蔡巍巍 王亞宏 陳興澎

冠狀動脈旁路術(shù)后，約30%~50%靜脈橋在5~10年后出現(xiàn)通暢率下降[1]。有研究顯示，這與血流流速和切變力等血流動力學(xué)變化有關(guān)[2-3]。本實(shí)驗(yàn)通過對異種脫細(xì)胞血管移植物在不同血液流速中移植后管腔內(nèi)經(jīng)與血流動力學(xué)的研究，探討肝素包被對異種脫細(xì)胞血管移植物移植術(shù)后的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動物 新西蘭大白兔18只，體重2.4~3.0 kg，平均2.74 kg；成年犬8只，體重14.5~17.9 kg，平均15.5 kg，雌雄不拒（均由上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物試驗(yàn)中心提供）。

沒有野魚有野味。野鴨野雞野豬肉，飛鼠果貍梅花鹿。一桌菜上得色香味應(yīng)有盡有，極盡豪華。好菜豈能不配好酒？酒是本地馳名的極品一號，開瓶透香，被服伺小姐滿滿地酌了兩杯。

1.1.2 主要試劑及儀器 胰蛋白酶、0.02% EDTA-Na、RNAase A、DNAase I、Triton X-100（均為Sigma公司產(chǎn)品，美國），羥胺硫酸鹽、1-乙基-3-（3-二甲氨基丙基）硫二亞胺鹽酸鹽（EDC）（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，上海），100 kIU/ml抑肽酶（麗珠集團(tuán)麗寶生物化學(xué)制藥有限公司，深圳），顯微外科器械、HP Sonos 4500型超聲成像系統(tǒng)（美國惠普公司）。

2.1 術(shù)后18只兔子存活16只，A、B兩組各死亡1只，均發(fā)生在術(shù)后第1天，死亡原因?yàn)槭中g(shù)技術(shù)原因所致雙側(cè)移植物血管閉塞。動物死亡后隨機(jī)補(bǔ)充，補(bǔ)足至18只進(jìn)入結(jié)果分析。

總而言之，玉米的高效種植時(shí)需要特別注意在種植過程中細(xì)節(jié)的處理，同時(shí)要多采用科學(xué)的管理方式，因地制宜，使資源能夠得到最大化的利用，最終掌握最為高效的玉米種植技術(shù)，促農(nóng)業(yè)的豐產(chǎn)，農(nóng)民的豐收。

1.2.2 分組 新西蘭大白兔18只（由上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物試驗(yàn)中心提供）隨機(jī)分為兩組：A組（未肝素包被）（n=9）移植未經(jīng)肝素包被處理的脫細(xì)胞血管，B組（肝素包被）（n=9）移植經(jīng)肝素包被處理的脫細(xì)胞血管。

縱觀目前世界上已工業(yè)化或者大體工業(yè)化的國家的發(fā)展道路，不難看出，大多數(shù)資本主義國家，其社會生活水平的不斷提高都是建立在對生態(tài)環(huán)境造成污染的基礎(chǔ)上的。當(dāng)前我國提出的旨在協(xié)調(diào)社會發(fā)展與生態(tài)環(huán)境關(guān)系的綠色發(fā)展不同于其他傳統(tǒng)工業(yè)化國家的發(fā)展模式。人類社會的發(fā)展作為亙古不變的主題，無論在任何時(shí)代都離不開對人與自然關(guān)系的處理。隨著人類社會的發(fā)展，人類逐步意識到環(huán)境保護(hù)的重要性，也逐步在改變經(jīng)濟(jì)增長方式。不同于傳統(tǒng)的重視數(shù)量增加的粗放式發(fā)展，習(xí)近平綠色發(fā)展理論強(qiáng)調(diào)質(zhì)量效益和環(huán)境保護(hù)的綠色發(fā)展，既蘊(yùn)含知行合一的實(shí)踐特質(zhì)，又注重理論創(chuàng)新，并堅(jiān)持人民主體的地位，與傳統(tǒng)發(fā)展模式相比，立意更高。

1.2.4 超聲觀察 術(shù)后分別于1周，3周和12周，用HP Sonos 4500型超聲成像系統(tǒng)（探頭頻率10 MHz）檢測移植血管通暢情況，觀察血管移植物的彩色血流狀況并測量血管內(nèi)徑；計(jì)算血流動力學(xué)參數(shù)，包括血流峰值速度（PSV）、阻力指數(shù)（RI）、搏動指數(shù)（PI）等。

1.2.3 模型建立 將兔麻醉后固定（氯胺酮10 mg/kg），頸前正中切口，顯露雙側(cè)頸動脈。用8-0 prolene線將移植血管（長約4 cm）兩端與頸動脈分別作端側(cè)吻合，吻合后結(jié)扎左側(cè)（結(jié)扎側(cè)）兩吻合口間的頸動脈，右側(cè)（未結(jié)扎側(cè)）不結(jié)扎，構(gòu)建不同血流的動物模型，手術(shù)結(jié)束后均給予青霉素80萬U肌注，1次/d，共3 d。術(shù)后禁用抗凝藥物。

2.3 移植物血流動力學(xué)參數(shù)的變化 （1）無論未結(jié)扎側(cè)或結(jié)扎側(cè)，兩組的血流峰值速度（PSV）比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），盡管如此，未結(jié)扎側(cè)的PSV仍明顯偏低于結(jié)扎側(cè)的PSV；（2）A組中的PSV隨時(shí)間延長呈上升趨勢，而B組中變化不明顯；（3）術(shù)后第3周時(shí)，兩組阻力指數(shù)（RI）比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；（4）兩組搏動指數(shù)（PI）比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），但未結(jié)扎側(cè)的PI仍明顯偏高于結(jié)扎側(cè)。見表2。

2 結(jié)果

1.2 方法

1.2.1 移植物血管的處理 采用經(jīng)本研究室研究證實(shí)的脫細(xì)胞方法對收集的犬頸動脈進(jìn)行脫細(xì)胞處理[4]。脫細(xì)胞后對部分犬頸動脈進(jìn)一步采用Conklin等[5]報(bào)道的方法行肝素包被處理。

冠狀動脈旁路移植術(shù)后，靜脈橋再狹窄率較高，是影響手術(shù)療效的重要原因，其主要病理變化就是吻合口的內(nèi)膜增生。研究發(fā)現(xiàn)，血流流速和切變力等血流動力學(xué)變化是造成內(nèi)膜增生的關(guān)鍵原因之一，高、低切變力均可促進(jìn)內(nèi)膜增生形成[6-8]。當(dāng)靜脈移植物由低壓、低流速的靜脈系統(tǒng)移植到高壓、高流速的動脈系統(tǒng)時(shí)，由于動脈系統(tǒng)的高壓、高流速會對靜脈移植物的內(nèi)皮細(xì)胞造成損傷，從而引起內(nèi)膜增生的發(fā)生；而低流速產(chǎn)生的低剪切力使得血小板與內(nèi)皮下膠原接觸時(shí)間增加也是造成內(nèi)膜增生的主要原因。本實(shí)驗(yàn)將脫細(xì)胞異種血管移植物模擬冠狀動脈旁路移植的方法植入兔子的頸內(nèi)動脈，然后通過結(jié)扎與不結(jié)扎頸內(nèi)動脈，從而使得不同流速的血液流經(jīng)移植物血管，對其產(chǎn)生不同的剪切力，有效消除了由于內(nèi)皮細(xì)胞損傷所造成的影響，同時(shí)為肝素包被對內(nèi)膜增生影響的研究，提供了一個良好的動物模型。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，均數(shù)間經(jīng)方差齊性檢驗(yàn)后，計(jì)量資料以（±s）表示，以單因素方差分析統(tǒng)計(jì)結(jié)果，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 兩組移植物移植后管腔內(nèi)徑的比較（±s） mm

*P<0.01，△P<0.05，與結(jié)扎側(cè)的比較

A 組（n=9） 1.95±0.10 1.90±0.08 1.87±0.08 1.88±0.07* 1.84±0.06* 1.82±0.07△B 組（n=9） 1.96±0.07 1.95±0.06 1.94±0.06 1.94±0.07 1.92±0.06 1.92±0.06

表2 兩組未結(jié)扎側(cè)與結(jié)扎側(cè)移植物血流動力學(xué)參數(shù)的變化（±s）

*與A組比較，P<0.05

A組（n=9） 1周 87.08±12.09 0.69±0.09 1.21±0.12 93.73±10.23 0.61±0.08 1.12±0.23 3 周 91.92±10.43 0.78±0.18 1.31±0.08 96.25±7.91 0.73±0.06 1.18±1.30 12 周 94.87±11.14 0.69±0.10 1.27±0.09 97.87±10.84 0.66±0.11 1.20±0.15 B組（n=9） 1周 91.07±10.97 0.66±0.05 1.23±0.09 95.45±12.4 0.64±0.05 1.18±0.07 3周 95.75±11.64 0.62±0.09* 1.26±0.12 92.22±9.34 0.61±0.10* 1.19±0.10 12 周 89.82±7.30 0.62±0.06 1.24±0.08 96.37±7.19 0.62±0.06 1.19±0.06

3 討論

2.2 移植物管腔內(nèi)徑的比較 A組移植物移植前管腔內(nèi)徑（1.94±0.1）mm，B組為（1.96±0.09）mm，兩組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。移植后A組的移植物血管內(nèi)徑無論在結(jié)扎側(cè)或未結(jié)扎側(cè)均較術(shù)前明顯縮?。≒<0.05），且未結(jié)扎側(cè)的管腔內(nèi)徑較結(jié)扎側(cè)明顯縮?。≒<0.01）；B組中僅有未結(jié)扎側(cè)第3、12周的內(nèi)徑較術(shù)前比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），兩側(cè)的內(nèi)徑比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表 1。

肝素具有抗凝作用，正常的內(nèi)皮細(xì)胞可以通過合成肝素來抑制平滑肌細(xì)胞增殖、減少其遷移，從而達(dá)到防止內(nèi)膜增生的效果。脫細(xì)胞異種血管移植物由于喪失了內(nèi)皮細(xì)胞的這種作用，移植后極易發(fā)生狹窄，研究證實(shí)，血管移植1周后，平滑肌細(xì)胞開始由中膜向內(nèi)膜轉(zhuǎn)移，可持續(xù)3周左右。筆者采用肝素包被的方法有效預(yù)防了這種情況的發(fā)生。發(fā)現(xiàn)均較未包被肝素組的脫細(xì)胞異種血管移植物的改變要輕，尤其是在移植后第3周時(shí)，兩組間阻力指數(shù)出現(xiàn)了明顯的差異（P<0.05），而這一時(shí)間點(diǎn)恰與平滑肌細(xì)胞遷移造成內(nèi)膜增生的時(shí)間一致。

PSV反映的是血流的速度，所受的影響因素較多，如血管順應(yīng)性、吻合口的大小、血栓形成等，單純依照PSV尚不足以判定血管的狹窄程度，而PI值是反映橋血管通暢率的一個較好指標(biāo)，通暢的橋PI值應(yīng)較小，而較高的PI值則提示存在吻合口狹窄的可能，兩者結(jié)合可以較好地反映血管的狹窄程度。實(shí)驗(yàn)中，未結(jié)扎側(cè)的PSV均明顯偏低于結(jié)扎側(cè)的PSV，而未結(jié)扎側(cè)的PI仍偏高于結(jié)扎側(cè)的PI，這說明隨著時(shí)間的延長，這種由于偏低的血流速度，而使得脫細(xì)胞血管移植物在移植后更易發(fā)生內(nèi)膜增生，從而造成管腔狹窄，而肝素包被的脫細(xì)胞異種血管在應(yīng)對不同血流沖擊時(shí)的表現(xiàn)，亦明顯優(yōu)于未包被肝素組。

隨著電子商務(wù)的蓬勃發(fā)展，交易雙方在網(wǎng)絡(luò)上進(jìn)行交易，貨款的交付以各自的商業(yè)信用為基礎(chǔ)，交易雙方都沒有保障，因而傳統(tǒng)的支付方式不能適應(yīng)電子商務(wù)的需求。為相應(yīng)線上交易的市場需求，馬云先生創(chuàng)立了以支付寶為代表的第三方移動支付。商戶與國內(nèi)外資金雄厚、實(shí)力強(qiáng)勁、信譽(yù)良好的第三方獨(dú)立機(jī)構(gòu)如銀行等簽訂契約，獲得第三方機(jī)構(gòu)的支持。在交易過程中，第三方機(jī)構(gòu)提供支付結(jié)算平臺，消費(fèi)者使用第三方機(jī)構(gòu)提供的賬戶信息進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)交易。第三方代收消費(fèi)者貨款，并通知商家貨款接收、開始發(fā)貨；消費(fèi)者收到貨款并確認(rèn)收貨后，第三方將貨款轉(zhuǎn)到商家賬戶。

媽媽說這些的時(shí)候，眉飛色舞，繪聲繪色，我一直認(rèn)為，她有做民間說書人的潛質(zhì)。作為聽眾的我，特別為8個兄弟姐妹怎么搶食著急。想當(dāng)年，我和弟弟沒少為搶好吃的打架。聽到我的問題，媽媽白了我一眼：“哪會搶啊，一個個都可懂事呢，只吃自己的那一份，還想著要讓給大人吃，大人要干活啊?！?/p>

目前，在血管狹窄性疾病診斷方面，雖然數(shù)字減影血管造影仍是目前公認(rèn)的金標(biāo)準(zhǔn)，但其明顯的缺點(diǎn)也早已成為共識，除其侵襲性外，數(shù)字減影血管造影通常低估管腔狹窄程度，尤其是小動物模型進(jìn)行數(shù)字減影血管造影檢查，技術(shù)上比較困難，容易直接或間接導(dǎo)致動物死亡而影響實(shí)驗(yàn)。而隨著高分辨率超聲的出現(xiàn)，使人們不僅可以直接顯示血管病變解剖結(jié)構(gòu)上的改變，同時(shí)能提供血流動力學(xué)信息，能夠確定周圍動脈狹窄的程度和范圍。

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