摘 要：研究了6種外源激素（IBA、IAA、NAA、KT、6-BA、GA3）對(duì)鹽脅迫下非洲堇試管苗生長(zhǎng)的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，6種外源激素在一定濃度下可以促進(jìn)0.4%NaCl脅迫下的非洲堇試管苗的新芽、新葉和根的生長(zhǎng)；加入外源激素，不僅可以使非洲堇N99試管苗鹽害減輕，還可以提高試管苗在鹽脅迫下的葉綠素含量，其中，2 mg·L -1 KT對(duì)增加葉綠素含量有非常顯著的作用。

關(guān)鍵詞：非洲堇；鹽脅迫；外源激素；試管苗

中圖分類號(hào)：Q813 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2013.03.002

鹽分是影響植物生長(zhǎng)和產(chǎn)量的一個(gè)重要環(huán)境因子，鹽脅迫會(huì)降低水勢(shì)并導(dǎo)致離子失衡，產(chǎn)生毒害，高鹽會(huì)造成植物生長(zhǎng)量降低甚至死亡。鹽脅迫會(huì)影響幾乎植物所有的重要生命過程，如生長(zhǎng)、光合、蛋白合成、能量和脂類代謝[1-3]。

植物的耐鹽性與其體內(nèi)的激素含量有一定的關(guān)系。在鹽分脅迫下，用外源激素處理，可以提高植物抗鹽性，抵消鹽分脅迫，促進(jìn)植物生長(zhǎng)[4]。鹽脅迫會(huì)導(dǎo)致植物體內(nèi)的激素發(fā)生不同程度的變化。同時(shí)，激素的不均衡性又能使植物適應(yīng)較高濃度的鹽環(huán)境。外源激素能誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗逆反應(yīng)，可以有效地提高植物的抗病性、抗旱性、抗鹽性等，它的作用效果不是立足于消滅逆境，而是更有效地提高植物自身對(duì)逆境的抗性，所以植物一旦獲得這種抗性，就不是單一的，而是綜合的。目前，外源激素已經(jīng)廣泛應(yīng)用于提高農(nóng)作物的抗性方面，但有關(guān)外源激素提高觀賞植物的抗性方面的研究國(guó)內(nèi)外報(bào)道很少。

非洲堇（Saintpqulia ionantha）又名非洲紫羅蘭，原產(chǎn)非洲，為雙子葉植物綱苦苣苔科非洲紫羅蘭屬的多年生長(zhǎng)常綠草本。室內(nèi)栽培一年可開3～4次花，花期長(zhǎng)達(dá)兩個(gè)月，花色艷麗多姿，素有室內(nèi)花卉皇后的美稱，是世界著名的觀賞花卉，受到世界各國(guó)人民的青睞，在世界各地廣為栽培[5]。

本研究闡述了IBA、IAA、NAA、KT、6-BA、GA3 6種外源激素對(duì)鹽脅迫下非洲堇試管苗生長(zhǎng)情況的影響，旨在探討植物鹽脅迫下生理響應(yīng)變化與激素的關(guān)系，以及外源激素對(duì)非洲堇耐鹽性的調(diào)節(jié)作用，為植物抗鹽性研究提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

以生長(zhǎng)正常均一的非洲堇試管苗為試材。

1.2 不同外源激素種類和處理濃度

在添加0.4% NaCl的MS基本培養(yǎng)基中，分別添加6種不同外源激素（IBA、IAA、NAA、KT、6-BA、GA3）0.5，1，2 mg·L-1，以無激素含鹽培養(yǎng)基為對(duì)照。每組處理5個(gè)重復(fù)。15 d后觀察并記錄各處理下的非洲堇試管苗生長(zhǎng)狀況，包括根株數(shù)、總根數(shù)、新葉數(shù)、分化新芽數(shù)，測(cè)定其葉綠素含量。

1.3 葉綠素含量的測(cè)定

葉綠素含量采用95%乙醇浸提法，在波長(zhǎng)470，649，665 nm下測(cè)定吸光度進(jìn)行計(jì)算[6]。

2 結(jié)果與分析

2.1 外源激素對(duì)鹽脅迫下非洲堇試管苗生長(zhǎng)的影響

2.1.1 生長(zhǎng)素對(duì)鹽脅迫下非洲堇試管苗生長(zhǎng)的影響 將非洲堇試管苗接入含有NaCl和各濃度生長(zhǎng)素的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)15 d后，結(jié)果見表1。由表1可以看出，IAA、IBA和NAA對(duì)NaCl脅迫下非洲堇試管苗的生長(zhǎng)均有一定的促進(jìn)作用。IAA和IBA在0.5～1.0 mg·L-1及NAA0.5～2.0 mg·L-1的濃度范圍內(nèi)有利于試管苗根的形成，最大平均根數(shù)高于對(duì)照83.33%。對(duì)試管苗根粗、根長(zhǎng)和葉片數(shù)各激素處理無明顯影響。生長(zhǎng)素的添加對(duì)非洲堇試管苗新芽的分化有良好作用，各處理分生芽數(shù)均高于對(duì)照，其中，NAA2.0 mg·L-1處理高于對(duì)照332.5%。

2.1.2 細(xì)胞分裂素對(duì)鹽脅迫下非洲堇試管苗生長(zhǎng)的影響 NaCl脅迫下加入一定濃度的6-BA與KT，非洲堇試管苗的生長(zhǎng)情況見表2。

與各生長(zhǎng)素相比，兩種細(xì)胞分裂素對(duì)非洲堇試管苗生根的作用不明顯，而對(duì)于葉片和新芽的生長(zhǎng)有一定的作用。各處理平均葉片數(shù)隨激素濃度的升高呈增長(zhǎng)趨勢(shì)，而各激素濃度的變化對(duì)平均根數(shù)、根長(zhǎng)、根粗和分生芽數(shù)的影響無明顯的變化規(guī)律。試驗(yàn)所設(shè)的各濃度處理葉片數(shù)和分生芽數(shù)均高于對(duì)照，其中KT2.0 mg·L-1處理，平均葉片數(shù)7.07片，高于對(duì)照112.31%，平均分生芽數(shù)高于對(duì)照232.50%。

2.1.3 GA3對(duì)鹽脅迫下非洲堇試管苗生長(zhǎng)的影響

由表3可以看出，GA3可以增加0.4%NaCl鹽脅迫下分化的新芽數(shù)，其數(shù)值接近對(duì)照組的4倍；而對(duì)根系的生長(zhǎng)并無太大的影響。

2.2 0.4%NaCl脅迫下添加不同激素對(duì)試管苗葉綠素含量的影響

2.2.1 0.4%NaCl脅迫下添加不同激素對(duì)試管苗葉綠素a含量的影響 由圖1可知，不同的激素對(duì)0.4%NaCl脅迫下非洲堇試管苗葉綠素a含量的影響不同。IAA和NAA濃度變化對(duì)葉綠素a含量的變化的影響趨勢(shì)大體相同，即隨著激素濃度的增加，葉綠素a含量逐漸下降。而KT和6-BA的作用效果卻與之相反，即隨著激素濃度的增加，葉綠素a的含量有所增加，但是增加率略有不同，KT的增加率遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過6-BA。隨IBA和GA3的濃度變化，非洲堇試管苗葉綠素a含量呈現(xiàn)先下降再上升的趨勢(shì)，且在0.5～2.0 mg·L-1濃度范圍內(nèi)試管苗葉綠素a含量均高于或等于對(duì)照。其中，經(jīng)2 mg·L-1 KT處理對(duì)葉綠素a含量的增加幅度最大。

2.2.2 0.4%NaCl脅迫下添加不同激素對(duì)試管苗葉綠素b含量的影響 由圖2可以看出，除KT0.5 mg·L-1處理外，0.4%NaCl脅迫下各處理中非洲堇試管苗葉綠素b含量均高于對(duì)照。隨3種生長(zhǎng)素濃度的變化，非洲堇試管苗葉綠素b含量呈現(xiàn)先下降再上升的趨勢(shì)，而2種細(xì)胞分裂素對(duì)葉綠素b含量的影響與葉綠素a相近，隨著激素濃度的增加，葉綠素b的含量有所增加。GA3處理中除1 mg·L-1處理下葉綠素b含量有顯著提高，其他2濃度處理葉綠素b含量均與對(duì)照相近。

2.2.3 0.4%NaCl脅迫下添加不同激素對(duì)試管苗總?cè)~綠素含量的影響 鹽脅迫下各外源激素對(duì)非洲堇試管苗葉片總?cè)~綠素含量影響趨勢(shì)與葉綠素a含量變化相似，其中GA3處理對(duì)總?cè)~綠素含量影響變化與葉綠素b含量的變化趨勢(shì)相近，其中，2 mg·L-1 KT對(duì)增加0.4%NaCl脅迫下非洲堇試管苗總?cè)~綠素含量有非常顯著的作用。

3 結(jié)論與討論

植物耐鹽機(jī)制是個(gè)相當(dāng)復(fù)雜的問題，很多機(jī)制目前尚不十分清楚，它一般與鹽分的吸收、運(yùn)輸、排泄、分配、膜功能及抗鹽物質(zhì)的合成積累相關(guān)。外源激素能誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗逆反應(yīng)，可以有效地提高植物的抗病性、抗旱性、抗鹽性等。GA3可促進(jìn)鹽脅迫下植物的生長(zhǎng)，抵消鹽分對(duì)菜豆的生長(zhǎng)和光合及運(yùn)輸?shù)鹊囊种谱饔肹7]。外源6-BA能夠增加大麥等植物體內(nèi)細(xì)胞分裂素含量，緩解鹽脅迫對(duì)植物正常生長(zhǎng)的傷害[8]。IAA能夠增加鹽脅迫下大豆幼苗干物質(zhì)產(chǎn)量，提高光合，降低膜脂過氧化及膜的相對(duì)透性，促進(jìn)鹽脅迫下大豆幼苗的生長(zhǎng)[9]。IBA可以促進(jìn)植物主根生長(zhǎng)，提高植物發(fā)芽率和成活率。有學(xué)者認(rèn)為，KT能夠減輕NaCl對(duì)種子萌發(fā)的抑制作用，提高種子發(fā)芽率，可能是由于KT提高了ACC氧化酶活性，增加了乙烯的生物合成和釋放量，從而減輕了鹽分對(duì)種子萌發(fā)的抑制作用[10]。

鄭平生等[11-12]認(rèn)為，外源GA3、6-BA、IAA、IBA和NAA這5種激素均可明顯促進(jìn)一定濃度鹽脅迫下草莓試管苗的生長(zhǎng)，對(duì)鹽脅迫的草莓苗生長(zhǎng)均有緩解作用[9-10]。林必博等[13]研究了在0.4%，0.6%NaCl脅迫下外源激素GA3、6-BA、IAA對(duì)馬鈴薯試管苗耐鹽性的影響，認(rèn)為3種激素均對(duì)馬鈴薯試管苗受到的鹽脅迫具有一定緩解作用。

本研究中IBA、IAA都具有促進(jìn)生根的作用，但是當(dāng)濃度過大時(shí)，促進(jìn)的效果會(huì)減弱。6-BA對(duì)促進(jìn)生根的作用不明顯，但可以促進(jìn)新葉、新芽的生長(zhǎng)，且隨6-BA濃度的升高促進(jìn)效果越強(qiáng)。KT也可以起到促進(jìn)新葉生長(zhǎng)的作用，且經(jīng)過KT處理過的非洲堇試管苗萌發(fā)出的新葉數(shù)，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過其他處理。NAA可以促進(jìn)鹽脅迫下根的生長(zhǎng)、增粗，對(duì)新葉的生長(zhǎng)也有促進(jìn)作用，但是并不明顯。GA3有促進(jìn)新葉生成和新芽分化的功能。

鹽脅迫下植物葉片葉綠素含量不僅直接關(guān)系著植物光合同化過程，而且也是衡量植物耐鹽性的重要生理指標(biāo)之一[14]。有研究表明，在鹽脅迫下，葉細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化主要表現(xiàn)在細(xì)胞膜系統(tǒng)和葉綠體等細(xì)胞器上，其中對(duì)鹽分最敏感的是葉綠體[15]。

由試驗(yàn)結(jié)果可知，不同濃度NaCl鹽脅迫情況下，葉綠素a、葉綠素b及總?cè)~綠素含量變化趨勢(shì)幾乎相同，都是隨著鹽濃度的增大而減少。其中，葉綠素b的含量出現(xiàn)了先減少后增加的趨勢(shì)，但增加率很低。葉片總?cè)~綠素含量下降可能是由于葉綠素酶活性增強(qiáng)，促使葉綠素分解或者由于在鹽脅迫下，植物葉片細(xì)胞中葉綠素與葉綠體蛋白間結(jié)合變得松弛，使更多的葉綠素遭到破壞[16]。

施用一定濃度的外源激素，可以提高0.4%NaCl脅迫下非洲堇葉綠素的含量，其中，2 mg·L -1KT對(duì)增加非洲堇試管苗葉綠素含量有著非常顯著的促進(jìn)作用。低濃度的IBA、IAA、NAA對(duì)提高鹽脅迫下非洲堇試管苗的葉綠素含量也有著較強(qiáng)的促進(jìn)作用。

參考文獻(xiàn)：

[1] 楊少輝，季靜，宋英金，等.鹽脅迫對(duì)植物影響的研究進(jìn)展[J]. 分子植物育種，2006，4（3）：139-142.

[2] 任麗麗，任春明，趙自國(guó).植物耐鹽性研究進(jìn)展[J].山西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（5）：87-90.

[3] 楊秀紅，李建民，董學(xué)會(huì)，等.鹽脅迫對(duì)甘草幼苗生長(zhǎng)及其生理指標(biāo)的影響[J].華北農(nóng)學(xué)報(bào)，2006（4）：39-42.

[4] 王忠.植物生理學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2000：458-459.

[5] 何家濤.非洲紫羅蘭組培技術(shù)研究[J].熱帶農(nóng)業(yè)科技，2006，29（1）：10-11.

[6] 王學(xué)奎.植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)[M].第二版.北京：高等教育出版社，2006：134-136.

[7] 趙可夫，王韶唐.作物抗性生理[M].北京：農(nóng)業(yè)出版社，1990：304.

[8] 朱速松.6-芐基氨基嘌呤對(duì)大麥耐鹽性的調(diào)節(jié)機(jī)理[J].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1996，19（3）：12-16.

[9]魏愛麗，陳云昭.IAA對(duì)鹽脅迫下大豆幼苗膜傷害及抗鹽力的影響[J].西北植物學(xué)報(bào)，2000，20（3）：410-414.

[10] Han K， Huang X L. Synergistic enhancement of ethylene production and germination with inetin and1-aminocy-clopropane-carboxylic acid in lettuce seeds exposed to salt stress[J].J Plant Physiol，1988，87：847.

[11] 鄭平生，金芳，燕麗萍. 幾種外源激素對(duì)鹽脅迫下草莓試管苗生長(zhǎng)的影響[J]. 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，39（3）：277-280.

[12] 鄭平生，金芳. 鹽脅迫下外源激素對(duì)草莓試管苗生長(zhǎng)及生理特性的影響[J]. 落葉果樹，2012，44（1）：10-13.

[13] 林必博，程李香，王蒂. 王玉萍4外源激素對(duì)馬鈴薯試管苗耐鹽性的影響[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（1）：21-23，69.

[14] 陳現(xiàn)臣，王彩霞.鹽脅迫對(duì)西葫蘆葉片光合性能的影響[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007（6）：100-103.

[15] 盧青.植物耐鹽性的分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J].生物學(xué)雜志，2000，17（4）：9-11.

[16] 魏國(guó)強(qiáng)，朱祝軍，方學(xué)智.NaCI脅迫對(duì)不同品種黃瓜幼苗生長(zhǎng)、葉綠素?zé)晒馓匦院突钚匝醮x的影響[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2004，37（11）：1754-1759.