摘要：采用反復硅膠柱色譜法、Sephadex LH-20凝膠色譜法等進行南海紅樹林內(nèi)生真菌Gx-4c的代謝產(chǎn)物分離純化，并通過理化常數(shù)測定和光譜分析鑒定其化學結構。研究結果： 從南海紅樹林內(nèi)生真菌Gx-4c的菌體中分離得到4個代謝產(chǎn)物，經(jīng)波譜解析，分離得到的4個化合物分別為：5，7-二羥基-2-甲基色原酮 （1）、 3 -羥基-2-甲基苯酸 （2）、3，4-二氫-8-羥基-3-甲基-1H-2-苯吡喃-1-酮-5-羧酸（3）、3，4-二氫-8-羥基-3，5-二甲基-1H-2-苯吡喃-1-酮（4）；初步藥理活性顯示化合物1對口腔癌細胞KB、KBv200的抗腫瘤活性值分別為7.5和11.2 Mol。研究結果表明：所有化合物均首次從南海紅樹林內(nèi)生真菌Gx-4c中分離得到。

關鍵詞：紅樹林；內(nèi)生真菌；代謝產(chǎn)物

中圖分類號：O629文獻標識碼：A文章編號：1003-4374（2013）01-0012-03

紅樹林是指生長在熱帶、亞熱帶潮間帶上部，以紅樹植物為主體的常綠灌木或喬木組成的淺灘濕地木本生物群落，是一種陸地向海洋過渡的特殊生態(tài)系統(tǒng)[1] ，紅樹林生態(tài)系統(tǒng)中蘊藏著豐富的動植物資源和微生物資源。紅樹林棲息地被證明是真菌新種屬的豐富來源， 形成了海洋真菌第二大生態(tài)學亞類。我們實驗小組已從中國南海紅樹林內(nèi)生真菌的次級代謝產(chǎn)物中分離到大量新穎的有活性結構的化合物[ 2-4] 。

本文對南海紅樹林內(nèi)生真菌Gx-4c代謝產(chǎn)物進行研究，從菌體中分離得到4個化合物：5，7-二羥基-2-甲基色原酮（1）、3 -羥基-2-甲基苯酸 （2）、3，4-二氫-8-羥基-3-甲基-1H-2-苯吡喃-1-酮-5-羧酸（3）、3，4-二氫-8-羥基-3，5-二甲基-1H-2-苯吡喃-1-酮（4），初步藥理活性顯示化合物1對口腔癌細胞KB、KBv200的抗腫瘤活性值分別為7.5和11.2Mol。

1實驗部分

1.1儀器和試劑

美國Varian公司INOVA-500NB超導核磁共振譜儀和INOVA-300NB核磁共振儀，VG ZAB-HS雙聚焦質(zhì)譜儀，Thermo DSQ電子轟擊電離質(zhì)譜儀，Thermo MAT95XP高分辨質(zhì)譜儀；北京泰克儀器有限公司的X-4數(shù)字顯示顯微熔點測定儀。所用試劑均為廣州化學試劑廠生產(chǎn)，化學純、溶劑經(jīng)重蒸后使用。柱層析硅膠為青島海洋化工廠生產(chǎn)的200-300目硅膠、硅膠H、 薄層硅膠GF254。

1.2菌種培養(yǎng)

紅樹林內(nèi)生真菌Gx-4c采自中國香港，經(jīng)鑒定為擬莖點霉菌（Phomopsis sp.），保存于中山大學化學與化學工程學院。發(fā)酵培養(yǎng)基為葡萄糖10g/L、蛋白胨2g/L、酵母膏1g/L、粗海鹽2g/L，pH7.0。500mL三角瓶內(nèi)裝培養(yǎng)基250mL，1.25×105Pa 滅菌20 min后接種120L，在25℃靜置培養(yǎng)35d，分別收集發(fā)酵液和菌體。

1.3提取與分離

200L發(fā)酵物過濾得菌體和發(fā)酵液，發(fā)酵液濃縮后用乙酸乙酯充分萃取，菌體用甲醇多次浸泡。提取濃縮物分別以體積比1∶2拌硅膠（200-300目）進行柱層析，以石油醚/乙酸乙酯/甲醇進行梯度加壓洗脫。收集各組分再經(jīng)反復柱層析、制備薄層層析、重結晶等方法進行純化。從菌體粗提物（約40g）分離得到化合物1 （ 8mg）、2 （10mg）、3 （7mg）、 4 （8mg） 。

1.4細胞毒活性實驗

參考文獻：

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