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        熒光定量PCR 診斷66例腎結(jié)核的臨床價(jià)值探討

        2013-01-24 21:23:26袁美琴
        中國(guó)民族民間醫(yī)藥 2013年21期
        關(guān)鍵詞:腎結(jié)核結(jié)核定量

        袁美琴

        江西省鷹潭市人民醫(yī)院,江西 鷹潭 335000

        熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)是一種新定量試驗(yàn)技術(shù),能夠通過熒光標(biāo)記或者熒光染料特異性的探針,標(biāo)記跟蹤PCR產(chǎn)物,能夠?qū)Ψ磻?yīng)過程進(jìn)行實(shí)時(shí)在線監(jiān)控,結(jié)合相應(yīng)軟件對(duì)產(chǎn)物給予分析,對(duì)待測(cè)樣品的濃度進(jìn)行計(jì)算。熒光定量PCR準(zhǔn)確、快速,能夠?yàn)樵\斷病原微生物提供良好的實(shí)驗(yàn)技術(shù),提高了尿中結(jié)核分枝桿菌的陽性檢測(cè)率,被廣泛應(yīng)用于臨床診斷中[1]。選取66例疑為腎結(jié)核患者和10例正常人群使用熒光定量PCR診斷的效果進(jìn)行對(duì)比觀察,報(bào)道如下。

        1 資料和方法

        1.1 一般資料 選取我院2010年1月至2012年10月收治的66例疑為腎結(jié)核患者使用熒光定量PCR診斷作為觀察組,其中男性42例,女性24例,年齡17~70歲,病程20天-12年。從患者的臨床癥狀分析,膀胱刺激癥患者占40例,肉眼血尿患者占18例,腰痛癥狀患者占19例,鏡下血尿患者占21例,伴發(fā)熱等全身癥狀的患者占4例,伴尿痛、尿頻以及血尿癥狀的患者占20例;把同時(shí)期10例健康體檢者作為對(duì)照組,男性7例,女性3例,年齡18~72歲。兩組診斷者均給予熒光定量PCR診斷,在年齡、性別等基本資料上差異性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

        1.2 方法 先取1ml樣品,以每分鐘10000r的速度進(jìn)行離心10分鐘,棄上清之后沉淀,加用1ml無菌生理鹽水打勻,以每分鐘10000r的速度進(jìn)行離心10分鐘,棄上清之后沉淀,加用IDNA提取液50μl充分混勻,使用金屬浴10分鐘,取2μl上清液做PCR反應(yīng)。另外取陽性和陰性質(zhì)控品40μl進(jìn)行測(cè)定,處理方法同上。

        1.3 判定標(biāo)準(zhǔn) 對(duì)兩組診斷方法的結(jié)構(gòu)進(jìn)行判定,Ct值為30則表明實(shí)驗(yàn)的結(jié)果呈陰性;Ct值在30以下則表明檢測(cè)結(jié)果為陽性。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用軟件SPSS18.0對(duì)觀察的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,使用χ2對(duì)計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)進(jìn)行檢驗(yàn),P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        66例疑為腎結(jié)核患者中,尿培養(yǎng)為陽性的患者占34例,陽性率為51.5%;檢測(cè)出來結(jié)合分枝桿菌患者占42例,陽性率為63.6%;肺結(jié)核性泌尿系統(tǒng)感染患者占14例,其樣品均是陰性。對(duì)照組10例健康者均為陰性,觀察組患者在尿中結(jié)核分枝桿菌的檢出率明顯比對(duì)照組高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

        3 討論

        腎結(jié)核在泌尿生殖系統(tǒng)中有非常重要的地位,泌尿生殖系的其他器官結(jié)核多繼發(fā)在腎結(jié)核,因此對(duì)腎結(jié)核患者給予早期診斷,能夠?yàn)榕R床治療提供較為準(zhǔn)確的信息,提高臨床療效。腎結(jié)核的臨床診斷方法較多,X線檢查以及根據(jù)患者的臨床表現(xiàn)對(duì)腎結(jié)核患者進(jìn)行診斷,極易造成漏診和誤診;尿沉渣的抗酸桿菌呈現(xiàn)的陽性率較低,不能夠?qū)Y(jié)合桿菌以及其他抗酸桿菌進(jìn)行有效鑒別;結(jié)核菌素試驗(yàn)被廣泛應(yīng)用于臨床診斷中,但是非結(jié)核分枝桿菌也會(huì)由于致敏作用導(dǎo)致假陽性。熒光定量PCR技術(shù)作為一種新型的檢測(cè)技術(shù)[2],其優(yōu)點(diǎn)主要包括核酸高效擴(kuò)增、高特異性的探針技術(shù)、高敏感性的光譜技術(shù)以及高精確定量,能夠?qū)CR過程中的熒光信號(hào)變化進(jìn)行直接探測(cè),從而獲得定量結(jié)果。

        熒光定量PCR準(zhǔn)確、快速,能夠?yàn)樵\斷病原微生物提供良好的實(shí)驗(yàn)技術(shù),提高了尿中結(jié)核分枝桿菌的陽性檢測(cè)率,被廣泛應(yīng)用于臨床診斷中。熒光定量PCR能夠?qū)菇Y(jié)核治療過程中結(jié)核菌量變化進(jìn)行有效反映,但是在采集標(biāo)本的過程中也要注意避免標(biāo)本間的相互污染,掌握好標(biāo)本處理前的實(shí)驗(yàn)條件[3]。上述結(jié)果顯示:66例疑為腎結(jié)核患者中,尿培養(yǎng)為陽性的患者占34例,陽性率為51.5%;檢測(cè)出來結(jié)核分枝桿菌患者占42例,陽性率為63.6%;肺結(jié)核性泌尿系統(tǒng)感染患者占14例,其樣品均是陰性。對(duì)照組10例健康者均為陰性,觀察組患者在尿中結(jié)核分枝桿菌的檢出率明顯比對(duì)照組高(P<0.05)。熒光定量PCR應(yīng)用于診斷腎結(jié)核效果顯著,能夠提高尿中結(jié)核分枝桿菌的陽性檢測(cè)率,值得臨床推廣應(yīng)用。

        [1]李靜,王曉平,肖慧霞,等.熒光定量PCR診斷腎結(jié)核的臨床應(yīng)用價(jià)值[J].寧夏醫(yī)學(xué)雜志,2011,33(10):1019-1020.

        [2]李文濤,王俊東,楊利峰等.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)及其應(yīng)用[J].生物技術(shù)通訊,2009,17(1):112-114.

        [3]郭楊,陳世界,郭萬柱等.熒光定量PCR技術(shù)及其應(yīng)用研究進(jìn)展[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2009,30(2):78-82.

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