王向榮，張 旭，蔣桂韜，戴求仲＊

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 動物科技學(xué)院，湖南 長沙410128；2.湖南省畜牧獸醫(yī)研究所 動物營養(yǎng)與飼養(yǎng)技術(shù)研究室，湖南 長沙410131）

益生菌是一種通過改善腸道菌群平衡，從而對畜禽產(chǎn)生有益影響的活性微生物添加劑［1］，目前已在畜禽飼糧中廣泛使用。凝結(jié)芽孢桿菌又名芽孢型乳酸菌，是一種既能生成有機(jī)酸，又能形成孢子的益生菌，因其具有穩(wěn)定性好、抗逆性強(qiáng)、復(fù)活率高、代謝旺盛等特點［2-3］，受到國內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注。有關(guān)乳酸菌、芽孢桿菌、鏈球菌、雙歧桿菌、酵母菌等益生菌對雞、豬等畜禽等影響研究有很多，大多數(shù)結(jié)果表明益生菌具有調(diào)節(jié)腸道健康、促進(jìn)畜禽生長、改善養(yǎng)殖環(huán)境等作用［4-8］。但飼糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌對畜禽影響的相關(guān)研究并不多見，尤其是對蛋鴨的影響研究更是鮮有報道。因此，本研究通過在產(chǎn)蛋鴨飼糧中添加不同水平的凝結(jié)芽孢桿菌，探討其對蛋鴨產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)及血清生化指標(biāo)的影響，旨在為凝結(jié)芽孢桿菌在蛋鴨飼糧中的合理利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

凝結(jié)芽孢桿菌制劑（8.0×109CFU／g）由湖南普菲克生物科技有限公司提供。

1.2 試驗設(shè)計與飼糧

試驗選取200日齡，健康狀況良好，體重基本一致，產(chǎn)蛋率約為80%的臨武鴨240只，隨機(jī)分成4組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)10只鴨，預(yù)試期7 d，并以預(yù)試期產(chǎn)蛋率為依據(jù)調(diào)整至組間無差異，正試期28 d。對照組飼喂不添加凝結(jié)芽孢桿菌的基礎(chǔ)飼糧（參照美國 NRC（1994）營養(yǎng)需要［9］，并根據(jù)課題組在臨武鴨營養(yǎng)長期研究的基礎(chǔ)上，選用玉米、小麥、豆粕等為原料，經(jīng)80℃～85℃制粒加工成顆粒飼料），基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗組飼糧在基礎(chǔ)飼糧中分別添加100 mg／kg、150 mg／kg和200 mg／kg凝結(jié)芽孢桿菌。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets（air-dry basis）

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗在湖南省畜牧獸醫(yī)研究所試驗鴨場進(jìn)行，專人管理與記錄。試驗鴨采用35 cm×40 cm×38 cm的2層金屬籠飼養(yǎng)，每籠2只。鴨舍自然通風(fēng)，采用乳頭式飲水，試驗鴨自由飲水與采食（計量不限量），按常規(guī)免疫。預(yù)試期作為喂料過渡，試驗飼糧按照由小到大的比例與原用飼糧混合后飼喂試驗鴨，正式試驗開始時，全部過渡到試驗飼糧。

1.4 測定指標(biāo)與方法

1.4.1 生產(chǎn)性能 試驗期間每天按重復(fù)記錄產(chǎn)蛋總數(shù)、總蛋重、采食量、不合格蛋數(shù)（包括軟殼蛋、破殼蛋、畸形蛋、沙殼蛋）和死淘數(shù)，以組為單位統(tǒng)計平均蛋重、日產(chǎn)蛋量、產(chǎn)蛋率、合格蛋率、死淘率、平均日采食量和料蛋比。

1.4.2 蛋品質(zhì) 試驗結(jié)束時每組抽取接近平均蛋重的鴨蛋18枚（每重復(fù)3枚），4℃保存，在24 h之內(nèi)測定蛋黃比率、蛋白比率、蛋殼厚度（蛋殼厚度測定儀）、蛋形指數(shù)（游標(biāo)卡尺測量）、蛋黃顏色（蛋黃比色卡）及蛋白高度（蛋白高度測定儀），并計算哈氏單位（HU），計算公式為：

式中：其中H為蛋白高度（mm）；W為蛋重（g）。

1.4.3 血清生化指標(biāo) 在試驗結(jié)束時，每個重復(fù)隨機(jī)選取體重相近的試驗鴨1只，空腹12 h后，翅下脈采血5 m L，靜置30 min后，3 000 r／min離心15 min，分離血清，檢測血清中血糖（GLU）、總蛋白（TP）、總膽固醇 （TC）、甘油三脂 （TG）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、白／球蛋白比值。試劑的配制和試驗操作步驟均按南京建成生物工程研究所試劑盒的說明書進(jìn)行。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

用Excel統(tǒng)計軟件初步對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理后，用SPSS 13.0進(jìn)行單因子方差分析（one-way ANOVA，LSD）和Duncan氏多重比較，結(jié)果用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.05為差異顯著，P＜0.01為極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加凝結(jié)芽孢桿菌對產(chǎn)蛋鴨產(chǎn)蛋性能的影響

表2數(shù)據(jù)顯示，在飼糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌飼喂28 d后，對臨武鴨合格蛋率、平均蛋重、合格蛋平均重和死淘率均無顯著影響（P＞0.05），飼糧中添加150和200 mg／kg凝結(jié)芽孢桿菌的試驗組臨武鴨產(chǎn)蛋率分別比對照組要高6.71%和7.92%，但差異未達(dá)顯著水平（P＞0.05）；試驗組日產(chǎn)蛋量和日產(chǎn)合格蛋量均高于對照組，表現(xiàn)出隨著凝結(jié)芽孢桿菌添加量的升高而升高的趨勢，但差異不顯著（P＞0.05）。對照組平均日采食量最高，達(dá)200.13 g／d，分別比添加100和150 mg／kg凝結(jié)芽孢桿菌的試驗組高了5.21%、4.19%，差異顯著（P＜0.05），與添加200 mg／kg凝結(jié)芽孢桿菌的試驗組差異不顯著（P＞0.05）。料蛋比隨著凝結(jié)芽孢桿菌添加量的升高而降低，尤其是添加150 mg／kg和200 mg／kg的試驗組，分別比對照組低了12.22%和12.78%，但各組間差異并未達(dá)顯著水平（P＞0.05）。

表2 飼糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌對蛋鴨產(chǎn)蛋性能的影響Table 2 Effects of dietary Bacillus coagulans supplementation on laying performance of laying ducks

2.2 飼糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌對鴨蛋品質(zhì)的影響

由表3可知，凝結(jié)芽孢桿菌對鴨蛋蛋形指數(shù)、蛋黃比率和蛋白比率均無顯著影響（P＞0.05）；飼糧添加100 mg／kg、150 mg／kg和200 mg／kg凝結(jié)芽孢桿菌可顯著降低鴨蛋蛋殼厚度（P＜0.05），其中添加150 mg／kg和200 mg／kg凝結(jié)芽孢桿菌試驗組的鴨蛋蛋殼厚度極顯著低于對照組（P＜0.01）；飼糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌可極顯著提高鴨蛋蛋黃顏色指數(shù)（P＜0.01），且隨著添加量的增加而增加，添加200 mg／kg凝結(jié)芽孢桿菌的試驗組鴨蛋蛋黃顏色指數(shù)顯著高于添加100 mg／kg的試驗組（P＜0.05）；凝結(jié)芽孢桿菌能提高鴨蛋蛋白高度和哈氏單位，且均以添加150 mg／kg凝結(jié)芽孢桿菌的試驗組為最高，分別達(dá)7.89 mm和85.43 mm，比對照組分別高了11.28%和5.78%，差異均顯著（P＜0.05）。

表3 飼糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌對鴨蛋品質(zhì)的影響Table 3 Effects of dietary Bacillus coagulans supplementation on duck egg quality

2.3 添加凝結(jié)芽孢桿菌對血清生化指標(biāo)的影響

由表4可知，飼糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌對產(chǎn)蛋鴨血清中血糖、總蛋白、總膽固醇、甘油三酯、白蛋白、球蛋白和白／球蛋白比值均無顯著影響。血清中總蛋白含量表現(xiàn)出凝結(jié)芽孢桿菌添加量升高而降低的趨勢，但差異不顯著（P＞0.05）；添加凝結(jié)芽孢桿菌的試驗組產(chǎn)蛋鴨血清總膽固醇、甘油三酯和球蛋白含量均低于對照組，差異亦不顯著（P＞0.05）。

表4 飼糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌對產(chǎn)蛋鴨血清生化指標(biāo)的影響Table 4 Effects of dietary Bacillus coagulans on serum biochemical indices of laying ducks

3 討 論

3.1 凝結(jié)芽孢桿菌對蛋鴨產(chǎn)蛋性能的影響

凝結(jié)芽孢桿菌作為一種益生菌，能提高畜禽生產(chǎn)性能，并具有較好的替代抗生素的作用［10］。Zhou等［11］研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加2.0×109CFU／kg凝結(jié)芽孢桿菌可顯著提高廣西黃雞的生產(chǎn)性能和肉品質(zhì)。Cavazzoni等［12］也認(rèn)為，凝結(jié)芽孢桿菌具有促進(jìn)肉雞生長，提高飼料轉(zhuǎn)化率的功效，在促生長和疾病預(yù)防等方面的功效與維吉尼亞霉素相當(dāng)。本研究發(fā)現(xiàn)，凝結(jié)芽孢桿菌雖對蛋鴨產(chǎn)蛋率無顯著影響，但隨著添加量的增加產(chǎn)蛋率也逐漸增加，日產(chǎn)蛋量也表現(xiàn)出了類似的趨勢，飼糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌可顯著降低蛋鴨采食量，但在各添加組之間，隨著添加量的增加，采食量和飼料轉(zhuǎn)化率也隨之升高。這可能是因為乳酸芽孢桿菌能產(chǎn)生多種胞外酶類，如細(xì)胞裂解酶、透明質(zhì)酸酶、果酸果膠裂解酶、蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和半纖維素酶等，有利于提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率［13］，從而提高蛋鴨的產(chǎn)蛋性能。Khaksefidi和Ghoorchi［14］在肉雞上的研究發(fā)現(xiàn)，添加凝結(jié)芽孢桿菌的試驗組采食量均低于不添加的對照組，只是差異未達(dá)顯著水平，同時各試驗組肉雞采食量隨著凝結(jié)芽孢桿菌添加量增加而增加，與本研究結(jié)果類似。這說明在降低采食量方面，凝結(jié)芽孢桿菌并不是添加越多越好，因為凝結(jié)芽孢桿菌在腸道內(nèi)的繁殖要消耗養(yǎng)分，添加得越多消耗的養(yǎng)分可能也就要越多。

3.2 凝結(jié)芽孢桿菌對鴨蛋品質(zhì)的影響

許多研究表明，芽孢桿菌、乳酸桿菌等益生菌的單一或復(fù)合制劑均具有改善雞蛋品質(zhì)的作用。辛娜等［15］研究認(rèn)為，芽孢桿菌制劑具有提高雞蛋蛋殼硬度和蛋黃顏色的趨勢，對雞蛋品質(zhì)具有一定的改善作用。王永芬等［16］也得到了類似結(jié)果，并認(rèn)為乳酸桿菌與枯草芽孢桿菌復(fù)合制劑的效果要優(yōu)于單一菌種。但有關(guān)凝結(jié)芽孢桿菌對禽蛋品質(zhì)影響的研究并不多見，對鴨蛋品質(zhì)影響的研究更是鮮有報道。本研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌能極顯著提高蛋黃顏色指數(shù)，并且隨著添加量的增加而升高，與前人在蛋雞上的研究結(jié)果相類似［17］，是否是因為凝結(jié)芽孢桿菌影響了蛋鴨體內(nèi)的抗氧化機(jī)能，或是影響了飼糧中類胡蘿卜素、葉黃素等的吸收，還有待更深入的研究。

濃蛋白高度和哈氏單位是確定蛋白品質(zhì)的主要指標(biāo)，也是影響蛋新鮮度的重要因素，一般認(rèn)為，哈氏單位越高，表示蛋白粘稠度越好，蛋白品質(zhì)越高［18］。飼糧中添加芽孢桿菌制劑可提高鴨蛋蛋白高度和哈氏單位，尤其在添加150 mg／kg水平時，差異達(dá)顯著水平，這說明凝結(jié)芽孢桿菌能提高鴨蛋蛋白品質(zhì)，利于鴨蛋保鮮。本研究發(fā)現(xiàn)，凝結(jié)芽孢桿菌可降低鴨蛋蛋殼厚度，與前人在蛋雞上的研究結(jié)果相悖［15］，這可能是由于蛋鴨與蛋雞生理上的差異所引起，具體的機(jī)理有待更進(jìn)一步的研究。

3.3 凝結(jié)芽孢桿菌對產(chǎn)蛋鴨血清生化指標(biāo)的影響

韓偉等［19］研究認(rèn)為，乳酸芽孢桿菌可顯著提高斷奶仔豬血清中白蛋白和總蛋白含量，降低血清葡萄糖含量。本研究認(rèn)為，飼糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌對產(chǎn)蛋鴨血糖、總蛋白、總膽固醇、甘油三脂、白蛋白、球蛋白、白／球蛋白比值等血清生化指標(biāo)均無顯著影響，但從數(shù)據(jù)上看，乳酸芽孢桿菌對能降低蛋鴨血清中葡萄糖含量，與韓偉等［19］的研究結(jié)果類似，這可能是乳酸芽孢桿菌對畜禽的碳水化合物代謝產(chǎn)生了影響。本研究還發(fā)現(xiàn)，蛋鴨血清中總蛋白的含量隨著凝結(jié)芽孢桿菌添加量的增加而降低，這與Shareef和 Al-Dabbagh［20］將益生菌（啤酒酵母）應(yīng)用到肉雞飼糧中的研究結(jié)果以及韓偉等［19］的研究結(jié)果相悖，這可能是由于菌種和目標(biāo)動物的不同所導(dǎo)致。另一方面，隨著凝結(jié)芽孢桿菌添加量的增加，平均日產(chǎn)蛋量隨之增加，因此推測凝結(jié)芽孢桿菌有助于血清中蛋白質(zhì)向鴨蛋中沉積，具體機(jī)理還有待更進(jìn)一步的研究。本研究中凝結(jié)芽孢桿菌對蛋鴨血清中甘油三酯和總膽固醇的影響與Shareef和Al-Dabbagh［20］的研究結(jié)果類似，均能降低其含量，這可能是益生菌在畜禽脂類代謝上存在的共性。

4 結(jié) 論

飼糧中添加150和200 mg／kg凝結(jié)芽孢桿菌制劑可一定程度的提高蛋鴨產(chǎn)蛋率、日產(chǎn)蛋量、平均蛋重和飼料轉(zhuǎn)化率，添加100和150 mg／kg可顯著降低蛋鴨采食量。

飼糧中添加100～200 mg／kg凝結(jié)芽孢桿菌制劑會導(dǎo)致蛋殼厚度下降，但并不影響合格蛋率，同時提高了蛋黃顏色、蛋白高度和哈氏單位，對鴨蛋品質(zhì)有一定程度的改善。

綜合考慮，在產(chǎn)蛋鴨飼糧中凝結(jié)芽孢桿菌的添加量以150 mg／kg為宜。

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