陳 穎，藍(lán)海鷹，黃紫艷，葉 云

(麗水市婦幼保健院檢驗(yàn)科，浙江麗水323000)

人乳頭狀瘤病毒(human papillomavirsu，HPV)是一種小的DNA雙鏈病毒。20世紀(jì)70年代Zur Hausen［1］首次證實(shí)HPV感染為宮頸癌發(fā)生的重要原因。隨著研究的深入，現(xiàn)在可以肯定HPV是導(dǎo)致宮頸癌發(fā)生的根本原因。大量臨床研究證實(shí)高危型人乳頭瘤病毒(high risk human papillomavirus，HRHPV)與宮頸癌和宮頸上皮內(nèi)瘤變密切相關(guān)［2］。同時(shí)HR-HPV亞型的分布與地區(qū)、環(huán)境、人群結(jié)構(gòu)相關(guān)［3］。為了解浙江麗水地區(qū)婦女HR-HRV感染率及亞型分布特征，我們對(duì)健康體檢婦女宮頸拭子標(biāo)本的13種HPV高危亞型檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了分析。

材料和方法

一、研究對(duì)象

收集2011年2月至2011年5月在麗水市婦幼保健院進(jìn)行健康體檢的650名婦女的宮頸拭子標(biāo)本，年齡24～86歲。

二、儀器和試劑

HR-HPV分型核酸測(cè)定試劑盒購(gòu)自上海之江生物科技有限公司。儀器為安捷倫 Mx3000P實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測(cè)儀。

三、方法

將標(biāo)本管加入1 mL生理鹽水后渦旋振蕩混勻，吸取液體轉(zhuǎn)移至1.5 mL離心管中，6 000×g離心5 min，沉淀加無(wú)菌生理鹽水1 mL混勻，6 000×g離心5 min，再重復(fù)洗滌1次。沉淀加提取液50 μL混勻，100 ℃裂解10 min，6 000×g離心5 min，取上清液4 μL作為 PCR反應(yīng)模板。PCR反應(yīng)條件:95℃預(yù)變性2 min，93℃ 10 s，62℃ 50 s，共40個(gè)循環(huán)，單點(diǎn)熒光檢測(cè)在62℃。操作過(guò)程嚴(yán)格按試劑盒使用說(shuō)明在生物安全柜中進(jìn)行。

依據(jù)試劑盒說(shuō)書(shū)提供的判斷標(biāo)準(zhǔn)。Ct值＜38時(shí)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，Ct值顯示UNDET或40，表示標(biāo)本低于檢測(cè)限，報(bào)告為陰性，如標(biāo)本Ct值顯示38～40之間，需重復(fù)檢測(cè)，如結(jié)果仍在38～40之間，則判斷為低于檢測(cè)下限，報(bào)告為陰性。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、HR-HPV各亞型感染比較

650名體檢婦女標(biāo)本中HPV陽(yáng)性73例，陽(yáng)性率為11.23%。感染最多的前5位亞型依次為HPV52(2.62%)、HPV39(1.69%)、HPV58(1.23%)、HPV68(1.08%)和 HPV56(0.92%)。HR-HPV各亞型感染率見(jiàn)表1。

表1 HR-HPV各亞型感染率 ［例(%)］

二、不同年齡組女性HR-HPV感染比較

HR-HPV感染率高峰值為50～59歲組，檢出率為15.09%。30～39歲組檢出率為12.98%，40～49歲組檢出率為9.03%，≥60歲組檢出率為12.22%，均明顯高于20～29歲組(5.49%)，見(jiàn)表2。

表2 不同年齡組女性HR-HPV感染統(tǒng)計(jì)

討 論

HPV是一組DNA內(nèi)切酶譜不同，外殼蛋白質(zhì)抗原各異的嗜上細(xì)胞病毒的總稱，又分為高危型HPV和低危型HPV。宮頸癌的發(fā)生是一個(gè)連續(xù)而漫長(zhǎng)的過(guò)程，高危型HPV感染是誘發(fā)宮頸癌最基本的原因，低危型HPV常引起外生殖器濕疣類(lèi)良性病變。加強(qiáng)對(duì)婦女HR-HPV的早期診斷，采取有效的監(jiān)測(cè)與防治措施可降低宮頸癌發(fā)生及死亡。

本研究結(jié)果表明，650例標(biāo)本中共檢出HRHPV陽(yáng)性73例，檢出率為11.23%，略低于蔣旭峰等［4］對(duì)金華地區(qū)236例可疑患者13.1%(31/236)的檢出率。從各亞型的分布分析，感染最多的亞型依次為 HPV52、HPV39、HPV58、HPV68。有關(guān)HPV亞型分布各地區(qū)報(bào)道［5-7］均有所不同。由此可以看出不同地區(qū)感染亞型存在明顯差異，表現(xiàn)出明顯的人群特征。

同時(shí)本研究還發(fā)現(xiàn)，婦女宮頸HR-HPV感染存在明顯的年齡分布特點(diǎn)，50～59歲組檢出率(15.09%)、30～39歲組檢出率(12.98%)明顯高于20～29歲組檢出率。與王紅旗等［8］對(duì)6 868例婦科門(mén)診患者HPV感染狀況報(bào)道的略有不同，特別是50～59歲組?？赡芘c女性病毒潛伏、機(jī)體免疫力下降、病毒被再次激活有關(guān)。

綜上所述，加強(qiáng)對(duì)婦女宮頸HR-HPV感染的檢測(cè)，能夠有效提高婦女宮頸病變的檢出率，特別是對(duì)于高齡婦女宮頸疾病的篩查，加強(qiáng)健康教育及HR-HPV感染預(yù)防，能夠有效降低宮頸癌的發(fā)生率。

［1］Zur Hausen H.Papillomaviruses and cancer:from basic studies to clinical application［J］.Nat Rev Cancer，2002，2(5):342.

［2］Schiffman M，Castle PE.Human papillomavirus:epidemiology and pubic health［J］.Arch Pathol Lab Med，2003，127(8):930-934.

［3］Zhang WY，Xue YZ，Chen M，et al.Prevalence of high-risk human papillomavirus infection in different cervical lesion among organized health-examination women in Shanghai，China［J］.Chin Med J(Engl)，2008，121(16):1578-1582.

［4］蔣旭峰，蔣群芳.金華地區(qū)女性感染人乳頭瘤病毒基因類(lèi)型分析［J］.放射免疫學(xué)雜志，2009，22(1):85-87.

［5］宋麗君，陳春麗，羅淑桂.HPV基因分型檢測(cè)與宮頸病變的相關(guān)性研究［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，27(3):163-166.

［6］王玉豐，林 玲，劉春雨，等.三亞地區(qū)婦女人乳頭瘤病毒感染的分子流行病學(xué)調(diào)查［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，27(8):628-630.

［7］許潑實(shí)，趙 靜，陳光輝.導(dǎo)流雜交技術(shù)檢測(cè)中原地區(qū)女性人乳頭瘤病毒感染情況［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，27(12):1040-1042.

［8］王紅旗，郭遠(yuǎn)瑜，汪 敏，等.6 868例婦科門(mén)診病人HPV感染狀況及基因型分析［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2010，20(5):1204-1206.