摘 要:為了解貴陽市空腸彎曲菌對常用藥物的敏感性情況,從規(guī)?;B(yǎng)殖場和大型農貿市場采集了175份豬和雞肛門拭子,進行空腸彎曲桿菌的分離鑒定,并采用微生物藥物敏感性試驗執(zhí)行標準(CLSI M100-S20)測定其對12種抗菌藥物的耐藥情況,結果表明,共分離得到29株空腸彎曲桿菌,分離率為16.57%。分離菌對12種抗菌藥物的耐藥率分別是多粘菌素E100%、頭孢噻呋100%、磺胺異惡唑82.76%、土霉素82.76%、氟苯尼考75.86%、氨芐西林68.96%、阿莫西林68.96%、慶大霉素62.07%、恩諾沙星55.17%、氧氟沙星51.72%、大觀霉素41.38%、SMZ34.48%。所有受試菌株中的89.96%具5重以上的耐藥性。
關鍵詞:空腸彎曲菌;耐藥性;微量肉湯稀釋法;藥敏試驗
中圖分類號:S852.61 文獻標識碼:A DOI編碼:10.3969/j.issn.1006-6500.2013.03.010
空腸彎曲桿菌是引起人腸道感染的主要代表菌之一,是一種人和家畜都可攜帶的病原菌,普遍存在于恒溫動物中,家禽中雞的帶菌率最高,除引起腸炎腹瀉外,還引起食物中毒,并伴發(fā)關節(jié)炎、肝炎、格林-巴利綜合癥等免疫損傷性疾病[1-3]。在獸醫(yī)學上,可導致豬、牛、羊流產,不孕,腹瀉以及家禽肝炎[4]。2009年6月農業(yè)部對各省、自治區(qū)、直轄市下達的動物源細菌耐藥性監(jiān)測計劃中包含了空腸彎曲桿菌,因此,空腸彎曲桿菌及其引起的疾病越來越受到關注。本研究就貴陽市花溪區(qū)大型農貿市場及養(yǎng)殖場豬源、雞源空腸彎曲桿菌對12種市售常用抗菌藥物的敏感性進行了測定。
1 材料和方法
1.1 材 料
1.1.1 樣品 從花溪地區(qū)規(guī)模化養(yǎng)殖場和大型農貿市場共采集175份肛門拭子,其中養(yǎng)殖場雞源肛門拭子125份,豬源肛門拭子25份,農貿市場雞源肛門拭子25份。
1.1.2 標準菌株 空腸彎曲桿菌標準菌株(CIC222936)購自中國工業(yè)生物菌種保藏管理中心。
1.1.3 培養(yǎng)基及試劑 bolton選擇性增菌肉湯、布氏肉湯、MH肉湯,改良CCD瓊脂,skirrow瓊脂,哥倫比亞瓊脂均購自上海博微生物科技有限公司;3%過氧化氫、無菌脫纖維羊血購自貴州賽蘭博生物科技公司;氧化酶試紙、馬尿酸鈉水解試劑、吲哚乙酸紙片購自青島海博生物技術有限公司;微需氧產氣袋購自上海寶曼生物科技有限公司。
1.1.4 抗菌藥物 氨芐西林(AM)、阿莫西林(A)、頭孢噻呋(CEF)、慶大霉素(GM)、大觀霉素(SPT)、氟苯尼考(FFC)、磺胺甲基異惡唑(SQ)、復方新諾明(SMZ)、恩諾沙星(ENR)、氧氟沙星(OFL)、多粘菌素E(PME)和土霉素(OTC)購自杭州博微生物技術有限公司。
1.2 方 法
1.2.1 菌株的分離鑒定 空腸彎曲菌的分離鑒定按GB/T 4789.9—2008的標準進行[5]。
1.2.2 藥敏試驗 按照《細菌耐藥性檢測抗感染治療》及微生物藥物敏感性試驗執(zhí)行標準(CLSI m100-s20)進行[6-7]??咕幬锩舾行栽囼炁卸藴嗜绫?所示。
2 結果與分析
2.1 空腸彎曲桿菌的檢出率
150份雞源肛門拭子樣品中檢出空腸彎曲菌26株,其中農貿市場17株,規(guī)模養(yǎng)殖場9株,檢出率17.3%;25份豬源肛門拭子檢出3株;檢出率為12%,平均陽性率16.57%。
2.2 藥敏試驗結果
從表2可以看出,分離菌對12種抗菌藥物的耐藥率分別是多粘菌素E100%、頭孢噻呋100%、磺胺異惡唑82.76%、土霉素82.76%、氟苯尼考75.86%、氨芐西林68.96%、阿莫西林68.96%、慶大霉素62.07%、恩諾沙星55.17%、氧氟沙星1.72%、大觀霉素41.38%、復方新諾明34.48%。
2.3 多重耐藥情況
29株空腸彎曲菌中所有菌株均出現了多重耐藥性,最低的2重耐藥,最高12重耐藥,89.66%的菌株出現了5重以上的耐藥性(表3)。
3 討 論
本試驗采用微需氧產氣袋分離空腸彎曲桿菌的分離率為16.57%,高于江蘇地區(qū)7.6%、河南0.6%、華東地區(qū)8.96%的分離率[9-11],低于山東30.8%、上海43.2%、安徽45.2%、浙江30.4%等地屠宰場中豬盲腸的分出率[11]。在本研究中,雞源樣品檢出率高于豬源樣品,這也說明了家禽中雞是空腸彎曲桿菌帶菌率最高的動物,曾有報告雞攜帶空腸彎曲桿菌最高可達100%[12],因此,做好對雞源空腸彎曲菌的有效監(jiān)控對于防控空腸彎曲菌病的發(fā)生及其傳播具有重要意義。
本試驗采用微量肉湯法對所分離29株空腸彎曲菌進行12種常用抗菌藥物藥敏試驗,結果表明,大觀霉素41.38%,慶大霉素62.07%的耐藥率遠高于江蘇地區(qū) 14.8%[8];比Reina[13]、Bardon[14]報道的1%~9.4%有明顯增高;29株空腸彎曲菌對氨芐西林68.96%耐藥率高于薛峰等[10]37.96%、李彩金等[15]36%檢測結果;而對復方新諾明34.48%耐藥性低于侯鳳琴等[16](88.5%)、黃金林等[17]99.07%,因此,上述藥物應為本地區(qū)養(yǎng)殖場治療空腸彎曲菌病的優(yōu)選藥物。此外全部菌株都出現了多重耐藥性,多數受試株出現5重以上耐藥性,這提示在實際用藥中避免同時交叉用藥,應該科學間歇性輪換用藥。
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