烘干、粉碎。

中藥藥粉的滅菌效果和有效成分對(duì)比：

在選取中藥藥粉進(jìn)行滅菌效果和有效成分對(duì)比中，三七粉批號(hào)080102乙醇?jí)毫φ羝麥缇z測(cè)結(jié)果、鑒別檢測(cè)結(jié)果分別如表11、表12所示。

結(jié)果：按乙醇?jí)毫φ羝麥缇ń?jīng)過(guò)對(duì)三七中藥藥粉進(jìn)行滅菌對(duì)比，滅菌后的有效成分、微生物限度檢測(cè)結(jié)果和薄層鑒別符合企業(yè)內(nèi)控和中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)要求。

表11 三七粉批號(hào)080102乙醇?jí)毫φ羝麥缇z測(cè)結(jié)果

4 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，從對(duì)比結(jié)果可以看出，凡耐熱的根莖類中藥材中藥飲片滅菌，均可采用壓力蒸汽滅菌法；凡質(zhì)地堅(jiān)硬的中藥材滅菌，均可采用乙醇?jí)毫φ羝麥缇?。改進(jìn)創(chuàng)新完善后的操作方法，適用于中藥制劑生產(chǎn)中的滅菌操作。其滅菌效果符合中國(guó)藥典和生產(chǎn)工藝內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)的要求，能夠有效用于指導(dǎo)生產(chǎn)，滅菌操作方法安全有效，具有較高的實(shí)用價(jià)值和推廣價(jià)值。

對(duì)于含揮發(fā)油類、芳香類中藥材，一般在生產(chǎn)工藝中作提取、收取揮發(fā)油、芳香水加入制劑。但在生產(chǎn)工藝中，如將藥粉加入制劑中時(shí)應(yīng)進(jìn)行滅菌處理，壓力蒸汽滅菌法是否適用還有待討論研究；對(duì)葉類、花類中藥材，一般在生產(chǎn)工藝中作提取，收取浸膏加入制劑。如在生產(chǎn)工藝中，將藥粉加入制劑中時(shí)應(yīng)進(jìn)行粉碎處理，乙醇?jí)毫φ羝麥缇ㄊ欠襁m用還有待討論研究。

表12 三七粉批號(hào)080102乙醇?jí)毫φ羝麥缇b別檢測(cè)結(jié)果

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